第一章 緒論 1
一、生化分離技術(shù)發(fā)展的歷史和地位 1
二、 生化分離技術(shù)的研究范疇 2
三、生化分離技術(shù)的應(yīng)用及發(fā)展趨勢(shì) 5
參考文獻(xiàn) 8

第一篇　生物樣品粗分離
第二章　生物樣品的預(yù)處理 10
第一節(jié) 概述 10
第二節(jié) 生物樣品體系的改變 10
一、加熱法 11
二、調(diào)節(jié)pH值法 11
三、凝聚和絮凝 11
四、添加助濾劑法 13
五、添加反應(yīng)劑法 14
第三節(jié) 固液分離 14
一、離心分離技術(shù) 14
二、過(guò)濾分離技術(shù) 22
第四節(jié) 細(xì)胞的破碎 27
一、概述 27
二、細(xì)胞破碎常用方法 27
三、破碎方法發(fā)展趨勢(shì) 32
第五節(jié) 不同材料預(yù)處理 33
一、植物材料 33
二、動(dòng)物組織 36
三、微生物發(fā)酵液 38
第六節(jié) 預(yù)處理實(shí)例 42
一、納米級(jí)微生物細(xì)胞破碎原理及實(shí)例 42
二、β-環(huán)糊精共沉淀分離法 43
三、殼聚糖沉淀分離法 43
參考文獻(xiàn) 44

第三章　沉淀 45
第一節(jié) 概述 45
第二節(jié) 沉淀方法 45
一、鹽析法 46
二、有機(jī)溶劑沉淀法 51
三、等電點(diǎn)沉淀法 53
四、非離子多聚物沉淀法 54
五、選擇性變性沉淀 55
六、生成鹽類(lèi)復(fù)合物的沉淀 55
七、親和沉淀 56
參考文獻(xiàn) 57

第四章　膜分離技術(shù) 58
第一節(jié) 概述 58
一、發(fā)展史 58
二、作用及存在問(wèn)題 59
三、分類(lèi)和定義 59
第二節(jié) 技術(shù)原理 63
一、壓力特征 63
二、濃差極化 64
三、膜分離理論 64
四、膜的截留能力 65
五、膜的污染 66
六、膜組件的選擇 67
七、膜的選擇及使用 67
第三節(jié) 微濾技術(shù) 69
一、概述 69
二、膜的分類(lèi) 70
三、膜的特點(diǎn)和分離機(jī)理 71
四、膜的污染和清洗 71
第四節(jié) 超濾技術(shù) 72
一、概述 72
二、原理 72
三、問(wèn)題及解決措施 72
四、膜的改性 73
第五節(jié) 納濾技術(shù) 74
一、概述 74
二、分離機(jī)理 74
三、納濾膜 76
第六節(jié) 超-微濾操作技術(shù) 76
一、預(yù)處理 76
二、膜的操作 77
三、膜的清洗和膜性能的再生 80
第七節(jié) 膜分離技術(shù)的應(yīng)用 81
一、微濾技術(shù)應(yīng)用 81
二、超濾技術(shù)應(yīng)用 83
三、納濾技術(shù)應(yīng)用 86
參考文獻(xiàn) 87

第二篇　生物樣品純化
第五章　層析分離技術(shù) 89
第一節(jié) 概述 89
一、層析的基本概念 89
二、層析法的分類(lèi) 90
第二節(jié) 吸附層析 91
一、吸附層析影響因素 91
二、羥基磷灰石層析方法介紹 93
第三節(jié) 凝膠過(guò)濾層析 95
一、GFC原理 95
二、GFC介質(zhì) 98
三、GFC實(shí)驗(yàn)技術(shù) 107
四、GFC的應(yīng)用 113
第四節(jié) 離子交換層析 115
一、IEC相關(guān)理論 115
二、IEC介質(zhì) 119
三、IEC實(shí)驗(yàn)技術(shù) 128
四、IEC的應(yīng)用 143
第五節(jié) 親和層析 144
一、基本原理 144
二、親和配體 145
三、親和吸附劑 146
四、AFC實(shí)驗(yàn)技術(shù) 154
五、AFC的特殊類(lèi)型 156
六、AFC的應(yīng)用 168
第六節(jié) 反相層析 170
一、RPC原理 171
二、RPC介質(zhì) 175
三、RPC流動(dòng)相 178
四、RPC實(shí)驗(yàn)技術(shù) 180
五、RPC的應(yīng)用 185
第七節(jié) 疏水作用層析 187
一、HIC基本原理 187
二、HIC介質(zhì) 191
三、HIC實(shí)驗(yàn)技術(shù) 193
四、HIC的應(yīng)用 197
參考文獻(xiàn) 198

第六章　電泳技術(shù) 201
第一節(jié) 概述 201
一、基本原理 201
二、凝膠介質(zhì) 203
三、檢測(cè)方法 205
四、電泳儀器 205
第二節(jié) 天然聚丙烯酰胺凝膠電泳 206
一、基本原理 207
二、天然PAGE的類(lèi)型 208
三、影響分離效果的因素 208
四、蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定 210
五、天然PAGE的實(shí)驗(yàn)方法 210
六、天然PAGE的應(yīng)用范圍 214
第三節(jié) SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 215
一、SDS-PAGE的分離原理 215
二、SDS-PAGE的類(lèi)型 215
三、影響分離效果的因素 216
四、蛋白質(zhì)亞基分子量的測(cè)定 217
五、SDS-PAGE的實(shí)驗(yàn)方法 217
六、SDS-PAGE的應(yīng)用范圍 218
第四節(jié) 等電聚焦 219
一、原理 219
二、載體兩性電解質(zhì)和pH梯度的形成 220
三、載體兩性電解質(zhì)等電聚焦方法 222
四、固相pH梯度介質(zhì)及其pH梯度的形成 225
五、固相pH梯度等電聚焦方法 227
六、等電聚焦系統(tǒng)的選擇 229
七、等電聚焦的應(yīng)用范圍 229
第五節(jié) 雙向電泳 229
一、樣品制備 229
二、等電聚焦 230
三、緩沖液置換 231
四、梯度SDS-PAGE 232
五、檢測(cè) 232
六、蛋白質(zhì)圖譜分析 232
七、應(yīng)用 233
第六節(jié) 蛋白質(zhì)印跡 233
一、原理 233
二、試驗(yàn)材料的選擇 235
三、蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)方法 236
四、應(yīng)用 238
第七節(jié) 毛細(xì)管電泳 238
一、原理 238
二、毛細(xì)管電泳的主要類(lèi)型 240
三、毛細(xì)管電泳儀 241
四、影響毛細(xì)管電泳分離的主要因素 242
五、毛細(xì)管電泳過(guò)程 243
六、毛細(xì)管電泳的應(yīng)用 243
參考文獻(xiàn) 244

第三篇　分離技術(shù)的融合與集成
第七章　單元融合及創(chuàng)新 246
第一節(jié) 膜層析技術(shù) 246
一、概述 246
二、原理和特點(diǎn) 246
三、膜層析介質(zhì)材料及其組件 248
四、膜層析的制備 249
五、膜層析的應(yīng)用 250
第二節(jié) 與雙水相集成的分離技術(shù) 252
一、雙水相親和分配技術(shù) 252
二、雙水相生物轉(zhuǎn)化的集成 253
第三節(jié) 混合模式吸附層析 253
一、概述 253
二、離子交換型混合模式層析 254
三、親硫作用層析 256
四、疏水性電荷誘導(dǎo)層析 257
第四節(jié) 擴(kuò)張床吸附層析 259
一、擴(kuò)張床吸附層析的基本原理 259
二、擴(kuò)張床吸附技術(shù)的操作 260
三、擴(kuò)張床基質(zhì)的特性 261
四、擴(kuò)張床吸附技術(shù)的應(yīng)用 263
第五節(jié) 模擬移動(dòng)床 264
一、概述 264
二、工作原理 265
三、模擬移動(dòng)床模型 266
四、模擬移動(dòng)床的應(yīng)用 267
參考文獻(xiàn) 267

第八章　分離純化的組合應(yīng)用 269
第一節(jié) 概述 269
第二節(jié) 分離的主要流程 271
一、建立分析方法 271
二、提取材料選擇 272
三、提取方法選擇 272
四、分離純化方法的探索 274
五、均一性的鑒定 274
第三節(jié) 分離技術(shù)的選擇和組合 275
一、單元分離技術(shù)的選擇 275
二、分離技術(shù)組合方案的選擇原則 276
第四節(jié) 典型生物分子分離實(shí)例分析 277
一、蛋白質(zhì)(酶)的分離純化與鑒定 277
二、核酸的分離純化與鑒定 288
三、多糖的分離純化與鑒定 293
四、小分子物質(zhì)的分離與鑒定 296
參考文獻(xiàn) 301