《醫(yī)學免疫學檢測技術及臨床應用》主要介紹了各類免疫學檢測技術的原理和方法,并結(jié)合相關疾病闡述了其臨床應用。主要內(nèi)容包括抗原抗體反應及免疫分子檢測技術,細胞免疫學檢測技術,基于蛋白和組織學等層面的不同分子免疫學檢測技術,基因相關的免疫學檢測技術,結(jié)合當前全新生物信息學的免疫學交叉學科技術的發(fā)展,基于自身免疫病、免疫缺陷病、免疫增殖病感染及傳染性疾病、血液病、遺傳病、腫瘤、生殖免疫學和超敏反應免疫學臨床診治的相應免疫學檢測技術。本書理論與實踐相結(jié)合,可供高等院校高等醫(yī)學院校臨床醫(yī)學、醫(yī)學檢驗技術和病理科等專業(yè)本科學生、相關專業(yè)研究生作為教材使用,還可供從事臨床免疫檢驗技術人員和實驗人員、從事臨床醫(yī)學、衛(wèi)生檢驗工作的科研人員閱讀。
丁軍穎,首都醫(yī)科大學附屬北京中醫(yī)醫(yī)院 北京市中醫(yī)研究所,研究員,丁軍穎,(1977— ),醫(yī)學免疫學博士,基礎醫(yī)學博士后,副研究員。外文雜志Journal of Disease and Global Health的審稿人;中文期刊《醫(yī)學研究雜志》和《中華臨床醫(yī)師雜志》的審稿專家。
中國微生物學會臨床微生物學專業(yè)委員會青年委員;北京中醫(yī)藥學會第二屆中醫(yī)檢驗專業(yè)委員會青年委員。
從事感染免疫學基礎研究工作10余年,先后獨立完成河北省自然基金資助項目“三種不同IL-15基因轉(zhuǎn)染對NCI-H446細胞免疫生物學特性的研究”;國家疾病預防控制中心博士后基金資助項目“丁型肝炎新型診斷方法的建立”;作為主要參與人,帶領7人組團隊完成國家863課題“中國人乳頭瘤病毒優(yōu)勢流行株多價預防性疫苗的研究”的子課題。
第一篇醫(yī)學免疫學檢測技術
第一章抗原抗體反應及免疫分子檢測技術2
第一節(jié)凝集反應2
一、直接凝集反應2
二、間接凝集反應3
三、抗球蛋白試驗3
第二節(jié)沉淀反應4
一、免疫濁度測定4
二、免疫電泳技術5
第三節(jié)免疫標記技術7
一、酶免疫技術7
二、熒光免疫技術9
三、膠體金免疫技術10
四、化學發(fā)光免疫分析技術12
五、放射免疫技術13
第四節(jié)免疫球蛋白、循環(huán)免疫復合物與補體檢測技術13
一、免疫球蛋白檢測技術13
二、循環(huán)免疫復合物檢測技術17
三、補體檢測技術17
第五節(jié)細胞因子及其受體與黏附分子的檢測技術19
一、細胞因子及其受體檢測技術19
二、黏附分子的檢測技術23
第二章細胞免疫學檢測技術25
第一節(jié)免疫細胞分離技術25
一、外周血單個核細胞的分離提取25
二、免疫細胞的分離提取25
第二節(jié)免疫細胞及其功能檢測技術26
一、淋巴細胞及其亞群的數(shù)量檢測26
二、淋巴細胞功能檢測27
三、吞噬細胞功能檢測30
第三章分子免疫學檢測技術32
第一節(jié)免疫沉淀技術32
一、概述32
二、免疫沉淀的關鍵技術33
三、染色質(zhì)免疫共沉淀技術34
第二節(jié)免疫印跡技術36
一、概述36
二、免疫印跡的關鍵技術36
第三節(jié)酶聯(lián)免疫斑點技術37
一、概述37
二、酶聯(lián)免疫斑點的關鍵技術37
第四節(jié)免疫組織化學技術39
一、概述39
二、免疫組織化學的關鍵技術40
三、免疫熒光組化技術44
四、免疫酶組織化學技術45
第五節(jié)蛋白質(zhì)芯片技術46
一、概述46
二、蛋白質(zhì)芯片的關鍵技術47
三、蛋白質(zhì)芯片技術的應用48
第四章免疫學基因檢測技術50
第一節(jié)免疫PCR技術50
一、概述50
二、免疫PCR關鍵技術51
第二節(jié)細胞因子基因組DNA或mRNA的檢測53
一、G顯帶染色體核型分析53
二、FISH檢測54
三、P Array(CytoScan 750K)檢測54
四、下一代測序54
第三節(jié)BCR及TCR基因重排分析54
第四節(jié)HLA等位基因分型及抗HLA抗體檢測技術55
一、HLA基因分型的主要方法55
二、抗-HLA抗體檢測技術56
三、HLA 檢測的臨床應用56
第五節(jié)表觀遺傳學在免疫學中的應用57
一、表觀遺傳學的相關分子機制58
二、表觀遺傳與機體免疫系統(tǒng)60
第五章交叉免疫學檢測技術62
第一節(jié)抗原抗體相互作用的研究技術62
一、酵母雙雜交技術62
二、噬菌體展示技術62
三、表面等離子共振技術63
四、熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術63
五、抗體與蛋白質(zhì)陣列63
六、免疫共沉淀技術63
七、GST Pull-down技術64
八、Far-Western blot法64
九、生物信息學手段64
第二節(jié)生物信息學技術在免疫學中的應用65
一、免疫學常用數(shù)據(jù)庫65
二、免疫生物信息學數(shù)據(jù)庫的應用67
第二篇免疫學檢測技術的臨床應用
第六章自身免疫性疾病的免疫學檢測70
第一節(jié)疾病概述70
一、自身耐受與自身免疫70
二、自身免疫病的共同特征70
三、自身免疫病的分類71
四、常見的自身免疫病71
第二節(jié)自身免疫性疾病相關自身抗體及檢測73
一、臨床常見自身抗體73
二、器官/組織自身免疫性相關性自身抗體76
第七章免疫缺陷性疾病的免疫學檢測79
第一節(jié)疾病概述79
一、病因79
二、主要臨床表現(xiàn)80
三、分類81
第二節(jié)原發(fā)性特異性免疫缺陷的檢測84
一、免疫球蛋白(Ig)檢測84
二、細胞因子檢測85
三、淋巴細胞及亞群計數(shù)85
四、自然殺傷(NK)細胞免疫檢測86
五、T淋巴細胞功能檢測86
第三節(jié)原發(fā)性非特異性免疫缺陷的檢測86
一、吞噬細胞缺陷檢測86
二、補體缺陷檢測87
第四節(jié)獲得性免疫缺陷的檢測88
一、外周血T淋巴細胞亞群檢測88
二、HIV蛋白的檢測88
第八章免疫增殖性疾病的免疫學檢測89
第一節(jié)疾病概述89
一、免疫增殖性疾病的分類89
二、常見單克隆免疫球蛋白增殖病90
第二節(jié)免疫球蛋白異常增生的常用免疫學檢測94
一、血清蛋白區(qū)帶電泳94
二、免疫電泳94
三、免疫選擇電泳95
四、免疫固定電泳95
五、血清免疫球蛋白定量95
六、其他檢測方法96
第九章感染及傳染性疾病的免疫學檢測97
第一節(jié)病毒感染性疾病的免疫學檢測97
一、流感病毒感染97
二、輪狀病毒感染97
三、肝炎病毒感染97
四、SARS病毒感染100
第二節(jié)性傳播疾病的免疫學檢測100
一、梅毒100
二、淋病及非淋菌性尿道炎101
三、艾滋病102
第三節(jié)宮內(nèi)感染的免疫學檢測102
一、風疹病毒抗體檢測102
二、巨細胞病毒抗原及抗體檢測103
三、單純皰疹病毒抗原及抗體檢測103
四、弓形蟲抗原及抗體檢測103
第四節(jié)其他傳染性疾病的免疫學檢測103
一、傷寒、副傷寒103
二、立克次體病104
三、鏈球菌感染104
四、肺炎支原體感染105
五、結(jié)核分枝桿菌感染105
六、嗜肺軍團菌感染105
七、侵襲性真菌感染105
第五節(jié)非特異性感染標志物的免疫學檢測106
一、C反應蛋白106
二、降鈣素原106
三、白細胞介素6107
四、可溶性髓系細胞表達觸發(fā)受體-1107
五、腎上腺髓質(zhì)素107
六、可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體107
七、可溶性CD14亞型108
八、脂多糖結(jié)合蛋白108
第十章血液病的免疫學檢測109
第一節(jié)白血病的免疫學分型109
一、白血病的免疫學分型基礎109
二、白血病免疫學分型的主要技術類型111
三、急性白血病免疫學分型112
四、慢性成熟淋巴細胞增殖性疾病的免疫學分型114
第二節(jié)紅細胞相關檢測115
一、非免疫性紅細胞病的檢測115
二、免疫性溶血性貧血的檢測115
三、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥的檢測116
第三節(jié)凝血及纖溶系統(tǒng)檢測117
一、血小板免疫相關檢測117
二、凝血因子抗原檢測118
三、抗凝蛋白抗原檢測120
四、纖溶因子抗原檢測121
五、血管內(nèi)皮細胞損傷標志物檢測122
第十一章HLA相關性遺傳病的免疫學檢測124
第一節(jié)HLA與醫(yī)學的關系124
一、HLA 在醫(yī)學中的應用124
二、HLA分型方法125
第二節(jié)HLA-B27的分型方法125
一、微量細胞毒試驗126
二、酶聯(lián)免疫分析126
三、流式細胞分析126
四、PCR-SSP檢測126
第十二章腫瘤的免疫學檢測127
第一節(jié)腫瘤抗原127
一、腫瘤抗原的分類127
二、機體抗腫瘤免疫機制128
三、腫瘤標志物128
第二節(jié)蛋白類腫瘤標志物檢測129
一、胚胎抗原類腫瘤標志物129
二、組織多肽抗原129
三、前列腺特異性抗原130
四、鱗狀上皮細胞癌抗原130
五、鐵蛋白130
六、β2-微球蛋白130
七、細胞角蛋白131
第三節(jié)糖脂類腫瘤標志物檢測131
一、糖鏈抗原19-9131
二、糖鏈抗原125131
三、糖鏈抗原15-3131
四、糖鏈抗原50132
五、癌抗原72-4132
六、糖鏈抗原242132
第四節(jié)酶類腫瘤標志物檢測132
一、神經(jīng)元特異性烯醇化酶132
二、α-L-巖藻糖苷酶133
三、酸性磷酸酶133
四、堿性磷酸酶133
第五節(jié)激素類腫瘤標志物檢測134
一、人絨毛膜促性腺激素134
二、降鈣素134
第六節(jié)腫瘤標志物檢測的注意事項134
一、標本采集注意事項134
二、檢測方法和試劑對檢測結(jié)果的影響134
三、腫瘤標志物檢測的干擾因素134
四、腫瘤標志物的聯(lián)合應用135
五、腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的檢測及臨床意義136
第七節(jié)腫瘤的免疫學干預136
一、腫瘤細胞逃避機體免疫攻擊的主要機制136
二、提高機體抗瘤免疫效應的主要途徑136
三、腫瘤免疫學干預臨床策略136
第十三章生殖免疫學檢測142
第一節(jié)不孕不育與自身免疫142
一、疾病概述142
二、因素篩查143
第二節(jié)不孕不育相關自身抗體的檢測144
一、抗精子抗體144
二、人精漿免疫抑制因子144
三、抗磷脂抗體144
四、抗透明帶抗體145
五、抗子宮內(nèi)膜抗體145
六、抗卵巢抗體145
七、抗滋養(yǎng)細胞膜抗原的抗體145
八、抗人絨毛膜促性腺激素抗體146
第三節(jié)染色體異常出生缺陷免疫學檢測146
一、染色體異常出生缺陷的篩查146
二、染色體異常出生缺陷性疾病的檢查147
三、妊娠合并感染性疾病的篩查148
第十四章超敏反應的免疫學檢測150
第一節(jié)Ⅰ型超敏反應150
一、總IgE檢測150
二、特異性IgE抗體檢測151
三、組胺釋放試驗152
四、嗜堿性粒細胞脫顆粒試驗152
五、皮膚試驗152
六、激發(fā)試驗154
第二節(jié)Ⅱ和Ⅲ型超敏反應155
第三節(jié)Ⅳ型超敏反應155
一、淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗155
二、巨噬細胞移動抑制試驗155
三、結(jié)核菌素試驗155
四、斑貼試驗156
參考文獻157