目錄
前言
常用生物化學(xué)實驗詞匯及縮寫
第一部分 生物化學(xué)樣品制備技術(shù) 1
第二部分 沉淀技術(shù) 8
第三部分 膜分離技術(shù) 13
第四部分 色譜技術(shù) 22
實驗一 分子篩層析 28
血清蛋白質(zhì)鹽析及分子篩層析脫鹽 32
實驗二 離子交換層析 34
離子交換層析純化血清蛋白 36
實驗三 親和層析 39
親和色譜分離GST融合蛋白 41
第五部分 分光光度技術(shù) 44
實驗四 蛋白質(zhì)的定量檢測 49
蛋白質(zhì)的直接定量(UV)檢測 49
比色法蛋白質(zhì)定量 50
實驗五 氨基酸的定量測定 54
實驗六 色氨酸的定量測定 56
實驗七 超氧化物歧化酶活力測定(鄰苯三酚自氧化法) 59
實驗八 核酸含量的測定 61
紫外吸收法測定核酸含量 61
DNA含量測定——改良二苯胺法 62
RNA的測定——苔黑酚法 63
實驗九 血液葡萄糖的測定 65
鄰甲苯胺法 65
葡萄糖氧化酶法 67
實驗十 血清鈣的測定 70
鄰甲酚酞絡(luò)合酮法 70
甲基麝香草酚藍(lán)比色法 71
實驗十一 血清無機磷的測定 73
硫酸亞鐵磷鉬藍(lán)比色法 73
紫外光光度法 74
米吐爾直接顯色法 75
實驗十二 血清甘油三酯(TG)的測定 77
實驗十三 血清膽固醇的測定 78
實驗十四 血液尿酸的測定 80
實驗十五 抗壞血酸(維生素C)的測定 82
實驗十六 維生素 A的測定 84
第六部分 離心技術(shù) 86
實驗十七 動物肝臟DNA的提取和鑒定 90
實驗十八 質(zhì)粒DNA的制備 93
實驗十九 兔肝RNA的制備及其含量測定 96
實驗二十 差速離心法分離大鼠肝臟細(xì)胞核和線粒體 101
實驗二十一 家兔血清、血漿和無蛋白血濾液的制備 103
血清的分離與制備 103
血漿的分離與制備 104
無蛋白血濾液的制備 104
第七部分 電泳技術(shù) 107
實驗二十二 不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳分離血清蛋白質(zhì) 114
實驗二十三 SDS-不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)分子質(zhì)量 121
實驗二十四 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳測定蛋白質(zhì)的等電點 126
實驗二十五 聚丙烯酰胺凝膠濃度梯度電泳測定蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量 136
實驗二十六 瓊脂糖凝膠電泳分離血清乳酸脫氫酶同工酶 140
實驗二十七 醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì) 144
實驗二十八 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA 147
實驗二十九 蛋白質(zhì)雙向電泳 150
第八部分 印跡技術(shù) 158
實驗三十 蛋白質(zhì)印跡 164
實驗三十一 核酸印跡 171
第九部分 酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù) 177
實驗三十二 酶聯(lián)免疫法測定兔血清IgG 185
第十部分 放射免疫測定技術(shù) 188
實驗三十三 放免法測定血清cAMP 199
第十一部分 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù) 203
實驗三十四 DNS-Cl法測定蛋白質(zhì)的N端氨基酸 204
實驗三十五 蛋白質(zhì)C端氨基酸的測定及順序分析(羧肽酶法) 208
實驗三十六 蛋白質(zhì)及多肽順序分析(DABITC/PITC雙偶合法) 211
附錄 215
一、常用緩沖溶液的配制 215
二、易變質(zhì)及需要特殊方法保存的試劑 226
三、離心機和轉(zhuǎn)數(shù)的換算 227
四、硫酸銨飽和度常用表 228
五、某些物質(zhì)燃燒時應(yīng)用的滅火劑 229
六、幾種常用實驗動物的采血量和采血方法 230
七、干燥器內(nèi)常用的干燥劑 230
八、測定蛋白質(zhì)濃度的方法 231
九、SDS-PAGE中通常選用的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量 231
主要參考文獻(xiàn) 232