定 價(jià)：16 元
叢書名：國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)示范中心配套教材
- 作者：陳雪嵐主編
- 出版時(shí)間：2012/3/1
- ISBN：9787030333742
- 出 版 社：科學(xué)出版社
- 中圖法分類：Q78-33
- 頁碼：97
- 紙張：膠版紙
- 版次：1
- 開本：16開
《基因工程實(shí)驗(yàn)》包括18個(gè)實(shí)驗(yàn)，分別是基因組DNA的提取、總RNA和mRNA的提取、質(zhì)粒DNA的提取、目的基因的獲得、限制性內(nèi)切酶的酶切反應(yīng)、凝膠電泳法進(jìn)行DNA的分離和純化、DNA片段的體外連接、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、重組子的轉(zhuǎn)化、菌落PCR篩選陽性重組子、重組質(zhì)粒的酶切鑒定、外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)、基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)分析、Western.Blotting實(shí)驗(yàn)、Southern印跡實(shí)驗(yàn)、全長(zhǎng)DNA文庫(kù)的構(gòu)建、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)和染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)。
《基因工程實(shí)驗(yàn)》內(nèi)容清晰準(zhǔn)確、簡(jiǎn)明扼要，便于指導(dǎo)操作�？勺鳛榫C合性大學(xué)、師范和農(nóng)林院校生物工程、生物技術(shù)、生物制藥等專業(yè)基因工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)用書。
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目錄
前言
實(shí)驗(yàn)1 基因組DNA的提取 1
實(shí)驗(yàn)1.1 植物基因組DNA的提取 2
實(shí)驗(yàn)1.2 動(dòng)物基因組DNA的提取 3
實(shí)驗(yàn)1.3 細(xì)菌基因組DNA的提取 4
實(shí)驗(yàn)1.4 酵母菌基因組DNA的提取 5
實(shí)驗(yàn)2 總RNA和mRNA的提取 8
實(shí)驗(yàn)2.1 Trizol法提取總RNA 9
實(shí)驗(yàn)2.2 異硫氰酸胍/酚一步法提取總RNA 10
實(shí)驗(yàn)2.3 總RNA提取試劑盒 11
實(shí)驗(yàn)2.4 mRNA的分離純化 12
實(shí)驗(yàn)3 質(zhì)粒DNA的提取 15
實(shí)驗(yàn)3.1 堿裂解法少量提取質(zhì)粒DNA 17
實(shí)驗(yàn)3.2 少量質(zhì)粒提取試劑盒 19
實(shí)驗(yàn)4 目的基因的獲得 21
實(shí)驗(yàn)4.1 PCR擴(kuò)增 26
實(shí)驗(yàn)4.2 反轉(zhuǎn)錄PCR.27
實(shí)驗(yàn)5 限制性內(nèi)切酶的酶切反應(yīng) 30
實(shí)驗(yàn)5.1 pUC 18/19質(zhì)粒DNA的EcoRI單酶解 32
實(shí)驗(yàn)5.2 HindIII和Sal I對(duì)pUC18/19質(zhì)粒DNA的雙酶切 33
實(shí)驗(yàn)6 凝膠電泳法進(jìn)行DNA的分離和純化 35
實(shí)驗(yàn)7 DNA片段的體外連接 37
實(shí)驗(yàn)8 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備 40
實(shí)驗(yàn)9 重組子的轉(zhuǎn)化 42
實(shí)驗(yàn)10 菌落PCR篩選陽性重組子 45
實(shí)驗(yàn)11 重組質(zhì)粒的酶切鑒定 47
實(shí)驗(yàn)12 外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá) 49
實(shí)驗(yàn)13 基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)分析：SDSPAGE 53
實(shí)驗(yàn)14 Western Blotting(蛋白免疫印記）實(shí)驗(yàn)59
實(shí)驗(yàn)15 Southern印跡實(shí)驗(yàn)63
實(shí)驗(yàn)16 全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建 68
實(shí)驗(yàn)17 凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)78
實(shí)驗(yàn)18 染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù) 82
參考文獻(xiàn) 87
附錄一 基因工程實(shí)驗(yàn)中的常用數(shù)據(jù)和換算關(guān)系 89
附錄二 基因工程實(shí)驗(yàn)常用試劑、溶液和緩沖液 92
附錄三 PCR實(shí)驗(yàn)引物設(shè)計(jì)原則 95
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