生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程（第三版）
定 價(jià)：29.8 元
叢書名：普通高等教育“十三五”規(guī)劃教材
- 作者：楊建雄主編
- 出版時(shí)間：2014/3/1
- ISBN：9787030397362
- 出 版 社：科學(xué)出版社
- 中圖法分類：Q5-33
- 頁碼：232
- 紙張：膠版紙
- 版次：3
- 開本：16K
楊建雄等編著的《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技 術(shù)教程(第3版）》力求全面系統(tǒng)、深入淺出、簡(jiǎn)明扼 要、注重實(shí)用，技術(shù)原理的敘述避免與理論課的重復(fù) ，淡化純理論(如層析技術(shù)中的塔板理論)的敘述。各 章的實(shí)驗(yàn)均屬于同一類型，且已有技術(shù)原理的系統(tǒng)敘 述，故每個(gè)實(shí)驗(yàn)的原理均可寫得十分簡(jiǎn)短。每一章的 各個(gè)實(shí)驗(yàn)所用器材相近，且操作步驟中不難找出所需 的器材，故本書省去了實(shí)驗(yàn)的器材部分，在減小篇幅 的同時(shí)，突出了操作步驟。經(jīng)過反復(fù)精選和修改，使 本書能在較小的篇幅內(nèi)容納較多的內(nèi)容。
《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程(第3版） 》適合于作為本科生或碩士研究生實(shí)驗(yàn)技術(shù)課的教材 使用，也可供有關(guān)科技人員參考。
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《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程（第三版）》前按照實(shí)驗(yàn)技術(shù)自身的體系，全面系統(tǒng)地講述了生物化學(xué)與分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理，并將53個(gè)難度不等的實(shí)驗(yàn)按技術(shù)類別分列于5章中，可供不同條件的學(xué)校選做。第六章介紹了開設(shè)綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)、方法及設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的實(shí)施方案，編入7個(gè)難度適中的綜合性實(shí)驗(yàn)。
《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程（第三版）》適于用作教材，將生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)獨(dú)立設(shè)課，通過講解、操作結(jié)合的模式，對(duì)生命科學(xué)各專業(yè)本科生和部分專業(yè)碩士研究生進(jìn)行系統(tǒng)的生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)訓(xùn)練，也可供有關(guān)科技人員參考。
目錄
第三版前言
第二版前言
第一版前言
第一章 定量分析技術(shù) 1
第一節(jié) 滴定分析法 1
一、基本原理 1
二、標(biāo)準(zhǔn)溶液 3
三、滴定分析的計(jì)算 4
四、減小滴定誤差的方法 6
第二節(jié) 紫外可見分光光度法 7
一、基本原理 7
二、分光光度計(jì)的主要部件 8
三、分光光度法的定性和定量 9
四、減小測(cè)定誤差的方法 10
第三節(jié) 熒光分析法 11
一、基本原理 11
二、熒光儀的主要部件 12
三、熒光分析法的定性和定量 12
四、減小測(cè)量誤差的方法 14
第四節(jié) 酶活力及動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)的測(cè)定 14
一、酶活力的測(cè)定 15
二、Km和Vmax的測(cè)定 17
三、其他動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)的測(cè)定 17
實(shí)驗(yàn)1-1 粗脂肪的提取和定量測(cè)定 18
實(shí)驗(yàn)1-2 碘價(jià)的測(cè)定(Hanus法) 19
實(shí)驗(yàn)1-3 皂化價(jià)的測(cè)定 20
實(shí)驗(yàn)1-4 酸價(jià)的測(cè)定 21
實(shí)驗(yàn)1-5 蛋白質(zhì)的測(cè)定(凱氏定氮法) 21
實(shí)驗(yàn)1-6 2,6-二氯酚靛酚法測(cè)定維生素C的含量 23
實(shí)驗(yàn)1-7 碘量法測(cè)定維生素C的含量 24
實(shí)驗(yàn)1-8 血糖定量測(cè)定(GODGPAP法) 25
實(shí)驗(yàn)1-9 蒽酮比色定糖法 26
實(shí)驗(yàn)1-10 3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定還原糖含量 26
實(shí)驗(yàn)1-11 血清膽固醇的定量測(cè)定(磷硫鐵法) 27
實(shí)驗(yàn)1-12 血清總膽固醇的測(cè)定(鄰苯二甲醛法) 28
實(shí)驗(yàn)1-13 雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 29
實(shí)驗(yàn)1-14 Folin試劑法(Lowry法)測(cè)定蛋白質(zhì)含量 29
實(shí)驗(yàn)1-15 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 30
實(shí)驗(yàn)1-16 紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 31
實(shí)驗(yàn)1-17 紫外吸收法測(cè)定核酸含量 32
實(shí)驗(yàn)1-18 二苯胺顯色法測(cè)定DNA含量 33
實(shí)驗(yàn)1-19 地衣酚顯色法測(cè)定RNA含量 34
實(shí)驗(yàn)1-20 熒光法測(cè)定維生素B2含量 34
實(shí)驗(yàn)1-21 血清丙氨酸氨基移換酶(ALT)的測(cè)定 35
實(shí)驗(yàn)1-22 酸性磷酸酯酶的測(cè)定 37
第二章 提取、沉淀和離心分離技術(shù) 38
第一節(jié) 提取技術(shù) 38
一、材料的選擇與處理 38
二、細(xì)胞的破碎 39
三、抽提 40
第二節(jié) 沉淀分離技術(shù) 42
一、蛋白質(zhì)的沉淀分離 42
二、核酸的提取與沉淀分離 45
三、多糖的提取和分離 46
四、小分子活性成分的提取和分離 48
第三節(jié) 膜分離技術(shù) 56
一、膜分離技術(shù)的分類 56
二、膜的分類 57
三、膜的使用壽命 57
四、透析 58
五、微濾、超濾和反滲透 59
第四節(jié) 提取物的濃縮、結(jié)晶和干燥 60
一、濃縮 60
二、結(jié)晶 62
三、干燥 63
第五節(jié) 離心分離技術(shù) 64
一、離心機(jī)的種類與用途 64
二、離心分離方法的選擇 65
三、離心條件的確定 66
四、離心操作的注意事項(xiàng) 68
實(shí)驗(yàn)2-1 香菇多糖的制備 68
實(shí)驗(yàn)2-2 卵磷脂的制備 69
實(shí)驗(yàn)2-3 大蒜SOD的提取與分離 71
實(shí)驗(yàn)2-4 菜花(花椰菜)中核酸的分離和鑒定 72
實(shí)驗(yàn)2-5 酵母RNA的提取與分離 73
實(shí)驗(yàn)2-6 從肝臟中提取DNA 74
第三章 層析技術(shù) 76
第一節(jié) 吸附層析 76
一、吸附柱層析 77
二、大孔吸附樹脂和聚酰胺柱層析 80
三、聚酰胺薄膜層析 81
第二節(jié) 分配層析 82
一、概述 82
二、紙層析 83
第三節(jié) 凝膠層析 86
一、基本原理 86
二、凝膠的選擇 87
三、操作 88
第四節(jié) 離子交換層析 89
一、基本原理 89
二、離子交換劑 90
三、操作 93
第五節(jié) 親和層析 95
一、配基與偶聯(lián)凝膠的選擇與處理 95
二、親和層析的操作條件 96
第六節(jié) 薄層層析 96
一、支持劑的選擇與處理 97
二、薄層板的制作 97
三、層析方法 98
第七節(jié) 氣相色譜 99
一、基本原理 99
二、氣相色譜的氣路系統(tǒng) 100
三、色譜柱 100
四、檢測(cè)器 102
五、定性和定量方法 102
第八節(jié) 高效液相色譜 103
一、概述 103
二、HPLC的特點(diǎn) 103
三、HPLC的分類 104
四、HPLC的儀器構(gòu)成 105
五、定性定量方法 106
實(shí)驗(yàn)3-1 氨基酸的紙層析 107
實(shí)驗(yàn)3-2 微晶纖維素薄板層析法分離氨基酸 108
實(shí)驗(yàn)3-3 核苷酸的離子交換層析 109
實(shí)驗(yàn)3-4 DNS-氨基酸的聚酰胺薄膜層析 110
實(shí)驗(yàn)3-5 凝膠層析測(cè)定蛋白質(zhì)的Mr 111
實(shí)驗(yàn)3-6 胰蛋白酶的親和層析 112
實(shí)驗(yàn)3-7 HPLC法測(cè)定生物類黃酮含量 113
實(shí)驗(yàn)3-8 HPLC法測(cè)定維生素A含量 114
第四章 電泳技術(shù) 115
第一節(jié) 基本原理 115
一、泳動(dòng)度 115
二、影響泳動(dòng)度的因素 116
第二節(jié) 乙酸纖維素薄膜電泳 117
第三節(jié) 瓊脂糖凝膠電泳 118
一、瓊脂糖凝膠的特點(diǎn) 118
二、DNA的瓊脂糖凝膠電泳 119
三、印跡轉(zhuǎn)移電泳 120
四、交變脈沖電場(chǎng)凝膠電泳 120
第四節(jié) 聚丙烯酰胺凝膠電泳 121
一、聚丙烯酰胺凝膠的特點(diǎn) 121
二、凝膠聚合的原理及有關(guān)特性 122
三、PAGE原理 124
四、SDS-PAGE原理 125
五、聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳原理 126
六、聚丙烯酰胺凝膠雙向電泳原理 129
第五節(jié) 高效毛細(xì)管電泳 130
一、基本原理 130
二、實(shí)驗(yàn)方法 131
三、分離類型及應(yīng)用 132
第六節(jié) 免疫分析技術(shù) 133
一、抗體的性質(zhì)和制備 133
二、抗原抗體反應(yīng) 137
實(shí)驗(yàn)4-1 血清蛋白的乙酸纖維素薄膜電泳 141
實(shí)驗(yàn)4-2 垂直板PAGE分離血清蛋白 143
實(shí)驗(yàn)4-3 SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量 144
實(shí)驗(yàn)4-4 等電聚焦電泳測(cè)定血清蛋白質(zhì)等電點(diǎn) 145
實(shí)驗(yàn)4-5 DNA的瓊脂糖凝膠電泳 147
實(shí)驗(yàn)4-6 PAGE分離RNA 148
實(shí)驗(yàn)4-7 對(duì)流免疫電泳法測(cè)定胎兒甲種球蛋白 149
實(shí)驗(yàn)4-8 火箭免疫電泳法測(cè)定抗原含量 150
第五章 分子生物學(xué)基本技術(shù) 151
第一節(jié) DNA的體外合成 151
一、DNA的化學(xué)合成 151
二、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù) 152
第二節(jié) 核酸的分子雜交 156
一、探針的種類與選擇 156
二、標(biāo)記物的選擇 157
三、探針的放射性同位素標(biāo)記 158
四、探針的非放射性標(biāo)記 158
五、膜上印跡雜交的條件選擇 159
六、雜交信號(hào)的檢測(cè) 161
七、DNA芯片技術(shù)及應(yīng)用 162
第三節(jié) 基因克隆 163
一、目的基因的來源 163
二、常用的克隆載體 164
三、DNA分子的體外連接 166
四、重組子導(dǎo)入受體細(xì)胞 167
五、重組子的篩選 167
六、基因組文庫的構(gòu)建 169
七、cDNA文庫的構(gòu)建 170
第四節(jié) 基因表達(dá) 172
一、原核生物的表達(dá)載體 173
二、用于原核細(xì)胞表達(dá)的外源基因 174
三、提高表達(dá)水平的措施 174
四、外源基因在酵母細(xì)胞中的表達(dá) 177
五、外源基因在昆蟲桿狀病毒中的表達(dá) 178
六、外源基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá) 179
第五節(jié) 轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 182
一、轉(zhuǎn)基因植物 182
二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 183
第六節(jié) 核酸的序列測(cè)定 185
一、鏈終止法 186
二、新一代高通量測(cè)序技術(shù) 186
實(shí)驗(yàn)5-1 植物基因組DNA的提取 188
實(shí)驗(yàn)5-2 動(dòng)物基因組DNA的提取 190
實(shí)驗(yàn)5-3 細(xì)菌基因組DNA的提取 191
實(shí)驗(yàn)5-4 質(zhì)粒DNA的提取 192
實(shí)驗(yàn)5-5 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR) 194
實(shí)驗(yàn)5-6 質(zhì)粒DNA的酶切及電泳鑒定 195
實(shí)驗(yàn)5-7 DNA重組 196
實(shí)驗(yàn)5-8 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化 196
實(shí)驗(yàn)5-9 外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá) 197
第六章 綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 198
實(shí)驗(yàn)6-1 超氧化物歧化酶的分離純化和同工酶分析 199
實(shí)驗(yàn)6-2 蛋白質(zhì)印跡分析 203
實(shí)驗(yàn)6-3 蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳 205
附錄一 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理 206
附錄二 調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計(jì)算表(25℃) 211
附錄三 常見生化物質(zhì)電泳后的染色方法 212
附錄四 常用緩沖液的配制 215
參考書目 220
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