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內(nèi) 容簡(jiǎn) 介

分子克隆技術(shù)30多年來一直是全球生命科學(xué)領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室專業(yè)技術(shù)的基礎(chǔ)。冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版的《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》一書擁有的可靠性和*性，使本書成為業(yè)內(nèi)*流行、*具影響力的實(shí)驗(yàn)室操作指南。第四版的《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》保留了之前版本中備受贊譽(yù)的細(xì)節(jié)和準(zhǔn)確性，10個(gè)原有的核心章節(jié)經(jīng)過更新，反映了標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)的發(fā)展和創(chuàng)新，并介紹了一些前沿的操作步驟。同時(shí)還修訂了第三版中的核心章節(jié)，以突出現(xiàn)有的核酸制備和克隆、基因轉(zhuǎn)移及表達(dá)分析的策略和方法，并增加了12個(gè)新章節(jié)，專門介紹*激動(dòng)人心的研究策略，包括利用 DNA 甲基化技術(shù)和染色質(zhì)免疫沉淀的表觀遺傳學(xué)分析、RNAi、新一代測(cè)序技術(shù)，以及如何處理數(shù)據(jù)生成和分析的生物信息學(xué)，例如介紹了分析工具的使用，如何比較基因和蛋白質(zhì)的序列，鑒定多個(gè)基因的常見表達(dá)模式等。本書還保留了必不可少的附錄：包括試劑和緩沖液、常用技術(shù)、檢測(cè)系統(tǒng)、一般安全原則和危險(xiǎn)材料。任何使用分子生物學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)室都將因擁有一冊(cè)《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》而受益。本書可作為學(xué)習(xí)遺傳學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、微生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和免疫學(xué)等學(xué)科的重要指導(dǎo)，可供生物學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生，以及農(nóng)、林、牧、漁、檢驗(yàn)檢疫等方面的科研、教學(xué)與技術(shù)人員參考。

Originally published in English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth Edition, by MichaelR.Green and Joseph Sambrook 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA 2017 Science Press. Print in China.Authorized Simplified Chinese translation of the English edition 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translation is published and sold by permission of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same.

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第四版前言

人類和模式生物全基因組序列的獲得對(duì)各領(lǐng)域生物學(xué)家現(xiàn)有的科研方式產(chǎn)生了深遠(yuǎn)影響。對(duì)浩瀚的基因圖譜的探索需要開發(fā)多種新的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法，傳統(tǒng)的克隆手冊(cè)必然會(huì)過時(shí)，已建立的方法也會(huì)被淘汰，這都是《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》一書全新版本問世的主要推動(dòng)力。在準(zhǔn)備《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（第四版）的初期，我們進(jìn)行了全面的回顧來決定哪些舊材料應(yīng)被保留，哪些新材料需要補(bǔ)充，難的是，哪些材料應(yīng)該被刪除。在回顧過程中，許多科學(xué)家提出了寶貴的建議，他們的名字在下一頁的致謝中列出，我們對(duì)他們深表感激。僅是一本實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)當(dāng)然不可能涵蓋所有的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，所以必須從中做出選擇，有時(shí)是艱難的選擇。我們猜測(cè)對(duì)于其中一部分選擇，有些人會(huì)提出異議。然而我們的兩個(gè)指導(dǎo)原則是：第一，《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》是以核酸為中心的實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)，因而總體上我們沒有選取非直接涉及 DNA或 RNA的實(shí)驗(yàn)方法。所以，盡管本書中有分析蛋白質(zhì)之間相互作用的酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)操作的章節(jié)，但并不包括許多其他的不直接涉及核酸的蛋白質(zhì)間相互作用研究方法。第二，本著 John Lockean為盡可能多的人們做多的善事的思想，我們嘗試囊括盡可能多的廣泛用于分子和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的以核酸為基礎(chǔ)的方法。對(duì)我們而言，較為困難的任務(wù)是決定哪些材料應(yīng)該被刪除，而這個(gè)任務(wù)在與冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社協(xié)商之后難度大大降低，他們同意把較陳舊的方法放在冷泉港方案網(wǎng)站上

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由于新實(shí)驗(yàn)方法的激增，由一個(gè)人（甚至兩個(gè)人）*撰寫所有相關(guān)的實(shí)驗(yàn)方法是根本不現(xiàn)實(shí)的。因此，與前一版《分子克隆》大的不同是組織了眾多領(lǐng)域內(nèi)的專家們來撰寫指定章節(jié)，提供指定方案。沒有他們這些科學(xué)家的熱心參與，本書不可能呈獻(xiàn)給大家。自第三版《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》后，各種商業(yè)化試劑盒層出不窮，這是一把雙刃劍。一方面，試劑盒提供了極大的便利，尤其用于個(gè)別實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)的實(shí)驗(yàn)操作；另一方面，試劑盒可能經(jīng)常太過便利，使得使用者在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)并不理解方法背后的原理。我們提供商業(yè)化試劑盒列表，并描述它們?nèi)绾喂ぷ�，嘗試解決這一矛盾。許多人對(duì)《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（第四版）的出版發(fā)揮著重要的作用，我們對(duì)他們表示由衷的感謝。Ann Boyle幫助《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（第四版）起步，在項(xiàng)目早期也承擔(dān)了

關(guān)鍵的組織角色，后來，她的任務(wù)由其得力助手 Alex Gann接手。Sara Deibler在《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（第四版）所有時(shí)期的各個(gè)方面都做出了貢獻(xiàn)，尤其是協(xié)助撰寫、編輯和校對(duì)。

Monica Aalani對(duì)第 9章的內(nèi)容和撰寫做出了極大的貢獻(xiàn)。我們特別感謝冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社員工的熱情支持以及卓越合作和包容，尤其是JanArgentine，她負(fù)責(zé)整個(gè)項(xiàng)目并把關(guān)財(cái)務(wù)。感謝我們的項(xiàng)目經(jīng)理 Maryliz Dickerson、項(xiàng)目編輯Kaaren Janssen、Judy Cuddihy和Michael Zierler，制作經(jīng)理Denise Weiss，制作編輯KathleenBubbeo，當(dāng)然還有冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社的幕后智囊 John Inglis。Michael R. Green

Joseph Sambrook

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