本書是大學本科制藥分離工程配套實驗教材。根據(jù)制藥分離工程課程實踐的需要,選擇較成熟的、在基本操作和過程類型等方面具有代表性的實驗。如萃取分離、沉淀分離、吸附及色譜分離純化,生物藥物和天然藥物的提取、分離純化等實驗等。通過本教材可著重鍛煉學生在制藥上游技術(shù),即制藥分離技術(shù)中的各種實踐技能和動手能力。同時,本教材還可以作為教師、制藥及相關(guān)企業(yè)員工的輔助資料使用。
前言
制藥分離工程實驗是制藥工程專業(yè)重要的實驗課程,也是制藥分離工程理論課程的配套實驗。制藥分離工程可視為制藥的下游加工過程,無論是化學合成、生物技術(shù)制備或中藥提取而獲得的上游原料藥,都必須通過提取、濃縮、除雜和純化等分離步驟才能實現(xiàn)藥物的產(chǎn)品化。因此,制藥分離工程是制藥技術(shù)轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力不可缺少的重要環(huán)節(jié)。
通過制藥分離工程實驗,可將課程理論與實踐訓練有機地結(jié)合起來,使學生能充分體會和理解分離工程在制藥過程中的重要性和意義,理解藥品質(zhì)量及其控制與制藥分離技術(shù)之間的關(guān)系,同時掌握制藥分離工程的技術(shù)方法、操作技能等知識環(huán)節(jié)。
本教材根據(jù)教學大綱的要求,結(jié)合我校制藥工程專業(yè)多年的教學實踐,并吸取其他兄弟院校相關(guān)實驗教學經(jīng)驗編寫而成。本書共分兩部分、五章,其中基礎(chǔ)理論部分包括兩章,實驗部分按照藥物的來源又分為化學制藥分離工程實驗、生物制藥分離工程實驗和中藥制藥分離工程實驗三章,共收錄實驗47個。書中編寫的實驗比實際教學課時能完成的實驗多,因各專業(yè)方向、各校的情況不同,這樣做的目的是使本書可選用范圍更寬,選用本書的院校可根據(jù)實際情況選擇相應的實驗進行教學。
本書編者由多年從事制藥工程理論教學和實驗教學的老師組成。由李再新任主編,其他編者包括趙海、羅容珍、張智、江海霞等。各位編者在編寫和修訂過程中付出了辛勤的勞動,在此一并表示感謝!本書的出版得到了四川理工學院教材出版項目的資助,在此表示衷心的感謝!
由于編寫時間、編者水平等有限,書中存在的錯誤和疏漏之處懇請專家和讀者批評指正。
編者
2015年10月
李再新,四川理工學院教師,工學博士,教授,制藥工程專業(yè)碩士生導師,制藥工程系副主任。主要承擔課程制藥工藝學、生物化學、分離工程等。主要研究方向制藥工程、微生物代謝與新藥篩選。主持省廳級科研課題11項,參與3項國家科研重大課題,發(fā)表論文36篇,申請國家發(fā)明專利6項,授權(quán)專利4項。
第一部分 基礎(chǔ)理論
第一章 緒 論 3
第二章 制藥分離工程實驗基本知識 5
第一節(jié) 制藥分離過程的基本原理 5
第二節(jié) 實驗室安全防護 11
第二部分 實驗部分
第三章 化學制藥分離工程實驗 15
實驗1 從茶葉中提取咖啡堿 15
實驗2 苯甲酸的萃取分離 17
實驗3 超臨界二氧化碳流體萃取植物油 19
實驗4 雙水相萃取技術(shù)—雙水相系統(tǒng)制備 22
實驗5 重結(jié)晶及過濾 24
實驗6 簡單蒸餾及分餾 27
實驗7 膜分離 31
實驗8 吸附實驗 37
實驗9 薄層色譜法分離復方新諾明中SMZ及TMP 40
實驗10 葡萄糖酸鋅的制備 42
實驗11 快速柱色譜 44
實驗12 離子交換及交換容量的測定 46
實驗13 丙戊酸鈉的合成及產(chǎn)物的分離(設(shè)計性實驗) 48
實驗14 阿司匹林合成過程中間體及產(chǎn)物的分離(設(shè)計性實驗) 49
第四章 生物制藥分離工程實驗 50
實驗1 豬胰蛋白酶的純化及其活性測定 50
實驗2 胰彈性蛋白酶的制備及活力測定 54
實驗3 殼聚糖-戊二醛交聯(lián)吸附法固定胰蛋白酶 57
實驗4 親和層析法制取胰蛋白酶抑制劑 61
實驗5 SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳和蛋白質(zhì)印跡檢測 65
實驗6 堿裂解法制備質(zhì)粒DNA 69
實驗7 基因工程菌感受態(tài)細胞的制備、DNA片段連接及轉(zhuǎn)化 75
實驗8 重組克隆的篩選、PCR鑒定與瓊脂糖凝膠電泳檢測 78
實驗9 重組蛋白類藥物的表達、制備及分析(設(shè)計性實驗) 81
實驗10 水稀釋-鹽析法制備雞免疫球蛋白(卵黃抗體,IgY) 86
實驗11 酸醇提取法制備豬胰島素 89
實驗12 超濾法制備胸腺肽 92
實驗13 細胞培養(yǎng)技術(shù)實驗 94
實驗14 氯化血紅素的制備及含量測定 97
實驗15 維生素B2(核黃素)的制備 99
實驗16 銀耳多糖的制備及分析 101
第五章 中藥制藥分離工程實驗 104
實驗1 浸漬法提取鹽酸小檗堿 104
實驗2 連續(xù)回流法提取白芷中的香豆素 106
實驗3 pH?梯度萃取分離大黃中蒽醌類成分 108
實驗4 水蒸氣蒸餾法提取八角茴香油 111
實驗5 大黃中蒽醌類化合物的超臨界CO2萃取及鑒別 114
實驗6 有機溶劑沉淀法制備大豆脲酶 117
實驗7 離子交換法分離純化苦參生物堿 119
實驗8 薄層色譜法分離辣椒紅色素 121
實驗9 大孔樹脂柱色譜分離純化白頭翁皂苷 124
實驗10 柱層析法對色素的提取與分離 126
實驗11 大棗中多糖的提取分離 128
實驗12 槐花米中蕓香苷的提取及槲皮素的制備與檢識 130
實驗13 薯蕷皂苷元的提取精制 133
實驗14 果膠的提取分離及精制 136
實驗15 黃連中小檗堿的提取和鑒定(設(shè)計性實驗) 138
實驗16 茶葉中茶多酚的提取(設(shè)計性實驗) 140
實驗17 不同方法分離純化山楂提取物中總黃酮(設(shè)計性實驗) 141
附 錄 143
附錄A 化學試劑的種類和分級 143
附錄B 常用有機溶劑的物理常數(shù) 144
附錄C 常用緩沖溶液的配制 146
參考文獻 151