本書以構建整合型實驗教學體系為目的，整合了細胞生物學、醫(yī)學遺傳學、生物化學及分子生物學的實驗教學內(nèi)容，并結合教師的科研，構建新的“四合一”實驗教學體系，既克服了單門課程教材體系單一、內(nèi)容相互割裂的缺陷，也有利于培養(yǎng)學生的綜合分析能力與實踐能力。
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基礎醫(yī)學的實驗教學是培養(yǎng)學生實踐能力、觀察與分析能力和科學思維的主要方式，提高實驗教學質(zhì)量是提升整體醫(yī)學教育水平的重要途徑。細胞生物學、醫(yī)學遺傳學、生物化學及分子生物學的實驗技術是當代醫(yī)學研究的重要手段和方法，已廣泛滲透到臨床醫(yī)學的各個領域，也是醫(yī)學相關專業(yè)和各層次學生的必修實驗課。為了適應高等醫(yī)學院校整合實驗教學的改革和發(fā)展，構建多層次、多模塊的分子醫(yī)學實驗教學體系，同時鑒于整合課程沒有合適的實驗教程，我們編寫了本書。這是教學改革實踐的要求，也是對整合課程教材建設的探索。
本書共收編了26個實驗，包括了上述4門課程的常規(guī)核心技術，如細胞培養(yǎng)、細胞器分離與純化、細胞骨架顯示等細胞生物學技術；骨髓細胞染色體與人淋巴細胞G帶核型分析、紅細胞葡糖-6-磷酸脫氫酶家系分析等醫(yī)學遺傳學實驗；也包括血紅蛋白的醋酸纖維薄膜、等電聚焦與凝膠柱色譜分離、堿性磷酸酶的分離純化及比活性測定等生物化學實驗；還包括真核基因組與線粒體DNA提取、G6PD基因擴增、小鼠PKC8基因克隆與表達等分子生物學實驗。綜合性實驗則是上述整合課程的實驗技術及其應用，如紅細胞葡糖-6-磷酸脫氫酶活性測定及家系分析、鐮狀紅細胞貧血與地中海貧血的基因診斷等；而抗氧化分子清除自由基活性檢測與細胞周期、細胞增殖與凋亡檢測等設計性實驗則結合了教師科研課題，有利于培養(yǎng)學生的科研思維。
本書注重上述4門課程的基礎性實驗與整合性實驗相結合、實驗技術與臨床應用相結合、實踐技能與科研素質(zhì)培養(yǎng)相結合。各高等醫(yī)學院校根據(jù)各專業(yè)各層次學生的培養(yǎng)目標和要求，可選擇本書中不同技術、不同層次的實驗項目實施教學。此外，本書可以作為廣大教師、研究生、醫(yī)師和技術人員科研工作的重要參考書。
由于編者水平有限，各醫(yī)學院校的實驗教學模式和條件存在差異，書中存在不當或錯誤之處，懇請同行專家和同學們批評指正，提出寶貴意見。
目 錄
前言
實驗一 光學顯微鏡的結構和使用1
實驗二 光鏡下細胞基本形態(tài)結構的觀察及生物繪圖6
實驗三 細胞培養(yǎng)技術9
實驗四 細胞核與線粒體的分級分離18
實驗五 細胞內(nèi)DNA 和RNA及細胞骨架(微絲)觀察21
實驗六 CCK-8法檢測HepG2細胞的增殖25
實驗七 小鼠骨髓細胞染色體標本的制作及觀察28
實驗八 人外周血淋巴細胞G顯帶染色體標本制備及核型分析32
實驗九 血清蛋白的鹽析及清/球比值的測定38
實驗十 丙二酸對琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制作用41
實驗十一 血紅蛋白的醋酸纖維薄膜電泳44
實驗十二 血紅蛋白的等電聚焦分離及其等電點測定47
實驗十三 血紅蛋白與核黃素的凝膠柱色譜分離52
實驗十四 兔肝堿性磷酸酶的分離純化及比活性測定55
實驗十五 紅細胞葡糖-6-磷酸脫氫酶活性測定及家系分析60
實驗十六 真核細胞線粒體基因組DNA提取65
實驗十七 人類性別鑒定(基于PCR、X或Y染色質(zhì)的方法)68
實驗十八 G6PD基因全序列查找、引物設計及外顯子12 的擴增76
實驗十九 鐮狀紅細胞貧血的基因診斷(RFLP分析)81
實驗二十 地中海貧血初步篩查及缺失型α地貧基因診斷84
實驗二十一 抗氧化分子清除自由基活性檢測87
實驗二十二 小鼠腦組織總RNA提取與RT-PCR獲取真核基因片段91
實驗二十三 小鼠PKCε基因的克隆、鑒定及其6His融合蛋白的大腸桿菌表達和純化97
實驗二十四 細胞周期、細胞增殖與凋亡檢測的實驗設計106
實驗二十五 自毀容貌綜合征診斷的實驗設計108
實驗二十六 G6PD缺乏癥診斷的實驗設計110
分子醫(yī)學實驗報告111
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