生物工程開放實(shí)驗(yàn)和專業(yè)實(shí)驗(yàn)教學(xué)可以培養(yǎng)學(xué)生對問題的分析能力、設(shè)計(jì)開發(fā)能力、研究能力和工程實(shí)踐能力,可以增強(qiáng)學(xué)生的綜合素質(zhì)和創(chuàng)新能力。河北工業(yè)大學(xué)化工學(xué)院生物工程系結(jié)合教學(xué)和科研工作,在生物工程開放實(shí)驗(yàn)、基因工程實(shí)驗(yàn)和專業(yè)實(shí)驗(yàn)講義的基礎(chǔ)上,考慮到內(nèi)容的實(shí)用性、前瞻性和創(chuàng)新性,增加了內(nèi)容的完整性、連貫性和系統(tǒng)性,編成此教材。本書共分五章:第一章包含十一個核酸研究與基因重組的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn);第二章包含五個細(xì)胞培養(yǎng)與發(fā)酵實(shí)驗(yàn);第三章包含四個蛋白質(zhì)的分離純化與鑒定實(shí)驗(yàn);第四章包含五個酶學(xué)實(shí)驗(yàn);第五章包含五個生物活性物質(zhì)的分離及鑒定實(shí)驗(yàn)。本教材適用于生物化工、生物工程、生物技術(shù)、制藥工程和食品工程等專業(yè)本科生開放實(shí)驗(yàn)、基因工程實(shí)驗(yàn)和專業(yè)實(shí)驗(yàn)。
張愛利,河北工業(yè)大學(xué)化工學(xué)院生物工程系,副教授,承擔(dān)過《生物化學(xué)》、《分子生物學(xué)》、《生物工程開放實(shí)驗(yàn)》、《微生物學(xué)》、《生物工程研究型實(shí)驗(yàn)》、認(rèn)識實(shí)習(xí)和畢業(yè)實(shí)習(xí)等教學(xué)任務(wù)。一直從事釀酒酵母細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、合成生物學(xué)和發(fā)酵工程等方面的研究。主持了2 項(xiàng)國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No. 21206028、No.21978065)、1 項(xiàng)教育部博士點(diǎn)基金項(xiàng)目(No. 20121317120014)、1 項(xiàng)河北省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.B2013202288)、1 項(xiàng)河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(No.q2012024)和1項(xiàng)教育部“春暉計(jì)劃”合作科研項(xiàng)目(No.Z2017012)等科研項(xiàng)目。在釀酒酵母Ras-cAMP 信號通路調(diào)控細(xì)胞生長及衰老的分子機(jī)制、醇類燃料生物合成機(jī)制及優(yōu)化方面取得了一定的學(xué)術(shù)成果和創(chuàng)新。
第一章核酸研究與基因重組實(shí)驗(yàn)001
實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌總DNA的制備和分光光度法定量002
實(shí)驗(yàn)二質(zhì)粒DNA的提取和凝膠電泳檢測006
實(shí)驗(yàn)三酵母染色體DNA的提取及驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)011
實(shí)驗(yàn)四PCR擴(kuò)增DNA片段和電泳檢測015
實(shí)驗(yàn)五DNA重組實(shí)驗(yàn)019
實(shí)驗(yàn)六DNA電轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)023
實(shí)驗(yàn)七DNA轉(zhuǎn)化酵母實(shí)驗(yàn)026
實(shí)驗(yàn)八酵母RNA的提取及甲醛變性凝膠電泳029
實(shí)驗(yàn)九Northern 雜交實(shí)驗(yàn)036
實(shí)驗(yàn)十酵母等位基因的分離及遺傳分析040
實(shí)驗(yàn)十一細(xì)菌三親本雜交實(shí)驗(yàn)044
第二章細(xì)胞培養(yǎng)與發(fā)酵實(shí)驗(yàn)047
實(shí)驗(yàn)一植物原生質(zhì)體的分離048
實(shí)驗(yàn)二植物愈傷組織培養(yǎng)和分化實(shí)驗(yàn)050
實(shí)驗(yàn)三細(xì)菌生長曲線的測定053
實(shí)驗(yàn)四酵母菌搖瓶發(fā)酵和培養(yǎng)056
實(shí)驗(yàn)五酵母發(fā)酵罐培養(yǎng)和發(fā)酵過程控制059
第三章蛋白質(zhì)的分離純化與鑒定065
實(shí)驗(yàn)一酵母總蛋白的快速提取及濃度測定066
實(shí)驗(yàn)二蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳071
實(shí)驗(yàn)三蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)075
實(shí)驗(yàn)四凝膠色譜法分離純化蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)081
第四章酶學(xué)實(shí)驗(yàn)087
實(shí)驗(yàn)一有機(jī)磷降解酶產(chǎn)生菌發(fā)酵條件優(yōu)化088
實(shí)驗(yàn)二淀粉酶發(fā)酵條件優(yōu)化093
實(shí)驗(yàn)三重組β-葡萄糖苷酶比活力的測定097
實(shí)驗(yàn)四脂肪酶的固定化及其酶活力測定103
實(shí)驗(yàn)五脂肪酶交聯(lián)酶聚集體的制備及活性檢測107
第五章生物活性物質(zhì)的分離及鑒定111
實(shí)驗(yàn)一HPLC法測定發(fā)酵液中葡萄糖和乙醇含量112
實(shí)驗(yàn)二等電點(diǎn)沉淀法分離維生素B2116
實(shí)驗(yàn)三多元萃取體系萃取發(fā)酵液中林可霉素120
實(shí)驗(yàn)四超臨界萃取青蒿素和HPLC鑒定124
實(shí)驗(yàn)五木質(zhì)纖維素的分級分離與表征128
附錄133