牛肉質(zhì)相關(guān)候選基因間作用機(jī)制的分析研究
肉類對(duì)發(fā)達(dá)國(guó)家的經(jīng)濟(jì)及人類的營(yíng)養(yǎng)具有重要作用。
《牛肉質(zhì)相關(guān)候選基因間作用機(jī)制的分析研究》對(duì)牛肉質(zhì)相關(guān)候選基因間作用機(jī)制進(jìn)行了研究,利用韓牛肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn),探討了衛(wèi)星細(xì)胞在肌管中參與增殖、分化、缺氧、凋亡、骨骼肌萎縮和脂質(zhì)積聚的時(shí)作用機(jī)制;并對(duì)CAPN1基因和CASP9基因在牛骨骼肌形成中的功能作用進(jìn)行了一系列的研究。
《牛肉質(zhì)相關(guān)候選基因間作用機(jī)制的分析研究》結(jié)構(gòu)合理,條理清晰,內(nèi)容豐富新穎,可供相關(guān)研究人員參考使用。
肉類對(duì)發(fā)達(dá)國(guó)家的經(jīng)濟(jì)及人類的營(yíng)養(yǎng)具有重要作用。日益增長(zhǎng)的物質(zhì)需求要求食品生產(chǎn)商在確保飲食質(zhì)量、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和安全方面提供更高的標(biāo)準(zhǔn)。肉品質(zhì)量的概念在不斷發(fā)展和變化,包括多樣性、飲食質(zhì)量、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和安全以及環(huán)境和動(dòng)物福利方面。到目前為止,大多數(shù)韓國(guó)消費(fèi)者更喜歡韓牛牛肉,而不是進(jìn)口牛肉,因?yàn)樗麄冋J(rèn)為,韓牛牛肉的多汁性和風(fēng)味優(yōu)于進(jìn)口牛肉。一般來說,消費(fèi)者對(duì)優(yōu)質(zhì)牛肉的要求取決于牛肉的大理石花紋(或肌內(nèi)脂肪)、肉的顏色、硬度和質(zhì)地。而肌肉纖維特性影響肉的顏色、保水能力、肌內(nèi)脂肪組織和肉的質(zhì)地等品質(zhì)特征。骨骼肌的再生能力被認(rèn)為是有限的,這是由于其起源于一個(gè)特定群體的成體干細(xì)胞即衛(wèi)星細(xì)胞。這些肌細(xì)胞起源于胚胎發(fā)育過程,骨骼肌通過其終末分化和融合形成多核肌管,形成收縮肌纖維。每一種肌肉纖維都由肌原纖維蛋白構(gòu)成,負(fù)責(zé)能量的產(chǎn)生。每一種纖維都與一群能夠分裂和融合肌肉纖維的自我更新衛(wèi)星細(xì)胞相關(guān)聯(lián)。肌衛(wèi)星細(xì)胞為評(píng)估與肌肉發(fā)育相關(guān)的候選基因和與肉質(zhì)相關(guān)的蛋白水解酶的功能提供了一個(gè)很好的模型。
本書分為兩個(gè)篇幅。第一篇中作者利用韓牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn),探討了衛(wèi)星細(xì)胞在肌管中參與增殖、分化、缺氧、凋亡、骨骼肌萎縮和脂質(zhì)積聚的時(shí)作用機(jī)制。
第一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究了μ-鈣蛋白酶、鈣蛋白酶、HSP、caspase和蛋白質(zhì)組在疊氮鈉(NaN3)缺氧誘導(dǎo)的肌生成和細(xì)胞死亡中的作用。主要是從韓牛背最長(zhǎng)肌組織中分離出衛(wèi)星細(xì)胞,并在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)。ImM疊氮鈉(NaN3)誘導(dǎo)的化學(xué)缺氧可引起細(xì)胞凋亡。將細(xì)胞樣品分為3期:衛(wèi)星細(xì)胞形成融合單層(第1期);第1期細(xì)胞在分化后第8天融合成肌管(第2期);第2期細(xì)胞用ImM疊氮鈉(NaN3)處理24h(第3期)。在我們?cè)O(shè)定的培養(yǎng)環(huán)境下,成熟的韓牛肌衛(wèi)星細(xì)胞有分化為多核細(xì)胞的潛能。實(shí)時(shí)RT-PCR結(jié)果顯示,與第1期細(xì)胞相比,第2期細(xì)胞CAPN1、鈣蛋白酶抑制蛋白、CASP 7和CAD 9 mRNA表達(dá)增強(qiáng)。western blotting結(jié)果顯示,第2期細(xì)胞caspase 3、caspase 7、caspase 8、caspase 9活性較第1期細(xì)胞升高。實(shí)時(shí)RT-PCR結(jié)果顯示,與2期細(xì)胞相比,3期細(xì)胞CAPN1、鈣蛋白酶抑制蛋白、CASP7、HSP70、HSP90表達(dá)增加,CARD9的mRNA表達(dá)降低。與第2期相比,第3期標(biāo)本caspase 7和caspase 12活性明顯升高,同時(shí)HSP70和HSP90的表達(dá)量也明顯增加,這與Western blotting在缺氧條件下的結(jié)果一致。從中我們推斷出caspase 7、caspase 12、HSP70和HSP90參與了缺氧條件下細(xì)胞凋亡的過程。