耿寶榮主編的《動物學實驗》內(nèi)容提要：本書是編者根據(jù)多年的教學經(jīng)驗，并在參考國內(nèi)外同類教材的基礎上精心編寫而成。全書按照動物進化系統(tǒng)從低等到高等的 順序編排29個基礎性實驗和4個綜合性實驗，實驗內(nèi)容涉及各門類代表動物的形態(tài)觀察與解剖、常見種類描述等。每個實驗前均簡述該實驗的意義、實驗操作的關 鍵步驟及相關注意事項。 《動物學實驗》可作為高等院校動物學實驗教學用書，也可供農(nóng)業(yè)、林業(yè)、水產(chǎn)及醫(yī)學類院校相關專業(yè)學生參考。
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耿寶榮主編的《動物學實驗》內(nèi)容介紹：本書以“重視基本知識和基本技能、注重學生的能力培養(yǎng)”為主要特色，保持了動物學實驗中的經(jīng)典內(nèi)容，配以大量模式示 意圖，便于學生學習基本實驗方法與操作技術，印證相關理論學習的內(nèi)容。書中安排的綜合實驗可以培養(yǎng)學生綜合分析問題和解決問題的能力。用于解剖實驗的動 物，盡量采用人工養(yǎng)殖種類：在動物分類上，突出各分類階元的代表性及南方物種的描述。文后附有相關的主要參考文獻。
第1部分 基礎性實驗
實驗1 動物的細胞和組織
【目的與要求】
1. 了解動物細胞的基本結構；
2. 掌握動物組織臨時裝片和涂片的一般制作方法；
3. 掌握動物
4. 類基本組織的結構特點，理解組織結構與機能的關系。
【實驗材料】
活蛙，蝗蟲浸制標本，動物各組織的玻片標本。
【用具與藥品】顯微鏡、載玻片、蓋玻片、解剖器、吸管、吸水紙、牙簽、染色缸、玻片架。
0.1%的亞甲藍、0.65%及0.9%的生理鹽水溶液、甲醇、吉姆薩染液、蒸餾水。
【操作與觀察】
1. 制片與觀察
（1）人口腔上皮細胞的制備與觀察滴一滴0.9%生理鹽水于載玻片中央，用牙簽在自己的口腔頰部輕輕刮幾下（注意不要用力過猛，以免損傷頰部），將刮下的白色黏性物質(zhì)薄而均勻地涂在載玻片上，然后加蓋玻片，在低倍鏡下觀察�？谇簧掀ぜ毎�(shù)個連在一起，由于口腔上皮細胞薄而透明，因此光線需要暗些。找到口腔上皮細胞后，將其移至視野中心，再轉高倍鏡觀察。口腔上皮細胞呈扁平多邊形。試辨認細胞核、細胞質(zhì)和細胞膜。若觀察不清楚時，可在蓋玻片一側加一滴0.1%的亞甲藍，另一側放一小塊吸水紙吸引，如此可使染液流入蓋玻片下面，將細胞染成淺藍色，核染色較深。注意染液不可過多，以免妨礙觀察。
（2）骨骼肌的制片與觀察用尖頭鑷子取蝗蟲浸制標本胸部肌肉少許，置于載玻片上的水滴中。用解剖針仔細分離肌纖維（越細越好）。用0.1%亞甲藍染色，蓋上蓋玻片后置于顯微鏡下觀察。
（3）血液涂片的制備與觀察左手從蛙背面握蛙，右手持注射器從蛙胸部進針刺入蛙心臟采血，滴一滴在潔凈載玻片右端，注意血滴不宜過大。另取邊緣光滑的一塊載玻片作推片，斜置于第一塊載玻片血滴的左緣，角度成40°左右。將推片稍向右移，接觸血滴，使血液充滿兩玻片之間的夾角。再將推片向左方勻速推進，使玻片上留下薄而均勻的血膜。搖動涂有血膜的玻片，使之盡快干燥，避免細胞皺縮。晾干后的血涂片放入盛有甲醇的染色缸內(nèi)，固定3～5min。將固定后的血涂片平放在玻片架上，滴加數(shù)滴吉姆薩染液，以覆蓋血膜為宜，染色15～30min。然后在染色玻片的一端用自來水細流緩緩沖去染液，斜立血涂片于玻片架上，晾干后置顯微鏡下觀察。
在低倍鏡下選擇分布均勻的血細胞，換高倍鏡觀察。蛙紅細胞呈橢圓形，中央有一橢圓形細胞核呈藍色，細胞質(zhì)呈紅色，此外，還可見到白細胞和凝血細胞。
2. 觀察各組織制片
（1）上皮組織
1）單層立方上皮（甲狀腺切片）：低倍鏡觀察，可看到許多大小不等的、圓形或橢圓形的紅色甲狀腺濾泡。高倍鏡觀察，濾泡壁由一層立方上皮細胞構成，核圓形、藍紫色，位于細胞中央，細胞質(zhì)粉紅色（圖1-1）。
2）單層柱狀上皮（小腸橫切片）：低倍鏡觀察，可見黏膜面形成許多指狀突起，突向管腔，突起表面覆有一層柱狀上皮。高倍鏡觀察，可見上皮細胞為柱狀，核長橢圓形、藍紫色，靠近細胞的基底部。把光圈縮小，減少光量，可見細胞的游離面有一層較亮的粉紅色膜狀結構，稱為紋狀緣。在柱狀細胞之間散在有杯狀細胞，此細胞上端膨大、下端細小，核呈三角形或半圓形，位于細胞基底部。在杯狀細胞上端的細胞質(zhì)內(nèi)積有大量不著色的黏液，在切片上呈卵形空泡狀結構，細胞游離面無紋狀緣（圖1-2）。
3）復層扁平上皮（食道橫切片）：低倍鏡觀察，此上皮由許多層細胞組成，上皮的基底面呈波浪形。高倍鏡觀察，可見與基膜相連的是一層排列整齊的矮柱狀細胞，細胞核橢圓形。中層為幾層多角形細胞，排列不整齊，核扁平。接近上皮表面的細胞變?yōu)楸馄綘�，核著色淡，甚至模糊不清（圖1-3）。
（2）肌肉組織
1）骨骼�。旱捅剁R觀察，在縱切面上可見骨骼肌為長條形肌纖維，在肌纖維間有染色較淡的結締組織。高倍鏡觀察，單個骨骼肌纖維呈長圓柱形，其表面有肌膜，肌膜內(nèi)側有許多染成藍紫色的橢圓形細胞核。縮小光圈，使視野不致過亮，可見到每條肌纖維內(nèi)有很多縱行的細絲狀肌原纖維，肌原纖維上有明暗相間的橫紋，即明帶和暗帶。在橫切面上，可見肌纖維呈多邊形或不規(guī)則圓形，外有肌膜，細胞核卵圓形緊貼肌膜內(nèi)側。肌原纖維呈小紅點狀，在肌漿內(nèi)排列不均勻，所以在橫切面上呈現(xiàn)小區(qū)（圖1-4）。
2）心�。合鹊捅剁R后高倍鏡觀察，在縱切面上，心肌纖維彼此以分支相連，核卵圓形，位于肌纖維中央�？s小虹彩光圈，使光線暗些，可看到心肌纖維的橫紋，但不及骨骼肌的明顯，在心肌纖維及其分支上，可見到染色較深的梯形橫線，即閏盤。在橫切面上，心肌纖維為不規(guī)則橫線，由于切片的關系，有的有核，有的無核（圖1-5）。
3）平滑肌：先低倍鏡后高倍鏡觀察蛙的平滑肌分離裝片，可見分離的平滑肌纖維呈長梭形，核長橢圓形，位于細胞中部，在常規(guī)染色標本上肌原纖維分辨不清楚（圖1-6）。
（3）神經(jīng)組織（脊髓橫切片）肉眼觀察，脊髓橫切片中央為蝴蝶狀的灰質(zhì)，其中心有一孔為中央管，灰質(zhì)較狹的一端為背角，較寬的為腹角；包圍在灰質(zhì)周圍染色較淡的部分是白質(zhì)。
低倍鏡觀察，將脊髓灰質(zhì)腹角移至視野中央，觀察神經(jīng)元。在腹角內(nèi)有許多較大的多突起細胞即脊髓腹角運動神經(jīng)元，為多極神經(jīng)元。神經(jīng)元胞體上的突起包括樹突和軸突，但兩者不易區(qū)分，一般可根據(jù)軸突基部的軸丘處染色較淺（無尼氏體）來識別軸突。選擇一個胞體較大、突起較多、核較清晰的神經(jīng)元移至視野中央。高倍鏡觀察，神經(jīng)元的核較大，呈囊泡狀，居細胞中央，核內(nèi)有染色較深的核仁。
（4）結締組織
1）透明軟骨（貓的氣管橫切片）：肉眼觀察，氣管壁內(nèi)染色略深的“C”形結構即透明軟骨，將該部位置于顯微鏡視野中央。
低倍鏡觀察，透明軟骨表面包有一層致密結締組織的軟骨膜。近軟骨膜的軟骨細胞較小而密，梭形，單個排列，其長軸與軟骨膜平行。軟骨中心部分的軟骨細胞較大，呈橢圓形或圓形，常2～4個成群分布。由軟骨表面至軟骨中心有質(zhì)地均勻的基質(zhì)。高倍鏡觀察，有軟骨細胞存在的地方稱為陷窩。在制片過程中有的軟骨細胞脫落，則軟骨陷窩呈現(xiàn)為白色空腔；有的軟骨細胞有所收縮，其周圍的白色間隙也是陷窩的一部分，陷窩周圍的基質(zhì)著色略深，稱為軟骨囊（圖1-7）。
2）骨組織（長骨橫切面磨片）：低倍鏡觀察，可見許多骨板呈多層同心圓排列的結構，即骨單位（哈佛氏系統(tǒng)）。每個骨單位的中央有一個黑色、較大的圓形管道的橫斷面即為中央管（哈佛氏管），在此管周圍有許多呈同心圓排列的骨單位骨板（哈佛氏骨板）。各哈佛氏系統(tǒng)之間還存在著一些不呈同心圓排列的骨板，即間骨板。
高倍鏡觀察，在骨板內(nèi)或骨板間有許多扁卵圓形呈黑角的小腔隙，即骨陷窩，其內(nèi)的骨細胞已不存在，骨陷窩向四周發(fā)出許多細小放射狀的黑色分支即骨小管，相鄰骨陷窩之間的骨小管彼此相連通，靠近哈佛氏管的骨小管則與哈佛氏管相連通（圖1-8）。
3）疏松結締組織：低倍鏡觀察，可見交織成網(wǎng)的纖維及分布在纖維之間的結締組織細胞。高倍鏡下觀察，膠原纖維為粉紅色粗細不等的細帶狀，它們相互交叉排列，數(shù)量較多，有時膠原纖維呈波浪狀。彈性纖維為深紫褐色，其斷端常呈現(xiàn)卷曲狀，纖維粗細不等，比膠原纖維細，單條分布而不成束，有分支并交織成網(wǎng)。成纖維細胞數(shù)量最多，胞體大，呈多突扁平形，染色淺，輪廓不明顯，核多為橢圓形，藍紫色，可見1或2個核仁。巨噬細胞形狀不一，與成纖維細胞的區(qū)別在于細胞質(zhì)中含有吞噬的臺盼藍顆粒，細胞輪廓較明顯，核較小，圓形或卵圓形。肥大細胞常成群分布在毛細血管附近，胞體較大，圓形或卵圓形，細胞質(zhì)中充滿粗大的藍紫色顆粒，核小，圓形或橢圓形，位于細胞中央。漿細胞數(shù)量少，很難在鋪片上見到，呈橢圓形，核染色深，居細胞一側，核內(nèi)含有豐富的染色質(zhì)，聚集在核周圍，向核中心輻射狀排列，近核處有一著色淺的區(qū)域（圖1-9）。
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