目錄
**章 實驗須知 1
一、實驗要求 1
二、實驗報告要求 1
三、藥品、試劑使用要求 2
四、實驗安全注意事項 2
五、實驗室清潔 3
第二章 常用實驗技術(shù)和方法 4
一、實驗對照的設(shè)置 4
二、吸量管的種類及使用 5
三、離心技術(shù) 7
四、分光光度技術(shù) 8
五、電泳技術(shù) 11
六、層析技術(shù) 13
第三章 基本實驗項目 15
實驗一 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng) 15
實驗二 蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點測定 17
實驗三 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳 18
實驗四 蛋白質(zhì)定量實驗 20
一、Folin-酚試劑法（Lowry法） 20
二、考馬斯亮藍(lán)染色法 22
三、BCA法 23
四、紫外分光光度測定法 24
實驗五 凝膠層析分離血紅蛋白和魚精蛋白 25
實驗六 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量 27
實驗七 氨基酸的薄層層析 32
實驗八 核酸的定量測定 34
一、紫外吸收法 34
二、DNA的定量測定二苯胺法 35
三、RNA的定量測定地衣酚法 36
實驗九 酵母RNA的提取及組分的鑒定 37
實驗十 核酸的瓊脂糖凝膠電泳 38
一、DNA的瓊脂糖凝膠電泳 38
二、RNA的甲醛變性凝膠電泳 40
實驗十一 影響酶活性的因素 42
一、溫度對酶活性的影響 42
二、pH對酶活性的影響 43
三、激動劑和抑制劑對酶活性的影響 44
實驗十二 丙二酸對琥珀酸脫氫酶活性的影響 45
實驗十三 酶的米氏常數(shù)（Km）測定 47
一、堿性磷酸酶Km值的測定（雙倒數(shù)作圖法） 47
二、過氧化氫酶Km值測定（Hanes-Woolf作圖法） 50
實驗十四 乳酸脫氫酶的組分及作用 53
實驗十五 血中葡萄糖含量的測定（鄰甲苯胺法） 54
實驗十六 饑餓和飽食對肝糖原含量的影響 56
實驗十七 運動對乳酸含量的影響 57
一、運動對血中乳酸含量的影響 58
二、運動對尿乳酸含量的影響 59
實驗十八 血清甘油三酯的測定 60
實驗十九 血清總膽固醇含量測定 62
實驗二十 酮體的生成與定性 64
實驗二十一 轉(zhuǎn)氨基作用（圓形紙層析鑒定） 65
第四章 綜合性實驗 70
實驗二十二 血清白蛋白、球蛋白的分離純化與鑒定 70
實驗二十三 堿性磷酸酶的分離純化和比活性測定 73
實驗二十四 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化實驗 77
實驗二十五 堿裂解法提取質(zhì)粒DNA 78
實驗二十六 限制性內(nèi)切核酸酶對質(zhì)粒DNA的酶切 80
實驗二十七 PCR擴增目的基因及鑒定 81
實驗二十八 蛋白質(zhì)印跡實驗 84
主要參考文獻 90