生物技術(shù)、生物工程綜合實驗指南(邱業(yè)先)
《生物技術(shù)、生物工程綜合實驗指南》是生物技術(shù)、生物工程專業(yè)在四年級上學(xué)期開設(shè)的一門的專業(yè)必修綜合性實驗課程。
《生物技術(shù)、生物工程綜合實驗指南》由16章內(nèi)容組成，主要包括細胞工程（植物細胞和動物細胞工程技術(shù)）、微生物實驗技術(shù)、發(fā)酵工程、酶工程、基因工程、生物分離工程、食品生物技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、生物芯片技術(shù)和生物信息學(xué)基礎(chǔ)等內(nèi)容。實驗內(nèi)容基本覆蓋了生物技術(shù)的上中下游的全過程，各個實驗（模塊）既是獨立的，內(nèi)容上又是聯(lián)系的。
邱業(yè)先，蘇州科技學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院，院長 教授，(包括教學(xué)、科研、設(shè)計、生產(chǎn)、經(jīng)營、管理等方面，重點說明相關(guān)教學(xué)經(jīng)歷及取得的成績。)
主要從事酶學(xué)及生物技術(shù)、生物工程等方面的教學(xué)研究工作。主講過本科和研究生的生物化學(xué)、分子生物學(xué)等課程，先后主持三項國家自然科學(xué)基金項目和省部級項目十余項。曾獲省科技進步2等獎一項，3等獎一項。先后在有關(guān)刊物發(fā)表學(xué)術(shù)論文90余篇。編寫全國統(tǒng)編本科教材5本。曾任江西省跨世紀學(xué)科帶頭人，江西省生化學(xué)會副理事長，江西省政府學(xué)位委員會委員。1996年獲國務(wù)院特殊津貼，2001年獲江西省優(yōu)秀教師。先后招收碩士研究生25名（16名已畢業(yè)），博士研究生4名（1名已畢業(yè)）。
第一章植物細胞工程技術(shù)1
實驗一植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基的配制及滅菌1
實驗二植物組織快速繁殖技術(shù)——以脫毒快繁為例2
實驗三植物細胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)3
實驗四聚乙二醇誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合5
實驗五農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化8
第二章動物細胞工程技術(shù)11
實驗一動物細胞培養(yǎng)基的配制與細胞計數(shù)11
實驗二動物細胞原代培養(yǎng)——鼠成纖維細胞的分離與永生化13
實驗三動物細胞繼代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇15
實驗四細胞系培養(yǎng)18
實驗五外源基因在哺乳動物細胞系中的表達20
第三章微生物技術(shù)23
實驗一水中細菌總數(shù)的測定23
實驗二多管發(fā)酵法測定水中大腸菌群25 第一章植物細胞工程技術(shù)1
實驗一植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基的配制及滅菌1
實驗二植物組織快速繁殖技術(shù)——以脫毒快繁為例2
實驗三植物細胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)3
實驗四聚乙二醇誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合5
實驗五農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化8
第二章動物細胞工程技術(shù)11
實驗一動物細胞培養(yǎng)基的配制與細胞計數(shù)11
實驗二動物細胞原代培養(yǎng)——鼠成纖維細胞的分離與永生化13
實驗三動物細胞繼代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇15
實驗四細胞系培養(yǎng)18
實驗五外源基因在哺乳動物細胞系中的表達20
第三章微生物技術(shù)23
實驗一水中細菌總數(shù)的測定23
實驗二多管發(fā)酵法測定水中大腸菌群25
實驗三廢水硝化?反硝化生物脫氮31
實驗四微生物吸附法去除重金屬34
實驗五有機污染物的微生物降解35
第四章基因工程技術(shù)39
實驗一菌液培養(yǎng)和質(zhì)粒提取39
實驗二瓊脂糖凝膠電泳42
實驗三PCR擴增目的基因43
實驗四從PCR產(chǎn)物中回收目的DNA片段45
實驗五目的基因片段與載體連接（TA克�。�46
實驗六感受態(tài)菌的制備47
實驗七細菌轉(zhuǎn)化49
實驗八重組子的篩選與酶切鑒定50
第五章分子生物學(xué)應(yīng)用技術(shù)54
實驗一Southern雜交54
實驗二Northern雜交56
實驗三Western印跡59
實驗四PCR引物設(shè)計63
實驗五隨機擴增多態(tài)性技術(shù)（RAPD）64
實驗六限制性片段長度多態(tài)性技術(shù) (RFLP)65
實驗七擴增片段長度多態(tài)性技術(shù)（AFLP）67
實驗八簡單序列重復(fù)技術(shù)（SSR）70
第六章蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)74
實驗一等電聚焦電泳74
實驗二SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳78
實驗三磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)——32P放射性標記檢測80
實驗四磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)——PRO?Q Diamond染色法82
實驗五定量蛋白質(zhì)組學(xué)——蛋白質(zhì)同位素標記83
實驗六定量蛋白質(zhì)組學(xué)——熒光標記86
第七章生物芯片技術(shù)89
實驗一基因表達譜芯片檢測肺癌A549細胞89
實驗二蛋白質(zhì)芯片檢測人肺癌A549細胞中細胞因子表達92
實驗三組織芯片技術(shù)94
第八章發(fā)酵工程技術(shù)96
實驗一發(fā)酵過程中微生物的菌體量與菌體密度及發(fā)酵液黏度測定96
實驗二發(fā)酵過程中溶解氧的控制與測定99
實驗三林可霉素發(fā)酵過程工藝控制103
實驗四L?谷氨酸的發(fā)酵與提取108
實驗五生物油脂發(fā)酵過程工藝控制111
第九章食品生物技術(shù)116
實驗一葡萄酒釀造116
實驗二酸奶釀造及乳酸快速測定117
實驗三平菇生產(chǎn)技術(shù)119
第十章酶的分離提取與純化技術(shù)121
實驗一槭樹葉蛋白酶活力測定121
實驗二槭樹葉蛋白酶分離純化123
實驗三槭樹葉蛋白酶的氨基酸組成124
實驗四槭樹葉蛋白酶動力學(xué)126
實驗五槭樹葉蛋白酶抑制作用動力學(xué)127
第十一章酶固定化技術(shù)131
實驗一固定化酵母乙醇發(fā)酵131
實驗二固定化葡萄糖異構(gòu)酶生產(chǎn)果葡糖漿134
實驗三β?半乳糖苷酶的固定化及應(yīng)用136
第十二章生物分離技術(shù)140
實驗一銀杏葉總黃酮提取、分離與初步鑒定140
實驗二溶菌酶的提取、分離純化及其活性測定145
實驗三超臨界萃取薄荷揮發(fā)油151
實驗四荷葉生物堿提取與分離純化153
實驗五平菇多糖提取與分離純化156
第十三章生物信息學(xué)基礎(chǔ)159
實驗一基因和基因組數(shù)據(jù)庫159
實驗二蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫160
實驗三同源性搜索163
實驗四分子系統(tǒng)發(fā)生分析164
附錄167
附錄一法定計量單位和單位換算167
附錄二常見緩沖液配制168
附錄三離心機轉(zhuǎn)速與相對離心力換算170
附錄四色譜法常用數(shù)據(jù)173
附錄五常用電泳緩沖液及凝膠加樣緩沖液176
附錄六植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基配方177
附錄七常見市售酸堿濃度178
附錄八主要的限制性核酸內(nèi)切酶作用位點及切割形成DNA片段的平均大小179
附錄九幾種主要的質(zhì)粒載體酶切位點及選擇標記180
附錄十常見元素的相對原子質(zhì)量表185
附錄十一化學(xué)試劑規(guī)格186
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