鑒于現(xiàn)代生命科學(xué)理論與技術(shù)的飛速發(fā)展,本書對(duì)第1版(華東理工大學(xué)出版社,2005年)內(nèi)容進(jìn)行了大幅度更新;并在第3版(高等教育出版社,2015年)的基礎(chǔ)上增設(shè)了“原核細(xì)菌基因工程”“真菌基因工程”“昆蟲基因工程”等章節(jié),因而適合用作生命科學(xué)類各專業(yè)本科生和研究生“基因工程”課程的教材,同時(shí)也可作為有關(guān)研究人員的參考書。
早在1984年,華東理工大學(xué)就為其生物化學(xué)和生化工程專業(yè)的本科生開設(shè)了“基因工程概論”的專業(yè)選修課。書中所涉及的基本理論、實(shí)驗(yàn)技術(shù)和應(yīng)用策略主要基于百余篇相關(guān)綜述以及著者三十多年來不斷充實(shí)的教學(xué)講義和心得,編撰側(cè)重基因工程應(yīng)用的設(shè)計(jì)思路,并力求以圖解的方式加深讀者對(duì)本書內(nèi)容的理解和印象。因而適合用作生命科學(xué)類各專業(yè)本科生和研究生“基因工程”課程的教材,同時(shí)也可作為有關(guān)研究人員的參考書。
第4版前言
誕生于20世紀(jì)70年代初的重組DNA技術(shù)是一種獲取、整理、破譯、編輯和表達(dá)生物遺傳信息的大型綜合操作平臺(tái),它以細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的基本理論體系為基石,在基因分離克隆、基因編碼產(chǎn)物產(chǎn)業(yè)化、生物遺傳性狀改良、基因功能及其表達(dá)調(diào)控機(jī)制詮釋等方面日益顯示出極高的實(shí)用價(jià)值;而作為重組DNA技術(shù)產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用的基因工程正在驅(qū)動(dòng)著人類社會(huì)的生活方式發(fā)生重大變革。
早在1984年,華東理工大學(xué)就為其生物化學(xué)和生化工程專業(yè)的本科生開設(shè)了“基因工程概論”的專業(yè)選修課。本書所涉及的基本理論、實(shí)驗(yàn)技術(shù)和應(yīng)用策略主要基于百余篇相關(guān)綜述以及編者三十多年來不斷充實(shí)的教學(xué)講義和心得,編撰側(cè)重基因工程應(yīng)用的設(shè)計(jì)思路,并力求以圖解的方式加深讀者對(duì)本書內(nèi)容的理解和印象。鑒于現(xiàn)代生命科學(xué)理論與技術(shù)的飛速發(fā)展,本書對(duì)第一版(華東理工大學(xué)出版社,2005年)內(nèi)容進(jìn)行了大幅度更新;并在第三版(高等教育出版社,2015年)的基礎(chǔ)上增設(shè)了“原核細(xì)菌基因工程”“真菌基因工程”“昆蟲基因工程”等章節(jié),因而適于作為生命科學(xué)類各專業(yè)本科生和研究生的課程教材,同時(shí)也可作為有關(guān)人員的參考書。
真誠歡迎專家和讀者對(duì)本書提出寶貴意見。編者
2016年4月于黃浦江畔
第1章概述1
1.1基因工程的基本概念1
1.1.1基因工程的基本定義1
1.1.2基因工程的基本過程1
1.1.3基因工程的基本原理2
1.1.4基因工程的基本體系2
1.2基因工程的發(fā)展歷史4
1.2.1基因工程的誕生4
1.2.2基因工程的成熟5
1.2.3基因工程的騰飛5
1.3基因工程的研究意義6
1.3.1第四次工業(yè)大革命6
1.3.2第二次農(nóng)業(yè)大革命7
1.3.3第四次醫(yī)學(xué)大革命7
第2章DNA重組克隆單元操作9
2.1DNA重組的載體9
2.1.1質(zhì)粒載體9
2.1.2病毒或噬菌體載體13
2.1.3噬菌體質(zhì)粒雜合載體19
2.1.4人造染色體載體21
2.2DNA的體外重組(切與接)21
2.2.1限制性核酸內(nèi)切酶22
2.2.2T4DNA連接酶26
2.2.3其他用于DNA重組的工具酶26
2.2.4DNA切接反應(yīng)的影響因素30
2.2.5DNA分子重組的方法34
2.3重組DNA分子的轉(zhuǎn)化與擴(kuò)增(轉(zhuǎn)與增)41
2.3.1重組DNA轉(zhuǎn)化的基本概念42
2.3.2細(xì)菌受體細(xì)胞的選擇43
2.3.3細(xì)菌受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化方法44
2.3.4轉(zhuǎn)化率及其影響因素47
2.3.5轉(zhuǎn)化細(xì)胞的擴(kuò)增48
2.4轉(zhuǎn)化子的篩選與重組子的鑒定(檢)48
2.4.1基于載體遺傳標(biāo)記的篩選與鑒定49
2.4.2基于克隆片段序列的篩選與鑒定51
2.4.3基于外源基因表達(dá)產(chǎn)物的篩選與鑒定66
2.5目的基因的克隆68
2.5.1鳥槍法68
2.5.2cDNA法71
2.5.3PCR擴(kuò)增法79
2.5.4化學(xué)合成法85
2.5.5基因文庫的構(gòu)建88
第3章大腸桿菌基因工程93
3.1外源基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)原理93
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