目錄
生物化學(xué)實驗須知 1
第一部分 實驗基本操作
第一章 玻璃儀器洗滌與清潔 3
第二章 吸量器的選擇與使用 5
第三章 溶液的處理 8
第四章 實驗樣品的制備 9
第五章 實驗儀器介紹 11
第六章 實驗報告撰寫及要求 21
第二部分 生物化學(xué)實驗原理與技術(shù)
第七章 分光光度法 22
概述 22
實驗1 紫外分光光度法測定核酸與蛋白質(zhì)含量 25
實驗2 血清蛋白的鹽析與定量 27
實驗3 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量（Lowry基本法） 28
第八章 層析法 31
概述 31
實驗4 紙層析法分析轉(zhuǎn)氨基反應(yīng) 38
實驗5 離子交換柱層析法分離血清蛋白 40
第九章 電泳法 44
概述 44
實驗6 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離混合蛋白質(zhì) 49
第十章 離心分離技術(shù) 53
概述 53
實驗7 單個核細胞的分離——密度梯度離心法分離淋巴細胞 54
第十一章 酶促反應(yīng)動力學(xué)實驗56
實驗8 用正交法測定幾種因素對酶活力的影響 56
實驗9 影響酶活性的因素 59
實驗10 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定 61
第三部分 分子生物學(xué)實驗原理與技術(shù)
第十二章 基因工程基本技術(shù) 65
概述 65
實驗11 大腸桿菌感受態(tài)的制備及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 66
實驗12 質(zhì)粒DNA提取、濃度測定與純度鑒定 68
實驗13 重組質(zhì)粒DNA的酶切鑒定 70
實驗14 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴增基因 72
實驗15 動物組織總RNA的提取 75
實驗16 RNA質(zhì)量檢測及cDNA鏈合成 77
實驗17 PCR擴增產(chǎn)物純化及瓊脂糖凝膠電泳回收 79
實驗18 DNA限制性內(nèi)切酶酶切和酶切產(chǎn)物的回收 81
實驗19 目的基因與質(zhì)粒載體的連接和轉(zhuǎn)化 83
實驗20 陽性克隆的篩選與鑒定 85
實驗21 外源基因的誘導(dǎo)表達與檢測 87
第十三章 基因表達與功能分析的基本方法 90
實驗22 實時定量PCR 90
實驗23 Westernblot檢測目標蛋白的表達 93
實驗24 免疫共沉淀（Co-IP）研究蛋白質(zhì)相互作用 98
實驗25 染色質(zhì)免疫沉淀法（ChIP）研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA的相互作用 102
第十四章 臨床生物化學(xué)與臨床分子生物學(xué)實驗 108
實驗26 堿性磷酸酶的提取和比活性測定 108
實驗27 正常和糖尿病大鼠血糖與血脂的檢測及激素對血糖的影響 111
實驗28 人頰黏膜上皮細胞基因組DNA的抽提及ACE基因多態(tài)性檢測 115
實驗29 乙醛脫氫酶突變基因型的檢測 117
實驗30 人血清同型半胱氨酸的測定 119