本書共分為20章。涵蓋了基礎免疫學的常用實驗技術,如組織多色免疫熒光標記技術、免疫組織化學技術、免疫電鏡細胞化學技術、蛋白質印跡法、原位雜交、酶聯(lián)免疫吸附試驗及酶聯(lián)免疫斑點試驗、免疫共沉淀、流式細胞術等。
免疫學在口腔醫(yī)學基礎理論研究以及疾病臨床診斷和治療中的廣泛應用與免疫學技術的進展密不可分,免疫學實驗技術的進步為免疫學的長足發(fā)展提供了堅實的技術保障!犊谇慌R床免疫學實驗技術》是一本以口腔醫(yī)學領域免疫學實驗技術為主要內(nèi)容的書,是聯(lián)系口腔免疫學基礎理論知識和口腔臨床免疫學的橋梁。
本書是《口腔臨床免疫學》的姊妹篇,由15 位從事口腔基礎和臨床免疫學工作的專家共同編寫而成。全書共分為20 章。本書內(nèi)容充分考慮實驗技術的可操作性、廣泛性以及前沿性,涵蓋了基礎免疫學的常用實驗技術,如組織多色免疫熒光標記技術、免疫組織化學技術、免疫電鏡細胞化學技術、蛋白質印跡法、原位雜交、酶聯(lián)免疫吸附試驗及酶聯(lián)免疫斑點試驗、免疫共沉淀、流式細胞術等。同時,本書還著重闡述了不同類型免疫細胞的常見分選方法及表型和功能鑒定的實驗技術,如口腔鱗癌腫瘤引流區(qū)淋巴結淋巴細胞(DNL)制備及活性檢測、自然殺傷細胞(NK 細胞)分選及活性檢測、B 細胞分選及免疫表型鑒定、T 細胞受體檢測技術、樹突狀細胞分離及鑒定技術、腫瘤疫苗研究技術等,為研究和表征免疫細胞生物學功能提供了充分的技術保障。此外,本書也納入了近年來興起的部分免疫學相關實驗技術,如循環(huán)腫瘤細胞檢測技術、細胞外囊泡分離和鑒定技術、口腔癌相關成纖維細胞分離及表征方法、單細胞測序技術等,較好地兼顧了前沿性。
本書在編寫過程中力求對實驗技術的原理、流程、試劑、儀器等的編寫做到準確無誤,并始終堅持內(nèi)容的專業(yè)性、易讀性、可操作性及科學性等原則?紤]到免疫學實驗技術發(fā)展日新月異,加上編寫者水平所限,難免存在紕漏和不足,希望廣大讀者予以批評和指正,不足之處將在再版時予以修改和補充。本書在編寫過程中參閱了大量國內(nèi)外文獻資料,在書中未能一一注解出處,在此一并表示感謝。
陳萬濤
2023 年10 月
第一章免疫學實驗技術的發(fā)展史/1
第一節(jié)免疫學實驗技術概述/1
第二節(jié)免疫學及經(jīng)典免疫學實驗技術的發(fā)展史/2
第三節(jié)免疫學和現(xiàn)代免疫學實驗技術的發(fā)展/5
第二章組織多色免疫熒光標記技術/9
第一節(jié)概述/9
第二節(jié)實驗操作步驟/10
第三節(jié)實驗關鍵點和注意事項/12
第四節(jié)應用實例/13
第三章免疫組織化學技術/17
第一節(jié)概述/17
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/18
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/22
第四節(jié)實驗器材和試劑/23
第五節(jié)實驗操作步驟/26
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/32
第七節(jié)實驗結果討論和分析/33
第四章免疫電鏡細胞化學技術/35
第一節(jié)概述/35
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/36
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/37
第四節(jié)實驗器材和試劑/37
第五節(jié)實驗操作步驟/37
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/38
第七節(jié)實驗結果分析和討論/40
第五章激光掃描共聚焦顯微鏡/41
第一節(jié)概述/41
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/42
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/43
第四節(jié)實驗器材和試劑/44
第五節(jié)實驗操作步驟/47
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/49
第七節(jié)激光掃描共聚焦顯微鏡應用實例/50
第六章蛋白質印跡法(Western/53
第一節(jié)概述/53
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/53
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/54
第四節(jié)實驗器材和試劑/55
第五節(jié)實驗操作步驟/57
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/73
第七節(jié)實驗結果討論和分析/75
第七章原位雜交技術/77
第一節(jié)概述/77
第二節(jié)原位雜交的分類/80
第三節(jié)傳統(tǒng)原位雜交的實驗操作步驟/82
第四節(jié)利用石蠟切片和DNA探針進行的原位雜交實驗操作/90
第五節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/91
第八章酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)及酶聯(lián)免疫斑點試驗(ELISPOT)/95
第一節(jié)概述/95
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/96
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/100
第四節(jié)實驗器材和試劑/101
第五節(jié)實驗操作步驟/103
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/106
第七節(jié)實驗結果討論和分析/109
第九章免疫共沉淀/111
第一節(jié)概述/111
第二節(jié)免疫共沉淀的原理和分類/113
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/114
第四節(jié)實驗器材和試劑/115
第五節(jié)實驗操作步驟/116
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/117
第七節(jié)實驗結果討論和分析/120
第十章流式細胞術/123
第一節(jié)概述/123
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/126
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/127
第四節(jié)實驗器材和試劑/128
第五節(jié)實驗操作步驟/128
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/135
第七節(jié)實驗結果討論和分析/136
第八節(jié)應用實例/136
第十一章口腔鱗癌腫瘤引流區(qū)淋巴結淋巴細胞(DNL)的制備及其活性的檢測方法/141
第一節(jié)概述/141
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/142
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/143
第四節(jié)實驗器材和試劑/143
第五節(jié)實驗操作步驟/143
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/144
第七節(jié)結果討論和分析/145
第十二章自然殺傷細胞(NK細胞)分選及活性檢測/147
第一節(jié)概述/147
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/148
第三節(jié)實驗適用范圍及條件/150
第四節(jié)實驗器材和試劑/150
第五節(jié)實驗操作步驟/151
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/154
第七節(jié)結果討論和分析/155
第十三章免疫磁珠B細胞分選及其免疫表型鑒定/157
第一節(jié)概述/157
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/159
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/160
第四節(jié)實驗器材和試劑/161
第五節(jié)實驗操作步驟/162
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/163
第十四章T細胞受體檢測技術/165
第一節(jié)概述/165
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/166
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/166
第四節(jié)實驗器材和試劑/167
第五節(jié)實驗操作步驟/168
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/171
第七節(jié)實驗結果討論和分析/172
第十五章腫瘤疫苗研究技術/175
第一節(jié)概述/175
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/176
第三節(jié)實驗器材和試劑/177
第四節(jié)實驗操作步驟/178
第五節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/181
第六節(jié)實驗結果討論和分析/182
第十六章樹突狀細胞分離及鑒定技術/185
第一節(jié)概述/185
第二節(jié)實驗方法的分類和原理/187
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/188
第四節(jié)實驗器材和試劑/188
第五節(jié)實驗操作步驟/189
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/192
第十七章循環(huán)腫瘤細胞檢測技術/195
第一節(jié)概述/195
第二節(jié)實驗方法的分類原理/196
第三節(jié)實驗適用范圍和條件/197
第四節(jié)實驗器材與試劑/197
第五節(jié)實驗操作步驟/198
第六節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/200
第十八章細胞外囊泡分離和鑒定技術/201
第一節(jié)概述/201
第二節(jié)外泌體常用分離方法的原理和優(yōu)缺點/202
第三節(jié)超速離心法分離外泌體/203
第四節(jié)超濾法分離外泌體/205
第五節(jié)體積排阻色譜法分離外泌體/206
第六節(jié)聚合物沉淀法分離外泌體/207
第七節(jié)免疫親和捕獲法分離外泌體/208
第八節(jié)微流控法分離外泌體/210
第十九章口腔癌相關成纖維細胞分離及表征方法/213
第一節(jié)概述/213
第二節(jié)口腔癌相關成纖維細胞的分離培養(yǎng)/214
第三節(jié)口腔癌相關成纖維細胞形態(tài)學觀察/216
第四節(jié)口腔癌相關成纖維細胞免疫組織化學法鑒定/218
第五節(jié)口腔癌相關成纖維細胞生物學功能檢測/219
第二十章單細胞測序技術/223
第一節(jié)概述/223
第二節(jié)單細胞測序技術的應用范圍/225
第三節(jié)10×Genomics平臺單細胞實驗/227
第四節(jié)實驗操作關鍵點和注意事項/233
第五節(jié)單細胞轉錄組數(shù)據(jù)分析技術/235