我國是一個病蟲發(fā)生頻率、農(nóng)藥用量較大的國家,但隨著長期使用化學(xué)農(nóng)藥,農(nóng)業(yè)害蟲抗藥性問題越來越凸顯,對環(huán)境生態(tài)造成了嚴(yán)重的影響,同時增加了農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留,既危害了人民群眾的健康安全,也嚴(yán)重影響了我國農(nóng)產(chǎn)品的出口創(chuàng)匯和市場準(zhǔn)入,目前世界各國都在加強控制化學(xué)農(nóng)藥的使用!段⑸餁⑾x劑的研究與應(yīng)用》作者鄧彩萍主要從事殺蟲微生物方面的研究,結(jié)合前人發(fā)表的論著,詳細介紹近幾年關(guān)于微生物殺蟲劑的研發(fā)和應(yīng)用現(xiàn)狀,以供讀者參考。
鄧彩萍,女,漢族,生于1979年,博士,講師。2009年畢業(yè)于北京林業(yè)大學(xué)森林保護專業(yè),獲農(nóng)學(xué)博士學(xué)位。同年任職于山西農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院森林保護系教師。目前參與國家自然基金項目(31100483)及林業(yè)公益性行業(yè)科研專項“棗樹裂果綜合防控技術(shù)體系研究”子課題的研究。
第一章 真菌殺蟲劑
第一節(jié) 白僵菌
一、白僵菌的分類及生物學(xué)特性
二、白僵菌的侵染機制
三、白僵菌的生產(chǎn)
四、多樣化的劑型及其防治應(yīng)用
第二節(jié) 綠僵菌
一、綠僵菌的分類地位和生物學(xué)特性
二、綠僵菌致病機理
三、綠僵菌的生產(chǎn)
四、綠僵菌的應(yīng)用
第三節(jié) 蠟蚧輪枝菌
一、蠟蚧輪枝菌的分類及生物學(xué)特性
二、蠟蚧輪枝菌的致病機理
三、蠟蚧輪枝菌的生產(chǎn)工藝
四、蠟蚧輪枝菌的應(yīng)用
第四節(jié) 其他蟲生真菌
一、擬青霉
二、座殼孢菌
三、蟲霉目真菌
四、食線蟲真菌
第二章 細菌殺蟲劑
第一節(jié) 蘇云金芽孢桿菌
一、蘇云金芽孢桿菌分類及生物學(xué)特性
二、蘇云金芽孢桿菌的活性因子
三、蘇云金芽孢桿菌殺蟲作用機理
四、蘇云金芽孢桿菌生產(chǎn)和應(yīng)用
五、昆蟲的抗性及其管理
第二節(jié) 金龜子芽孢桿菌
一、金龜子芽孢桿菌的生物學(xué)特性
二、金龜子芽孢桿菌的致病機理
三、金龜子芽孢桿菌的生產(chǎn)和應(yīng)用
第三節(jié) 球形芽孢桿菌
一、球形芽孢桿菌的生物學(xué)特性
二、球形芽孢桿菌的殺蚊毒素和殺蟲機理
三、球形芽孢桿菌的研制與應(yīng)用
第四節(jié) 粘質(zhì)沙雷氏菌
一、粘質(zhì)沙雷氏菌的生物學(xué)特性
二、粘質(zhì)沙雷氏菌的致病機理
三、粘質(zhì)沙雷氏菌的應(yīng)用
第三章 病毒殺蟲劑
第一節(jié) 病毒的概述
一、病毒的定義
二、病毒的化學(xué)組成
三、病毒的分類和命名
四、病毒的增殖
五、理化因素對病毒的影響
六、病毒的收集保藏
第二節(jié) 病毒殺蟲劑
一、病毒殺蟲劑的特點
二、病毒殺蟲劑的開發(fā)
第三節(jié) DNA病毒殺蟲劑
一、核型多角體病毒殺蟲劑
二、顆粒體病毒殺蟲劑
三、昆蟲痘病毒殺蟲劑
四、濃核癥病毒殺蟲劑
第四節(jié) RNA病毒殺蟲劑
一、質(zhì)型多角體病毒生物學(xué)特性
二、質(zhì)型多角體病毒致病機理
三、質(zhì)型多角體病毒生產(chǎn)及應(yīng)用
第五節(jié) 病毒殺蟲劑的基因工程改造
一、病毒殺蟲劑基因改造技術(shù)
二、病毒殺蟲劑的發(fā)展展望
第四章 微孢子蟲殺蟲劑
一、微孢子蟲生物學(xué)特性及分類地位
二、微孢子蟲的診斷方法
三、微孢子蟲的致病機理
四、微孢子蟲的傳播途徑
五、微孢子蟲的人工繁殖及應(yīng)用
第五章 昆蟲病原線蟲殺蟲劑
一、昆蟲病原線蟲的分類和生活史
二、昆蟲病原線蟲的共生菌
三、昆蟲病原線蟲的致病機理
四、昆蟲病原線蟲的生產(chǎn)
五、昆蟲病原線蟲的應(yīng)用
六、高活性昆蟲病原線蟲的改造
加入病毒之前,飼料應(yīng)該處于冷卻狀態(tài),以免使病毒失活。幼蟲感染病毒后在幼蟲體內(nèi)有一個病毒增殖的階段,為了獲得最高病毒產(chǎn)量,待感病蟲死后或死前一天收集病蟲比較好。
利用飼養(yǎng)宿主昆蟲獲得病毒的方法生產(chǎn)成本較低,增殖的病毒遺傳穩(wěn)定性好,這是它的優(yōu)點,但勞動強度大,在達到一定規(guī)模后,進一步擴大并不能減少單位產(chǎn)品的成本。昆蟲自身引發(fā)的某些微有機體對病毒產(chǎn)品的污染也難以避免。
最有效的辦法則是離體大規(guī)模培養(yǎng)昆蟲細胞來大量生產(chǎn)病毒。大規(guī)模培養(yǎng)昆蟲細胞的辦法很多,綜合起來可分為兩種類型:貼壁細胞培養(yǎng)和懸浮細胞培養(yǎng)。前者以滾瓶培養(yǎng)和微載體方法為主,后者則常采用轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、氣升發(fā)酵罐和灌注培養(yǎng)等方法。后來,還設(shè)計出了半連續(xù)生產(chǎn)和完全連續(xù)生產(chǎn)的方式進行病毒的批量生產(chǎn)。利用離體細胞培養(yǎng)所需設(shè)備投資大,培養(yǎng)基及牛血清等價格高昂,所生產(chǎn)的病毒難以在價格上與其他殺蟲劑競爭。盡管利用細胞培養(yǎng)法生產(chǎn)桿狀病毒具有許多優(yōu)點,但對細胞培養(yǎng)要求條件嚴(yán)、技術(shù)復(fù)雜、成本較高等因素,使得該法目前在經(jīng)濟上還達不到商品生產(chǎn)的要求。這里不做詳細介紹。綜上所述,采用整體活蟲生產(chǎn)病毒殺蟲劑仍是當(dāng)前桿狀病毒殺蟲劑生產(chǎn)的主要方法(鄧寧等,1995)。
(4)病毒的采集和制劑的加工
感病幼蟲體內(nèi)充滿病毒包涵體,但將死的幼蟲或已死的蟲尸很容易破裂,導(dǎo)致飼料被污染,因此,收獲前宜將這些病蟲和蟲尸置于-20℃的低溫冰箱或大冷凍器內(nèi)固定,然后收集起來一起抽提。抽提程序分3步:首先,將蟲尸用水稀釋并高速勻漿,勻漿液用紗布或尼龍布過濾。勻漿液多次用水稀釋可增加多角體的回收率,幼蟲蟲尸與水1:10稀釋并高速勻漿15min,回收率可達95%。勻漿時間的加長也有利于提高回收率;第二步,勻漿過濾后的粗提物采用差速離心得到粗體的較純的多角體,然后用蔗糖梯度離心或抽濾法去掉細菌污染物;最后,配制病毒懸浮制劑。將病毒分離物懸浮在50010甘油或蒸餾水與礦物油中;配制粉劑時,將病毒分離物與高嶺土、皂土、乳糖、脫脂乳糖、甲基纖維素或多聚葡萄糖等混合,26~28℃烘干或在冷凍干燥器中干燥即成。
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