本書分為基礎實驗、綜合創(chuàng)新實驗兩部分。主要內(nèi)容包括:目的基因的PCR擴增及瓊脂糖凝膠電泳分析;DNA重組、感受態(tài)細胞的制備及轉化等。
現(xiàn)代分子生物學研究技術已經(jīng)滲人到生命科學的各個分支學科及醫(yī)藥、農(nóng)林的各個領域,它的迅速發(fā)展正改變著生命科學的面貌,對分子克隆技術的掌握與應用已成為這些學科在新的高度和水平揭示生命現(xiàn)象的共同需求。
本書由長期從事分子生物學教學和科研工作的人員編寫。編寫組成員在大量分析國內(nèi)外研究方向及研究熱點的基礎上,結合在長期教學與科研實踐中積累的豐富資料與寶貴經(jīng)驗,設置了思路清晰、實用易懂、層次分明的實驗內(nèi)容。本書具有三個顯著特征:一是模塊化,主要體現(xiàn)在實驗內(nèi)括基礎實驗、創(chuàng)新綜合型實驗,這種架構既適合于本科生的實驗指導,也適合于研究生和初學者的科研指導;二是具有地域,本書中所展現(xiàn)的實驗方法不括了模式物種的操作方法,還列舉了基因組和內(nèi)容物復雜的環(huán)境生物(如嗜鹽細菌、荒漠植物、棉花等物種)核酸的分離、分子雜交等技術;三是綜合創(chuàng)新型,綜合創(chuàng)新型模塊的實驗內(nèi)容適合于本科生創(chuàng)新能力的培養(yǎng),也適合于研究生綜合能力的培養(yǎng),同時可為科研人員學用這些新技術提供指導和參考。
在本書的編寫中,王彥芹主要負責教材的結構設置及實驗十二、十三的編寫及統(tǒng)稿,趙沿海主要負責實驗十四、十八的編寫,劉逸泠主要負責實驗十六、十七的編寫,馬劉峰、都娟負責實驗一的編寫,王鶴萌主要負責實驗十五、十九的編寫,鞏慧玲負責實驗九的編寫慧芳負責實驗十的編寫,羅曉霞負責實驗十一的編寫,朱新霞負責實驗八的編寫,夏占峰負責實驗二的編寫,白寶偉負責實驗三的編寫,劉占文負責實驗四的編寫,應璐負責實驗六的編寫,鄧芳負責實驗七的編寫,郭媛負責實驗五的編寫及校稿。
本書得到了專業(yè)(生物技術)和塔里木大學專業(yè)(應用生物科學)建設項目的資助,在此表示衷心感謝!本書借鑒和參考了多位同行的有關書籍、文獻,在此謹向參閱資料的有關作者致以誠摯的謝意!由于時間和水平有限,書中難免存在疏漏和不當之處,敬請不吝指正。
王彥芹,女,1974年10月生,博士,教授,塔里木大學碩士生導師,塔里木大學教學名師,生物技術國家專業(yè)負責人。本人從事教育工作17年來,主要承擔本科生的《分子生物學》、《基因工程》、《基因工程實驗》、研究生的《基因工程原理》、《生物化學與分子生物學技術》等課程的教學工作?茖W研究方面從事植物逆境生物學的研究,主要從荒漠植物抗逆性評價、抗逆基因資源的發(fā)掘與利用出發(fā),獲得了一批抗逆性能基因,并用于棉花的抗逆性生物技術育種的研究。主持完成國家自然科學項目2項,主持并完成塔里木大學校長2項,主持完成華中農(nóng)業(yè)大學作物遺傳改良國家實驗室開放課題1項,主持兵團“強南”科技創(chuàng)新骨干人才項目1項。發(fā)表研究論文30余篇,其中SCI收錄5篇;獲發(fā)明3項,實用新型專利2項;獲兵團科步1項,參與出版專著3部。
第一部分基礎實驗
實驗一 目的基因的PCR擴增及瓊脂糖凝膠電泳分析
實驗二 DNA重組、感受態(tài)細胞的制備及轉化
質粒的提取及酶切鑒定
實驗四原核表達載體的構建及原核表達蛋白的SDS-PAGE分析…
實驗五植物表達載體的構建及轉化
實驗六真核生物基因組DNA的提取
實驗七荒漠植RNA的提取及分析
實驗八環(huán)境微生物基因組DNA的提取及分析
第二部分綜合創(chuàng)新實驗
實驗九分子雜交分析基因拷貝數(shù)及表達水平
實驗十環(huán)境土壤宏基因組DNA的提取
實驗十一微生物基因組文庫的構建
實驗十二RACE技術克隆荒漠植物基因的cDNA全長
實驗十三 Genome Wa技術克隆荒漠植物特異基因的調(diào)控序列
實驗十四利用CRISPR-Cas9系統(tǒng)驗證能
實驗十五酵母雙雜交技術分析蛋白質互作關系
實驗十六原位雜交技術
實驗十七蛋白質的分離純化及雙向電泳
實驗能基因的亞細胞定位及檢測技術
實驗十九染色質免疫共沉淀技術