定 價(jià):30 元
叢書名:生物技術(shù)與生物工程專業(yè)能力培養(yǎng)型系列教材
- 作者:蔣群,李志勇主編
- 出版時(shí)間:2010/7/1
- ISBN:9787030220554
- 出 版 社:科學(xué)出版社
- 中圖法分類:Q81-33
- 頁碼:254
- 紙張:膠版紙
- 版次:1
- 開本:16開
《生物工程綜合實(shí)驗(yàn)》主要由13個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)組成;在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上,每個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)都以產(chǎn)品生產(chǎn)為主線,綜合利用多種實(shí)驗(yàn)技術(shù),力爭(zhēng)使學(xué)生得到多方面的綜合訓(xùn)練;內(nèi)容上,涵蓋了發(fā)酵工程、基因工程、酶工程、細(xì)胞工程、生物分離工程及生物信息學(xué)等;應(yīng)用上,包括了醫(yī)藥、能源、食品等,特別是生物柴油、燃料乙醇、纖維素的利用等目前生物工程領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。教材突出生物工程實(shí)驗(yàn)的綜合性與現(xiàn)代性,適合作為生物工程(技術(shù))專業(yè)高年級(jí)本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)的教科書。
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一般認(rèn)為,生物技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了傳統(tǒng)生物技術(shù)(釀造)、近代生物技術(shù)(微生物發(fā)酵)、現(xiàn)代生物技術(shù)(生物工程)三個(gè)階段。生物工程(bioengineering)是運(yùn)用生物學(xué)、化學(xué)和工程學(xué)等學(xué)科相結(jié)合的方法,利用生物體制造人類所需產(chǎn)品、改造環(huán)境的一門多學(xué)科交叉的應(yīng)用技術(shù)。生物工程已經(jīng)在食品、醫(yī)藥、輕工、農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)、能源等領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用,已經(jīng)產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)效益與社會(huì)效益。20世紀(jì)70年代開始,轉(zhuǎn)基因技術(shù)、系統(tǒng)生物學(xué)、生物信息學(xué)、化學(xué)生物學(xué)、基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)等學(xué)科或技術(shù)的建立與發(fā)展極大地推動(dòng)了生物工程的快速發(fā)展。研究對(duì)象從微生物擴(kuò)展到動(dòng)植物細(xì)胞、微藻,研究領(lǐng)域從陸地?cái)U(kuò)展到海洋、太空。在微生物工程(發(fā)酵工程)、酶工程、基因工程、細(xì)胞工程、生物反應(yīng)工程、生物分離工程等經(jīng)典生物工程技術(shù)基礎(chǔ)上,誕生了代謝工程、蛋白質(zhì)工程、組織工程等新型生物工程技術(shù)。目前,生物工程已經(jīng)成為與微電子技術(shù)、新材料技術(shù)和新能源技術(shù)并列的重要科學(xué)技術(shù),對(duì)于解決人類面臨的糧食、健康、環(huán)境、能源等重大問題將發(fā)揮越來越重要的作用。
生物工程專業(yè)是我國眾多高校優(yōu)先和重點(diǎn)發(fā)展的學(xué)科專業(yè)之一,生物工程專業(yè)教材的系統(tǒng)化建設(shè)是培養(yǎng)高質(zhì)量生物工程專業(yè)人才的前提。目前生物工程一體化的系列教材相對(duì)欠缺。為滿足我國普通高等教育的需要,上海交通大學(xué)受科學(xué)出版社委托,組織上海交通大學(xué)、華南理工大學(xué)、東華大學(xué)等一批工作在生物技術(shù)、生物工程教學(xué)、科研第一線的教師編寫本套“生物技術(shù)與生物工程專業(yè)能力培養(yǎng)型系列教材”。全套計(jì)劃由12部教材組成,其中2部是在第一版基礎(chǔ)上的修訂版,《細(xì)胞工程》(第二版)人選普通高等教育“十一五”國家級(jí)規(guī)劃教材。
目錄
叢書序
前言
綜合實(shí)驗(yàn)1 青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)及半合成抗生素的制備 1
實(shí)驗(yàn)1-1 青霉素的發(fā)酵生產(chǎn) 3
實(shí)驗(yàn)1-2 發(fā)酵體系中氨態(tài)氮含量的測(cè)定 6
實(shí)驗(yàn)1-3 青霉素效價(jià)的測(cè)定 8
實(shí)驗(yàn)1-4 青霉素;府a(chǎn)生菌的篩選 11
實(shí)驗(yàn)1-5 青霉素酰化酶的酶活測(cè)定 13
實(shí)驗(yàn)1-6 青霉素;傅陌l(fā)酵生產(chǎn)與分離純化 15
實(shí)驗(yàn)1-7 青霉素酰化酶的固定化 30
實(shí)驗(yàn)1-8 固定化青霉素;复呋苽7-ADCA 34
綜合實(shí)驗(yàn)2 微生物發(fā)酵生產(chǎn)油脂及生物柴油的制備 36
實(shí)驗(yàn)2-1 微生物發(fā)酵產(chǎn)油脂 38
實(shí)驗(yàn)2-2 油脂的提取與成分分析 39
實(shí)驗(yàn)2-3 酶法轉(zhuǎn)化生成生物柴油 43
綜合實(shí)驗(yàn)3 玉米超氧化物歧化酶提取與固定化酵母乙醇發(fā)酵 46
實(shí)驗(yàn)3-1 玉米超氧化物歧化酶的提取 48
實(shí)驗(yàn)3-2 超氧化物歧化酶(SOD)活力測(cè)定 50
實(shí)驗(yàn)3-3 玉米粉的液化、糖化 52
實(shí)驗(yàn)3-4 固定化酵母乙醇發(fā)酵 54
實(shí)驗(yàn)3-5 乙醇發(fā)酵分析 58
綜合實(shí)驗(yàn)4 乳酸發(fā)酵及獼猴桃汁乳酸發(fā)酵飲料的制備 61
實(shí)驗(yàn)4-1 乳酸菌的分離與篩選 63
實(shí)驗(yàn)4-2 獼猴桃汁乳酸發(fā)酵飲料的制備 65
實(shí)驗(yàn)4-3 細(xì)菌L-乳酸發(fā)酵 68
綜合實(shí)驗(yàn)5 黑曲霉發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸 73
實(shí)驗(yàn)5-1 黑曲霉孢子的制備 75
實(shí)驗(yàn)5-2 種子培養(yǎng) 78
實(shí)驗(yàn)5-3 發(fā)酵罐的構(gòu)造認(rèn)識(shí)及空消 82
實(shí)驗(yàn)5-4 薯干粉/玉米粉液體深層發(fā)酵 85
實(shí)驗(yàn)5-5 檸檬酸發(fā)酵分析 90
實(shí)驗(yàn)5-6 發(fā)酵液的中和、酸解 95
實(shí)驗(yàn)5-7 粗檸檬酸溶液的脫色及離子交換凈化 96
實(shí)驗(yàn)5-8 檸檬酸溶液的濃縮、結(jié)晶及干燥 99
綜合實(shí)驗(yàn)6 纖維素酶的固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)和分離純化 102
實(shí)驗(yàn)6-1 纖維素酶產(chǎn)生菌的選育 104
實(shí)驗(yàn)6-2 纖維素酶的活性測(cè)定 107
實(shí)驗(yàn)6-3 固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 111
實(shí)驗(yàn)6-4 纖維素酶的分離純化 114
實(shí)驗(yàn)6-5 纖維素酶糖化玉米芯發(fā)酵生產(chǎn)乙醇 123
綜合實(shí)驗(yàn)7 基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)重組核糖核酸酶A 128
實(shí)驗(yàn)7-1 重組核糖核酸酶A表達(dá)載體構(gòu)建 129
實(shí)驗(yàn)7-2 重組核糖核酸酶A誘導(dǎo)表達(dá) 136
實(shí)驗(yàn)7-3 重組核糖核酸酶A親和純化 138
實(shí)驗(yàn)7-4 重組核糖核酸酶A活性鑒定 141
綜合實(shí)驗(yàn)8 幾丁質(zhì)酶的發(fā)酵生產(chǎn)及異源表達(dá) 143
實(shí)驗(yàn)8-1 幾丁質(zhì)酶產(chǎn)生菌的篩選 144
實(shí)驗(yàn)8-2 產(chǎn)幾丁質(zhì)酶培養(yǎng)基的統(tǒng)計(jì)學(xué)優(yōu)化 148
實(shí)驗(yàn)8-3 幾丁質(zhì)酶的分離純化 153
實(shí)驗(yàn)8-4 幾丁質(zhì)酶的酶學(xué)性質(zhì) 156
實(shí)驗(yàn)8-5 幾丁質(zhì)酶基因的克隆與異源表達(dá) 158
綜合實(shí)驗(yàn)9 木瓜蛋白酶的提取制備及殼聚糖的酶法水解 165
實(shí)驗(yàn)9-1 木瓜蛋白酶的提取 166
實(shí)驗(yàn)9-2 木瓜蛋白酶活力測(cè)定 169
實(shí)驗(yàn)9-3 木瓜蛋白酶的分離純化 171
實(shí)驗(yàn)9-4 木瓜蛋白酶水解殼聚糖 177
實(shí)驗(yàn)9-5 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn) 180
綜合實(shí)驗(yàn)10 利用固定化酵母細(xì)胞生產(chǎn)1,6-二磷酸果糖 181
實(shí)驗(yàn)10-1 酵母細(xì)胞的固定化 182
實(shí)驗(yàn)10-2 固定化酵母催化磷酸化反應(yīng) 185
實(shí)驗(yàn)10-3 固定化酵母細(xì)胞連續(xù)制備1,6-二磷酸果糖 188
實(shí)驗(yàn)10-4 離子交換法提取1,6-二磷酸果糖 189
綜合實(shí)驗(yàn)11 螺旋蔟氣升式光生物反應(yīng)器培養(yǎng)及藻藍(lán)蛋白的提取純化 193
實(shí)驗(yàn)11-1 螺旋藻氣升式光生物反應(yīng)器培養(yǎng) 194
實(shí)驗(yàn)11-2 螺旋藻藻藍(lán)蛋白的提取 197
實(shí)驗(yàn)11-3 螺旋藻藻藍(lán)蛋白的純化 200
實(shí)驗(yàn)11-4 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定藻藍(lán)蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量 204
綜合實(shí)驗(yàn)12 紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)及次級(jí)代謝產(chǎn)物的檢測(cè)分析 208
實(shí)驗(yàn)12-1 紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng) 210
實(shí)驗(yàn)12-2 紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中紫杉烷的分離鑒定 215
實(shí)驗(yàn)12-3 紅豆杉細(xì)胞提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用 218
綜合實(shí)驗(yàn)13 不同來源細(xì)菌的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析 221
實(shí)驗(yàn)13-1 細(xì)菌總DNA提取與瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) 222
實(shí)驗(yàn)13-2 16S rDNA的PCR擴(kuò)增與瓊脂糖凝膠電泳 226
實(shí)驗(yàn)13-3 16S rDNA序列的克隆 229
實(shí)驗(yàn)13-4 陽性克隆的篩選 232
實(shí)驗(yàn)13-5 系統(tǒng)發(fā)育樹分析 234
參考文獻(xiàn) 238
附錄1 培養(yǎng)基和試劑、溶液的配制 242
附錄2 緩沖液的配制 248
附錄3 硫酸銨飽和度的常用表 253
乙醇(酒精)是用途最廣和用量最大的有機(jī)溶劑之一。發(fā)酵法生產(chǎn)乙醇由于原料來源于可再生的植物,所以乙醇被視為可長(zhǎng)期持續(xù)供應(yīng)的清潔能源,加上世界正面臨的能源危機(jī)和環(huán)境污染,使得燃料乙醇發(fā)酵研究和產(chǎn)業(yè)化具有很大的戰(zhàn)略意義和社會(huì)效益。
。ǘ┤剂弦掖嫉陌l(fā)酵生產(chǎn)
1.燃料乙醇的生產(chǎn)原料
燃料乙醇的生產(chǎn)原料有三類:一是糖類,來自甘蔗、甜菜等;二是谷物淀粉類,來自玉米、稻谷等;三是纖維素類,來自秸稈、蔗渣等。用糖類生產(chǎn)乙醇是工藝最為簡(jiǎn)單、成本最為低廉的方法,目前在南美洲如巴西、阿根廷等廣泛使用。以谷物淀粉作原料是目前北美和歐洲等國廣泛使用的方法。以植物秸稈等纖維素為原料生產(chǎn)乙醇是最具挑戰(zhàn)性的課題。不同的原料發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇,生產(chǎn)方式略有不同,因而各有其優(yōu)缺點(diǎn)。
2.燃料乙醇發(fā)酵微生物
乙醇發(fā)酵微生物包括代謝葡萄糖的酵母、代謝葡萄糖的細(xì)菌及代謝木糖的微生物。常用于葡萄糖發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的酵母有:啤酒酵母、葡萄汁酵母、裂殖酵母及克魯維酵母等。這些酵母均屬兼性厭氧菌,在酵母生長(zhǎng)期需要一定的氧氣,在乙醇發(fā)酵階段則需要厭氧條件以提高乙醇產(chǎn)率。通過酵母發(fā)酵生產(chǎn)乙醇時(shí),發(fā)酵液pH為3~4,因此染菌機(jī)會(huì)較少,且除乙醇外幾乎沒有副產(chǎn)物。但酵母大多不耐高溫,且不能直接利用淀粉或纖維素為原料進(jìn)行發(fā)酵。通過細(xì)菌發(fā)酵生產(chǎn)乙醇時(shí),代謝速度快,發(fā)酵周期短,且生成的菌體約為酵母的一半,所以乙醇的得率較高。例如,運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌(zymomonas mobilis)的生長(zhǎng)速率、底物消耗速率、產(chǎn)物生成速率都高于酵母發(fā)酵,而細(xì)胞產(chǎn)率則低于酵母。