《生物工程下游技術》初版出版于1993年，二版出版于2002年，發(fā)行至今被國內(nèi)許多院校選做教材，也是相關研究單位和生產(chǎn)企業(yè)的技術參考讀物。
隨著時間的推移，生物工程相關的下游技術有了巨大發(fā)展，這些新的技術亟待補充到書中，
第三版聘請了國內(nèi)多年在一線從事生物工程下游技術教學、研究及產(chǎn)業(yè)化的中青年科學家編寫。內(nèi)容結構與前兩版基本一致，分為三篇。第一篇是生物反應器及大規(guī)模細胞培養(yǎng)。第二篇是目標產(chǎn)物的分離與純化。第三篇是目標產(chǎn)品分析檢測及質(zhì)量控制。新版盡可能多地列舉了國內(nèi)科研工作者的文獻，并將國內(nèi)最新產(chǎn)業(yè)化成果介紹給讀者，希望能夠?qū)ξ覈锕こ滔掠渭夹g工作的發(fā)展起到促進作用。
本書可作生物工程、生物技術、發(fā)酵工程、食品工程等專業(yè)的本科和研究生教材，也可供生物工程相關領域的研究和技術人員參考。
郭立安，西安交大保賽生物技術股份有限公司董事長，教授。先后承擔國家“十二五”生物技術戰(zhàn)略新興產(chǎn)業(yè)專項、高技術產(chǎn)業(yè)化示范工程、863、科技支撐、科技攻關、自然科學基金重點以及軍隊和省市重大科技攻關項目等60多項，出版專著4部，發(fā)表論文40余篇，多次獲得省、市、軍隊科技進步一二等獎。主要研究分離介質(zhì)技術，成功實現(xiàn)了分離介質(zhì)的規(guī)�；a(chǎn)。
第1篇生物反應器及大規(guī)模細胞培養(yǎng)001
第1章生物反應器002
1.1概述002
1.1.1生物反應器的定義002
1.1.2生物反應器的分類方法003
1.2生物反應器的類型004
1.2.1機械攪拌式生物反應器005
1.2.2固定床生物反應器008
1.2.3中空纖維生物反應器009
1.2.4氣升式生物反應器009
1.2.5一次性生物反應器010
1.2.6光生物反應器011
1.3生物反應器的設計與放大012
1.3.1生物反應器的放大012
1.3.2生物反應器的規(guī)�？s小015
1.4生物反應器內(nèi)流體混合與物質(zhì)傳遞017
1.4.1生物反應器內(nèi)的流體剪切力及流體混合017
1.4.2生物反應器內(nèi)的氣液傳質(zhì)018
參考文獻023
第2章動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術025
2.1動物細胞培養(yǎng)概述025
2.1.1發(fā)展歷程025
2.1.2工業(yè)化應用026
2.2影響動物細胞培養(yǎng)過程的關鍵因素及培養(yǎng)基組成030
2.2.1動物細胞培養(yǎng)基成分及作用030
2.2.2常用培養(yǎng)基設計033
2.2.3國內(nèi)外無血清培養(yǎng)基的工業(yè)化情況033
2.2.4營養(yǎng)物質(zhì)與代謝副產(chǎn)物間的關系034
2.2.5培養(yǎng)環(huán)境因素036
2.3動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)常用方法038
2.4動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)操作方式041
2.4.1分批培養(yǎng)041
2.4.2流加培養(yǎng)043
2.4.3半連續(xù)培養(yǎng)047
2.4.4連續(xù)培養(yǎng)048
2.4.5灌注培養(yǎng)048
2.4.6動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)用生物反應器簡介056
參考文獻057
第3章植物細胞培養(yǎng)技術060
3.1概述060
3.1.1發(fā)展歷程與應用現(xiàn)狀060
3.1.2植物細胞培養(yǎng)特性061
3.1.3發(fā)展前景061
3.2植物細胞培養(yǎng)方法062
3.2.1植物細胞懸浮培養(yǎng)062
3.2.2植物細胞固定化培養(yǎng)067
3.3植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物069
3.3.1基本程序070
3.3.2影響次生代謝物積累的因素071
3.3.3提高次生代謝物產(chǎn)量的途徑073
3.4植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)076
3.4.1宿主細胞076
3.4.2基本程序078
3.4.3提升重組蛋白質(zhì)產(chǎn)量的措施079
參考文獻080
第4章微生物發(fā)酵技術082
4.1微生物發(fā)酵技術歷史及應用082
4.1.1微生物發(fā)酵技術發(fā)展歷史082
4.1.2微生物發(fā)酵技術的應用084
4.2微生物發(fā)酵工程085
4.2.1育種085
4.2.2菌種增殖及培養(yǎng)條件的選擇087
4.2.3發(fā)酵方法087
4.3基因重組微生物培養(yǎng)技術089
4.3.1概述089
4.3.2基因工程菌的培養(yǎng)091
4.3.3工程菌的穩(wěn)定性095
4.3.4代謝副產(chǎn)物096
4.3.5高密度培養(yǎng)097
4.3.6培養(yǎng)過程的模擬099
參考文獻102
第2篇目標產(chǎn)物的分離與純化105
第5章細胞破碎、固液分離及原核表達蛋白質(zhì)的復性技術106
5.1概述106
5.2細胞破碎106
5.2.1細胞破碎方法及機理107
5.2.2細胞破碎技術109
5.3固液分離115
5.3.1離心分離116
5.3.2雙水相萃取117
5.3.3泡沫分離法119
5.3.4擴張床吸附技術121
5.4變性蛋白質(zhì)復性技術124
5.4.1包含體125
5.4.2蛋白質(zhì)復性126
5.5蛋白質(zhì)折疊液相色譜法130
5.5.1凝膠排阻色譜法131
5.5.2離子交換色譜法133
5.5.3親和色譜法133
5.5.4疏水相互作用色譜134
5.5.5各種色譜復性方法比較136
參考文獻137
第6章膜分離技術及在生物工程中的應用140
6.1概述140
6.1.1膜分離原理140
6.1.2膜分離技術特點140
6.1.3膜的種類141
6.2膜分離技術類型與膜材料143
6.2.1膜分離技術類型143
6.2.2膜組件145
6.3濃差極化與膜污染及清洗方法146
6.3.1膜污染與濃差極化146
6.3.2影響膜污染的因素148
6.3.3膜污染控制149
6.3.4清洗方法151
6.4膜分離技術在生物工程中的應用153
參考文獻157
第7章生物大分子色譜分離與純化159
7.1基本理論159
7.1.1計量置換理論160
7.1.2短柱理論162
7.2裝置和操作技術167
7.3色譜條件及色譜純化工藝最優(yōu)化168
7.4色譜餅170
參考文獻173
第8章無機基質(zhì)高效色譜填料175
8.1概述175
8.2無機基質(zhì)色譜填料176
8.2.1常見無機基質(zhì)176
8.2.2無機基質(zhì)的填料結構178
8.2.3硅膠表面修飾和功能化179
8.3無機基質(zhì)正相色譜填料182
8.3.1正相色譜填料種類與性質(zhì)182
8.3.2常見正相色譜填料183
8.3.3正相硅膠應用案例184
8.4無機基質(zhì)反相色譜填料184
8.4.1反相色譜填料種類與性質(zhì)184
8.4.2常見反相色譜填料185
8.4.3反相硅膠應用案例186
8.5無機基質(zhì)親水作用色譜填料187
8.5.1親水作用色譜填料的種類與性質(zhì)188
8.5.2常見的親水作用色譜填料188
8.6無機基質(zhì)離子交換色譜填料189
8.6.1離子交換色譜填料的種類與性質(zhì)189
8.6.2以硅膠為基質(zhì)的離子交換色譜填料的制備190
8.7無機基質(zhì)手性色譜填料190
8.7.1手性色譜填料種類與性能191
8.7.2常見以硅膠為基質(zhì)的手性色譜填料192
8.7.3硅膠基質(zhì)手性色譜填料應用案例193
8.8無機基質(zhì)體積排阻色譜填料193
8.8.1體積排阻色譜填料種類與性能194
8.8.2常見以硅膠為基質(zhì)的體積排阻色譜填料195
8.9無機基質(zhì)色譜填料研發(fā)新進展195
參考文獻197
第9章有機聚合物基質(zhì)色譜填料199
9.1概述199
9.2聚合物基質(zhì)反相色譜填料200
9.2.1聚合物反相色譜常用基質(zhì)201
9.2.2聚合物反相色譜填料與硅膠反相色譜填料的互補性203
9.3聚合物基質(zhì)離子交換色譜填料205
9.3.1聚合物離子交換色譜常用基質(zhì)206
9.3.2聚合物離子交換色譜介質(zhì)應用209
9.4聚合物基質(zhì)疏水相互作用色譜填料209
9.4.1常用聚合物疏水作用色譜填料介紹209
9.4.2疏水色譜技術的應用211
9.5聚合物基質(zhì)親和色譜填料211
9.5.1常見聚合物基質(zhì)親和色譜填料212
9.5.2聚合物基質(zhì)親和色譜填料與傳統(tǒng)糖類基質(zhì)親和色譜填料對比214
9.6聚合物基質(zhì)色譜填料性能評價216
9.6.1填料理化性質(zhì)的表征216
9.6.2色譜填料性能的表征216
參考文獻217
第10章排阻色譜219
10.1概述219
10.1.1排阻色譜發(fā)展歷史219
10.1.2排阻色譜分離原理219
10.2多糖基質(zhì)排阻色譜介質(zhì)及使用方法222
10.2.1排阻色譜介質(zhì)223
10.2.2排阻色譜介質(zhì)選擇依據(jù)229
10.3排阻色譜在生物工程產(chǎn)品純化中應用230
10.3.1生物大分子的分離純化230
10.3.2蛋白質(zhì)分子量測定234
10.3.3蛋白質(zhì)復性235
10.3.4濃縮蛋白質(zhì)溶液236
10.3.5測定蛋白質(zhì)構象轉(zhuǎn)化點236
參考文獻238
第11章離子交換色譜240
11.1概述240
11.2蛋白質(zhì)樣品的離子交換作用241
11.2.1溶液中蛋白質(zhì)帶電狀況241
11.2.2離子交換過程243
11.2.3離子交換色譜的蛋白質(zhì)保留機理246
11.3離子交換色譜介質(zhì)結構及種類247
11.3.1離子交換色譜介質(zhì)結構247
11.3.2離子交換色譜介質(zhì)分類248
11.3.3常見離子交換介質(zhì)產(chǎn)品249
11.4離子交換色譜使用條件選擇250
11.4.1離子交換介質(zhì)種類選擇250
11.4.2柱子選擇252
11.4.3流動相選擇253
11.4.4洗脫模式257
11.4.5流速、檢測波長及操作溫度選擇258
11.4.6流動相樣品處理和上樣量258
11.4.7使用步驟258
11.5離子交換色譜在生物工程純化中的應用261
11.5.1單克隆抗體純化261
11.5.2去除內(nèi)毒素261
11.5.3血管抑素3A工程蛋白柱復性與純化262
11.5.4蔗糖酶不同離子交換介質(zhì)純化263
11.5.5獸用疫苗純化264
11.5.6基因重組人血紅蛋白純化266
11.5.7基因重組人血清白蛋白純化266
參考文獻268
第12章親和色譜269
12.1概述269
12.1.1親和色譜發(fā)展歷程269
12.1.2親和色譜特點270
12.2親和色譜分離原理及操作270
12.2.1分離原理270
12.2.2基本操作步驟271
12.3親和色譜介質(zhì)組成、分類及影響分離因素273
12.3.1親和色譜介質(zhì)組成273
12.3.2親和色譜分類276
12.3.3影響親和色譜分離的因素278
12.4親和色譜在生物大分子純化中的應用279
12.4.1蛋白質(zhì)A/G為親和配體的抗體純化279
12.4.2單克隆抗體作為親和配體純化蛋白質(zhì)282
12.4.3金屬螯合親和色譜純化重組蛋白質(zhì)282
12.4.4染料親和色譜純化蛋白質(zhì)284
12.4.5其它新型親和色譜純化技術284
12.4.6親和色譜應用中的問題及解決策略286
參考文獻287
第13章疏水作用色譜和反相色譜289
13.1疏水色譜概述289
13.1.1基本原理289
13.1.2作用機理291
13.2疏水色譜介質(zhì)組成及分離條件選擇292
13.2.1介質(zhì)基本組成292
13.2.2常用介質(zhì)292
13.2.3分離蛋白質(zhì)時的條件選擇293
13.2.4操作過程297
13.3反相色譜概述299
13.3.1蛋白質(zhì)在反相色譜中的作用機理299
13.3.2反相色譜分離條件選擇300
13.4疏水色譜與反相色譜的異同303
13.4.1疏水色譜與反相色譜分離機理相同303
13.4.2疏水色譜與反相色譜介質(zhì)配體303
13.4.3疏水色譜與反相色譜流動相組成與洗脫能力比較303
13.4.4溫度影響303
13.4.5疏水色譜與反相色譜的應用304
13.5疏水色譜及反相色譜在蛋白質(zhì)純化中的應用305
13.5.1疏水色譜在蛋白質(zhì)純化中的應用305
13.5.2反相色譜在蛋白質(zhì)純化中的應用309
參考文獻311
第14章制備色譜及工藝優(yōu)化313
14.1概論313
14.1.1制備色譜的定義313
14.1.2蛋白質(zhì)制備色譜純化工藝現(xiàn)狀313
14.1.3制備色譜與傳統(tǒng)分析色譜異同314
14.2制備色譜評估參數(shù)315
14.2.1負載量315
14.2.2評估參數(shù)316
14.3制備色譜最佳純化條件建立316
14.3.1色譜技術之間相容性選擇原則317
14.3.2最佳純化條件建立319
14.4蛋白質(zhì)色譜純化的工藝優(yōu)化324
14.4.1色譜純化工藝建立前應遵循的基本原則324
14.4.2蛋白質(zhì)純化基本工藝流程325
14.5制備色譜在蛋白質(zhì)純化方面的應用327
14.5.1血液制品純化327
14.5.2基因重組人血清白蛋白純化329
14.5.3胰島素純化330
14.5.4疫苗純化331
14.5.5單克隆抗體藥物純化332
參考文獻332
第3篇目標產(chǎn)物分析檢測及質(zhì)量控制334
第15章電泳技術335
15.1薄層電泳335
15.1.1薄層電泳原理335
15.1.2薄層電泳應用335
15.2凝膠電泳336
15.2.1凝膠電泳原理336
15.2.2凝膠電泳應用337
15.2.3二維凝膠電泳341
15.3毛細管電泳344
15.3.1毛細管電泳原理345
15.3.2毛細管電泳分類345
15.3.3毛細管電泳應用346
15.4自由流電泳347
15.4.1載體自由流電泳347
15.4.2無載體自由流電泳348
15.4.3自由流電泳應用349
參考文獻350
第16章生物質(zhì)譜技術351
16.1生物質(zhì)譜原理351
16.2生物質(zhì)譜技術應用351
16.2.1蛋白質(zhì)定性分析351
16.2.2蛋白質(zhì)鑒定方法353
16.2.3蛋白質(zhì)磷酸化分析方法360
16.2.4蛋白質(zhì)糖基化分析方法361
16.2.5蛋白質(zhì)定量分析364
參考文獻368
第17章蛋白質(zhì)產(chǎn)品分析技術370
17.1蛋白質(zhì)含量測定370
17.1.1紫外吸收法370
17.1.2考馬斯亮藍法371
17.1.3雙縮脲法371
17.1.4福林酚試劑法372
17.1.5二辛可寧酸法373
17.2蛋白質(zhì)氨基酸序列、肽譜、二硫鍵及純度分析374
17.2.1蛋白質(zhì)氨基酸序列分析374
17.2.2蛋白質(zhì)肽譜分析375
17.2.3蛋白質(zhì)二硫鍵分析376
17.2.4蛋白質(zhì)純度分析377
17.3生物藥品中的痕量雜質(zhì)檢測技術377
17.3.1生物藥品中雜質(zhì)的來源及分類377
17.3.2生物技術產(chǎn)品中痕量無機雜質(zhì)分析檢測技術379
17.3.3生物技術產(chǎn)品中痕量有機雜質(zhì)分析檢測技術381
17.4生物技術產(chǎn)品中大分子雜質(zhì)檢測技術384
17.4.1痕量DNA殘留檢測技術384
17.4.2生物藥物中蛋白質(zhì)類雜質(zhì)檢測方法及質(zhì)量控制386
17.4.3生物制品生物安全性檢查389
參考文獻389
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