現(xiàn)代生物技術(shù)實驗教程(郝魯江)
《現(xiàn)代生物技術(shù)實驗教程》涵蓋《微生物學實驗》《細胞生物學實驗》《分子生物學實驗》三門實驗課程的內(nèi)容。全書共有 4 部分,其中,緒論簡要介紹了生物技術(shù)基礎(chǔ)實驗的內(nèi)容和實驗室安全法則與規(guī)范;第 1 章微生物學實驗技術(shù)部分設(shè)置 9 個微生物學基本實驗項目和 3 個微生物學綜合研究型實驗項目;第 2 章細胞生物學實驗技術(shù)部分設(shè)置 10 個細胞生物學基本實驗項目和 4 個細胞生物學綜合研究型實驗項目;第 3 章分子生物學實驗技術(shù)部分設(shè)置 7 個分子生物學基本實驗項目和 1 個綜合研究型實驗項目。全書內(nèi)容豐富、實驗項目設(shè)置分級漸進,且融入了課程思政案例,以期使學生全面掌握生物技術(shù)基礎(chǔ)操作、培養(yǎng)學生嚴謹?shù)目茖W態(tài)度和學習科學家們獻身科學事業(yè)的偉大精神。
《現(xiàn)代生物技術(shù)實驗教程》可作為普通高等教育本科生物工程、生物技術(shù)、釀酒工程、食品科學與工程、食品質(zhì)量與安全等專業(yè)的實驗課教材。
郝魯江,副教授,博士,美國Texas A&M大學訪問學者。現(xiàn)任齊魯工業(yè)大學(山東省科學院)生物工程學院生物技術(shù)系主任,兼任基輔學院生物技術(shù)系主任。山東省生物學、生物與醫(yī)藥等學科學術(shù)骨干!吧飳W”“生物工程”專業(yè)碩士導師,校級“優(yōu)秀研究生指導教師”。
主持并參與國家自然科學基金、山東省自然科學基金、山東省中青年科學家科研獎勵基金等20多項課題;發(fā)表研究論文50余篇,SCI收錄30余篇;授權(quán)發(fā)明專利5項,實用新型專利1項;出版專著4部,參編教材1部。主持多項省部級、校級教研教改項目;主持1門山東省研究生教育優(yōu)質(zhì)課程(工業(yè)微生物遺傳育種);1門山東省線上線下混合式課程(微生物學);1門校級精品課程(食品微生物學)。微生物學先后獲得山東省高等學校課程聯(lián)盟 2020 年春季學期優(yōu)秀共享課程三等獎(2020年9月),被評為齊魯工業(yè)大學(山東省科學院)2021年普通本科教育課程思政示范課程(2021年5月)。
郝魯江老師先后獲評齊魯工業(yè)大學首屆青年學者、齊魯工業(yè)大學第四屆青年教學優(yōu)秀獎、“首屆教學質(zhì)量優(yōu)秀獎”、“第三屆教學方法改革標兵”。長期承擔《微生物學》及《微生物學實驗》、《食品微生物學》及《食品微生物學實驗》等專業(yè)核心課的理論課教學和實驗教學指導工作。
緒論
第一章 微生物學實驗技術(shù)
第一節(jié) 微生物學基本實驗技術(shù) 4
實驗一 普通光學顯微鏡的構(gòu)造、性能及使用方法4
實驗二 細菌涂片及革蘭氏染色與芽孢染色法 10
實驗三 放線菌與霉菌制片及形態(tài)觀察 14
拓展閱讀 1910年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:核酸的化學組成 19
實驗四 酵母菌形態(tài)及死活細胞的染色鑒別 19
實驗五 酵母菌細胞大小、細胞總數(shù)及出芽率的測定 20
拓展閱讀 1962年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn) 26
實驗六 酵母菌子囊孢子的觀察 27
實驗七 培養(yǎng)基制備 28
實驗八 常用滅菌方法 31
(一)干熱滅菌法 31
(二)高壓蒸汽滅菌 33
拓展閱讀 1968 年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:遺傳密碼與蛋白質(zhì)合成 36
實驗九 微生物的分離與純化 36
第二節(jié) 微生物學綜合研究型實驗 41
實驗一 空氣中微生物的測定和計數(shù) 41
思政小課堂“共和國勛章”獲得者:鐘南山 44
實驗二 樣品中菌落總數(shù)和大腸菌群數(shù)的檢測 45
(一)樣品中菌落總數(shù)的檢測 45
(二)樣品中大腸菌群數(shù)的檢測 48
思政小課堂“人民英雄”國家榮譽稱號獲得者:張伯禮 52
實驗三 微生物的生理生化特性試驗 53
(一)大分子物質(zhì)的水解試驗 53
(二)糖發(fā)酵試驗 57
(三)IMViC試驗與硫化氫試驗 59
思政小課堂“共和國勛章”獲得者:袁隆平 62
第二章 細胞生物學實驗技術(shù)
第一節(jié) 細胞生物學基本實驗技術(shù) 63
實驗一 細胞膜的滲透性 63
拓展閱讀 1974年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:細胞結(jié)構(gòu)和功能組織的發(fā)現(xiàn) 65
實驗二 血細胞觀察和人 ABO血型鑒定 65
實驗三 生物組織石蠟切片技術(shù) 69
實驗四 蘇木精-伊紅染色法 72
實驗五 DNA的顯示 ——Feulgen反應 75
拓展閱讀 1978年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:限制性內(nèi)切酶 77
實驗六 細胞內(nèi) DNA和 RNA的區(qū)分顯示 78
拓展閱讀 1989年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:逆轉(zhuǎn)錄病毒癌基因及其細胞起源 80
實驗七 細胞內(nèi)堿性蛋白質(zhì)和酸性蛋白質(zhì)的顯示 80
拓展閱讀 1994年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:G蛋白及其在細胞轉(zhuǎn)導中的作用 82
實驗八 細胞內(nèi)過氧化物酶的顯示 82
實驗九 過碘酸希夫反應(PAS) ——顯示細胞內(nèi)糖原 84
拓展閱讀 1997年諾貝爾化學獎:合成三磷酸腺苷的酶促機理 85
實驗十 蘇丹Ⅲ染色——顯示細胞內(nèi)脂肪 86
第二節(jié) 細胞生物學綜合研究型實驗 88
實驗一 小鼠骨髓染色體標本的制備與觀察 88
思政小課堂“共和國勛章”獲得者:屠呦呦 90
實驗二 動植物細胞骨架的玻片制備方法和觀察 90
實驗三 動物細胞的傳代培養(yǎng) 92
思政小課堂“人民英雄”國家榮譽稱號獲得者:陳薇 96
實驗四 植物細胞的有絲分裂 96
第三章 分子生物學實驗技術(shù)
第一節(jié) 分子生物學基礎(chǔ)實驗技術(shù) 99
實驗一 聚合酶鏈式反應(PCR) 99
拓展閱讀 1993年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:PCR技術(shù) 101
實驗二 DNA瓊脂糖凝膠電泳 101
實驗三 DNA酶切及片段回收 103
實驗四 DNA重組 106
拓展閱讀 2002年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:器官發(fā)育和程序性細胞死亡的基因調(diào)節(jié) 107
實驗五 大腸桿菌化學感受態(tài)的制備及質(zhì)粒 DNA轉(zhuǎn)化 108
實驗六 質(zhì)粒提取及電泳分析 110
拓展閱讀 2020年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎:丙型肝炎病毒的發(fā)現(xiàn) 112
實驗七 重組子的藍白斑篩選 113
第二節(jié) 分子生物學綜合研究型實驗 114
葡萄功能基因表達載體的構(gòu)建 114
Ⅰ葡萄組織總RNA提。x心柱法) 114
思政小課堂“人民英雄”國家榮譽稱號獲得者:張定宇 116
ⅡRNA質(zhì)量及濃度檢測 117
ⅢRT-PCR及目的產(chǎn)物回收 118
Ⅳ目的產(chǎn)物與克隆載體連接、轉(zhuǎn)化及陽性克隆重組子的篩選 120
Ⅴ克隆重組子及表達載體酶切、連接、轉(zhuǎn)化及表達重組子篩選 122
參考書目 124