《生物化學(xué)實驗(工科專業(yè)適用)》是在西華大學(xué)“生物化學(xué)(工科)”省級精品課程建設(shè)的基礎(chǔ)上,邀請同行專家集體編寫而成。在精選實驗項目上體現(xiàn)了以下教學(xué)目的:
一,生物化學(xué)實驗基本操作技能的訓(xùn)練,如生化實驗中常用儀器的使用、生物物質(zhì)的分離、純化、分析技術(shù)等。通過這些實驗,使學(xué)生掌握生物化學(xué)的基本操作技術(shù),為后續(xù)課程的實驗、畢業(yè)論文以及將來的科研和實際工作打好基礎(chǔ)。
二,基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗的掌握,如糖、蛋白質(zhì)、核酸等的性質(zhì)實驗、代謝實驗,分子生物學(xué)基礎(chǔ)實驗等內(nèi)容。通過這些實驗,使學(xué)生加深對課堂知識的理解,進(jìn)一步掌握生物物質(zhì)的特點和規(guī)律,以及在工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用。
三,綜合運(yùn)用知識能力的培養(yǎng)。為適應(yīng)素質(zhì)教育、創(chuàng)新教育的需要,《高等學(xué)校專業(yè)教材·生物化學(xué)實驗(工科專業(yè)適用)》在傳統(tǒng)生物化學(xué)實驗的基礎(chǔ)上,增加了綜合性、設(shè)計性實驗的內(nèi)容,在教師的指導(dǎo)下,由學(xué)生根據(jù)已有知識,自己設(shè)計實驗方案,嘗試自己分析實驗結(jié)果,進(jìn)一步培養(yǎng)學(xué)生的綜合應(yīng)用能力、分析與設(shè)計能力、邏輯思維能力。
四,工程意識和工程能力的培養(yǎng)。突出工科專業(yè)特點是《高等學(xué)校專業(yè)教材·生物化學(xué)實驗(工科專業(yè)適用)》的特色與亮點,我們在實驗項目的選擇、實驗材料與預(yù)處理方法的確定、結(jié)果與數(shù)據(jù)處理等方面,盡可能結(jié)合相關(guān)工業(yè)生產(chǎn)的實際問題,理論聯(lián)系實際,在培養(yǎng)基本技能的同時,培養(yǎng)學(xué)生解決實際工程問題的能力,潛移默化地強(qiáng)化學(xué)生的工程意識。
生物化學(xué)是生命科學(xué)領(lǐng)域中活躍的分支學(xué)科之一,其實驗方法和技術(shù)是生物化學(xué)發(fā)展的重要組成部分。掌握生物化學(xué)實驗的基本原理和操作技術(shù),對包括食品科學(xué)與工程、制藥工程、環(huán)境工程等專業(yè)在內(nèi)的工程專業(yè)的學(xué)生是必不可少的,而且對于培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)精神、科研及實際工作能力、分析問題與解決問題的能力等都是非常重要的。
《高等學(xué)校專業(yè)教材·生物化學(xué)實驗(工科專業(yè)適用)》共分概論,基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗,綜合性實驗、設(shè)計性實驗和附錄等部分!陡叩葘W(xué)校專業(yè)教材·生物化學(xué)實驗(工科專業(yè)適用)》可供工程類的生物工程、食品科學(xué)與工程、環(huán)境工程、輕化工程等工科專業(yè)作為本科生物化學(xué)實驗課教材,也可供其他專業(yè)的學(xué)生、相關(guān)專業(yè)的研究生和工程技術(shù)人員參考。
第一章 概論
第一節(jié) 實驗室基本常識
一、生物化學(xué)實驗室安全與防護(hù)常識
二、生物化學(xué)實驗的基本要求
第二節(jié) 生物化學(xué)實驗基本操作
一、實驗室常用儀器的使用
二、生物化學(xué)的分離、純化、分析技術(shù)概述
第二章 基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗
第一節(jié) 生命物質(zhì)化學(xué)實驗
實驗1 糖的呈色反應(yīng)和定性鑒定
實驗2 植物中還原糖和總糖的測定——3,5-二硝基水楊酸比色法
實驗3 種子粗脂肪的提取
實驗4 血清膽固醇的測定——磷硫鐵法
實驗5 紙層析法分離鑒定氨基酸
實驗6 谷物種子中賴氨酸含量的測定
實驗7 蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗
實驗8 蛋白質(zhì)含量測定——雙縮脲法、考馬斯亮藍(lán)法、紫外分光光度法
實驗9 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳
實驗10 正交法測定幾種因素對酶活力的影響
實驗11 枯草桿菌蛋白酶活力測定
實驗12 脲酶km值的簡易測定
實驗13 細(xì)胞色素c的制備及測定
實驗14 核酸含量的測定
實驗15 維生素A的測定——比色法
第二節(jié) 生命物質(zhì)代謝實驗
實驗16 脂肪酸的口一氧化
實驗17 多酚氧化酶的純化和活力測定
實驗18 酪蛋白的制備
實驗19 SDS-PAGE電泳測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗20 胰島素和腎上腺素對血糖濃度的影響
實驗21 肝糖原的提取與鑒定
第三節(jié) 核酸化學(xué)實驗
實驗22 離子交換柱層析分離核苷酸
實驗23 酵母RNA的提取及組分鑒定
實驗24 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗25 質(zhì)粒DNA的微量提取、純化
實驗26 植物中DNA的提取
實驗27 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
第三章 綜合性實驗
實驗28 血清γ-球蛋白的分離、純化與鑒定
實驗29 酪氨酸酶的提取及其酶促反應(yīng)動力學(xué)研究
實驗30 固定化酵母細(xì)胞及蔗糖酶的檢測
實驗31 發(fā)酵過程中無機(jī)磷的利用和ATP的生成(ATP的生物合成)
實驗32 兔抗人血清抗體的制備和效價測定
實驗33 有機(jī)廢水的COD測定
第四章 設(shè)計性實驗
實驗34 蛋白質(zhì)的制備及其含量的測定
實驗35 茶葉中茶多酚類物質(zhì)的提取與含量測定
實驗36 天然產(chǎn)物中多糖的提取、純化與鑒定
實驗37 蛋白質(zhì)的表達(dá)、分離、純化和鑒定
附錄
一、試劑配制的一般注意事項
二、玻璃儀器的洗滌方法
三、實驗樣品的準(zhǔn)備
四、常用緩沖液的配制
五、實驗室中常用參數(shù)
參考文獻(xiàn)
第一章 概論
第一節(jié) 實驗室基本常識
一、生物化學(xué)實驗室安全與防護(hù)常識
1. 實驗室安全
在生物化學(xué)實驗中,經(jīng)常要與有腐蝕性、易燃、易爆性和毒性很強(qiáng)的化學(xué)藥品及有潛在危害性的生物材料直接接觸,經(jīng)常要用到煤氣、水、電,因此,安全操作是一個至關(guān)重要的問題。
(1)熟悉實驗室煤氣總閥、水閥門及電閘門所在處。離開實驗室時,一定要將室內(nèi)檢查一遍,應(yīng)將水、電、煤氣的開關(guān)關(guān)好。
(2)熟悉如何處理著火事故。在可燃液體燃著時,應(yīng)立刻轉(zhuǎn)移著火區(qū)內(nèi)的一切可燃物質(zhì)。酒精及其他可溶于水的液體著火時,可用水滅火;乙醚、甲苯等有機(jī)溶劑著火時,應(yīng)用石棉布或沙土撲滅。
(3)了解化學(xué)藥品的警告標(biāo)志
(4)實驗操作過程中凡遇到能產(chǎn)生煙霧、有毒性或腐蝕性氣體時,應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。
(5)使用毒性物質(zhì)和致癌物質(zhì)必須根據(jù)試劑瓶上標(biāo)簽說明嚴(yán)格操作,安全稱量、轉(zhuǎn)移和保管。操作時應(yīng)戴手套,必要時戴口罩或防毒面罩,并在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。沾過毒性、致癌物的容器應(yīng)單獨清洗、處理。
(6)廢液,特別是強(qiáng)酸和強(qiáng)堿不能直接倒在水槽中,應(yīng)先稀釋、然后倒入水槽,再用大量自來水沖洗水槽及下水道。
(7)生物材料如微生物、動物組織和血液都可能存在細(xì)菌和病毒感染的潛伏性危險,因此處理各種生物材料必須謹(jǐn)慎、小心,做完實驗后必須用肥皂、洗滌劑或消毒液洗凈雙手。
(8)進(jìn)行遺傳重組的實驗時應(yīng)根據(jù)有關(guān)規(guī)定加強(qiáng)生物安全的防范措施。
2.實驗室應(yīng)急處理
(1)在生物化學(xué)實驗中,如發(fā)生受傷事故,應(yīng)立即適當(dāng)?shù)夭扇〖本却胧喝绮簧鞅徊AЦ顐蚱渌麢C(jī)械損傷,應(yīng)先檢查傷口內(nèi)有無玻璃或金屬等物碎片,然后用硼酸水洗凈,再涂擦碘酒或紅汞水,必要時用紗布包扎。若傷口較大或過深,應(yīng)迅速在傷口上部和下部扎緊血管止血,送醫(yī)院診治。
(2)輕度燙傷時一般可涂上苦味酸軟膏。如果傷處紅痛(一級灼傷),可擦醫(yī)用橄欖油;若皮膚起泡(二級灼傷),不要弄破水泡,防止感染;若燙傷皮膚呈棕色或黑色(三級灼傷),應(yīng)用干燥無菌的消毒紗布輕輕包扎好,急送醫(yī)院治療。
(3)皮膚不慎被強(qiáng)酸、溴、氯氣等物質(zhì)灼傷時,應(yīng)用大量自來水沖洗,然后再用5%的碳酸氫鈉溶液洗滌。
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