根據(jù)筆者多年相關(guān)研究經(jīng)驗,選擇應(yīng)用較多的植物基因工程實驗27個匯編成書。包含植物基因克隆,植物的組織培養(yǎng)與遺傳轉(zhuǎn)化及分子檢測和植物基因的分子遺傳與生化研究三個專題部分;這些專題包括了從事相關(guān)專業(yè)的主要研究背景,原理和研究方法。本書可應(yīng)用于植物分子生物學(xué)專業(yè)課程,還可應(yīng)用于相關(guān)專業(yè)交叉學(xué)科。希望能夠讓相關(guān)領(lǐng)域的本科生、研究生和青年科研人員快速了解相關(guān)實驗原理,并掌握相關(guān)實驗操作。希望能夠讓相關(guān)領(lǐng)域的本科生、研究生和青年科研人員快速了解相關(guān)實驗原理,并掌握相關(guān)實驗操作。
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目錄
叢書序
本書序
第一部分 植物基因克。1)
實驗一植物葉片基因組的提取方法(2)
實驗二植物葉片總RNA的提取與cDNA的合成方法(3)
實驗三聚合酶鏈反應(yīng)(6)
實驗四CaCl2法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞DH5α的方法(11)
實驗五Inoue法制備大腸桿菌超級感受態(tài)的方法(13)
實驗六大腸桿菌DH5α的轉(zhuǎn)化方法(15)
實驗七植物基因的擴增與基于T載體連接的克隆方法(17)
實驗八大腸桿菌質(zhì)粒的提取方法(22)
實驗九農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞GV3101和EHA105的制備方法(25)
實驗十農(nóng)桿菌GV3101和EHA105轉(zhuǎn)化方法(27)
第二部分 植物的組織培養(yǎng)與遺傳轉(zhuǎn)化及分子檢測(30)
實驗十一擬南芥的栽培方法(31)
實驗十二擬南芥的無菌組織培養(yǎng)方法(34)
實驗十三農(nóng)桿菌GV3101介導(dǎo)的擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化方法(37)
實驗十四擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的篩選與PCR鑒定方法(38)
實驗十五水稻愈傷組織的培養(yǎng)與農(nóng)桿菌EHA105介導(dǎo)的水稻遺傳轉(zhuǎn)化方法(42)
實驗十六水稻轉(zhuǎn)基因植株的篩選與PCR鑒定方法(46)
實驗十七實時熒光定量PCR(49)
第三部分 植物基因的分子遺傳與生化研究(54)
實驗十八報告基因的融合表達(dá)方法(54)
實驗十九十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(60)
實驗二十植物總蛋白的雙向電泳方法(64)
實驗二十一原核表達(dá)系統(tǒng)中蛋白質(zhì)的誘導(dǎo)表達(dá)與純化方法(70)
實驗二十二甲醇酵母表達(dá)系統(tǒng)中蛋白質(zhì)的誘導(dǎo)表達(dá)與純化方法(76)
實驗二十三酵母雙雜交(81)
實驗二十四Westernblot方法(86)
實驗二十五免疫沉淀方法(90)
實驗二十六植物葉肉原生質(zhì)體的提取與質(zhì)粒的瞬時轉(zhuǎn)化方法(92)
實驗二十七基因槍介導(dǎo)的洋蔥表皮細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)化方法(94)
主要參考文獻(xiàn)(97)
名詞索引(中英文對照)(98)