第一章  發(fā)酵微生物實(shí)驗(yàn)基本操作

  第一節(jié)  菌種保藏

  一、菌種保藏意義

  二、操作方法

  三、菌種保藏管理

  四、國內(nèi)外主要菌種保藏中心介紹

  第二節(jié)  接種技術(shù)與種子擴(kuò)大培養(yǎng)

  一、接種技術(shù)

  二、種子擴(kuò)大培養(yǎng)

  三、種子擴(kuò)大培養(yǎng)的實(shí)例

  第三節(jié)  實(shí)驗(yàn)室無菌操作技術(shù)

  一、概述

  二、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法及操作

第二章  工業(yè)微生物核酸分離純化

  第一節(jié)  工業(yè)微生物核酸分離純化的基本原理

  一、細(xì)胞裂解

  二、大腸桿菌基因組DNA的分離純化

  三、大腸桿菌質(zhì)粒DNA的分離純化

  四、釀酒酵母基因組DNA的分離純化

  五、釀酒酵母質(zhì)粒DNA的分離純化

  六、釀酒酵母RNA的分離純化

  七、黑曲霉DNA的分離純化

  八、黑曲霉RNA的分離純化

  第二節(jié)  引物設(shè)計(jì)與PCR實(shí)驗(yàn)操作

  一、引物設(shè)計(jì)原理

  二、引物設(shè)計(jì)的常用軟件（Primer Premier）介紹

  三、從大腸桿菌基因組DNA中擴(kuò)增得到己糖激酶基因

  第三節(jié)  感受態(tài)制備與轉(zhuǎn)化

  一、大腸桿菌氯化鈣法感受態(tài)制備與轉(zhuǎn)化

  二、大腸桿菌高效化學(xué)法感受態(tài)制備與轉(zhuǎn)化（TSS法）

  三、大腸桿菌電轉(zhuǎn)化法感受態(tài)制備與轉(zhuǎn)化

  四、枯草桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備與轉(zhuǎn)化

  五、化學(xué)轉(zhuǎn)化釀酒酵母感受態(tài)的制備

  六、電轉(zhuǎn)化釀酒酵母感受態(tài)的制備

  第四節(jié)  載體的構(gòu)建與驗(yàn)證

  一、TA克隆

  二、質(zhì)粒載體的酶切與純化

  三、PCR片段的酶切與回收

  四、載體與PCR片段的連接與轉(zhuǎn)化

  五、轉(zhuǎn)化子的檢測(cè)

  第五節(jié)  基于同源重組的基因敲除技術(shù)

  一、基因敲除技術(shù)的原理

  二、敲除大腸桿菌中的蛋白酶基因lon

  三、敲除釀酒酵母中的精氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)基因CAN

  四、桿菌中實(shí)現(xiàn)基因多次重復(fù)敲除

  五、釀酒酵母中實(shí)現(xiàn)基因多次重復(fù)敲除

  第三章  發(fā)酵過程基本操作

  第一節(jié)  生物反應(yīng)器及其分類

  第二節(jié)  分批發(fā)酵技術(shù)

  實(shí)驗(yàn)3.1  搖瓶與分批發(fā)酵

  實(shí)驗(yàn)3.2  10L發(fā)酵罐與分批發(fā)酵

  實(shí)驗(yàn)3.3  L-乳酸5L發(fā)酵罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

  第三節(jié)  補(bǔ)料分批培養(yǎng)操作技術(shù)

  一、補(bǔ)料分批培養(yǎng)的流加方式及控制理論

  二、補(bǔ)料的內(nèi)容、原則及措施

  實(shí)驗(yàn)3.4  酵母流加培養(yǎng)控制實(shí)驗(yàn)

  實(shí)驗(yàn)3.5  耐高滲透壓假絲酵母分批補(bǔ)料工藝發(fā)酵生產(chǎn)甘油

  第四節(jié)  連續(xù)培養(yǎng)操作技術(shù)

  實(shí)驗(yàn)3.6  面包酵母的連續(xù)培養(yǎng)

  實(shí)驗(yàn)3.7  大腸桿菌的連續(xù)培養(yǎng)

  實(shí)驗(yàn)3.8  雜交瘤細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)

第四章  發(fā)酵產(chǎn)品提取精制基本操作

  第一節(jié)  發(fā)酵液預(yù)處理技術(shù)

  一、固態(tài)物料預(yù)處理

  二、液態(tài)物料預(yù)處理

  三、預(yù)處理絮凝步驟優(yōu)化實(shí)例

  第二節(jié)  固液分離技術(shù)

  一、過濾分離

  實(shí)驗(yàn)4.1  實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)鼓真空過濾機(jī)簡易使用方法

  二、離心沉降分離

  三、超離心技術(shù)

  實(shí)驗(yàn)4.2  實(shí)驗(yàn)室臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)使用方法

  第三節(jié)  細(xì)胞破碎技術(shù)

  一、細(xì)胞壁的組成與結(jié)構(gòu)

  二、常用破碎方法和操作步驟

  三、破碎率的測(cè)定

  實(shí)驗(yàn)4.3  酵母細(xì)胞的超聲波破碎及破碎率的測(cè)定

  實(shí)驗(yàn)4.4  酶法破碎裂殖壺菌提取胞內(nèi)油脂

  第四節(jié)  常規(guī)提取技術(shù)

  一、萃取

  二、吸附

  實(shí)驗(yàn)4.5  用萃取法從天然植物茶葉中提取茶多酚

  實(shí)驗(yàn)4.6  雙水相萃取分離提取豬心中的細(xì)胞色素c

  實(shí)驗(yàn)4.7  CTAB反微團(tuán)萃取大豆蛋白

  實(shí)驗(yàn)4.8  超臨界CO2萃取茶葉中咖啡堿

  實(shí)驗(yàn)4.9  大孔樹脂吸附柱層析分離葡萄紅色素

  第五節(jié)  產(chǎn)品精制技術(shù)

  一、發(fā)酵產(chǎn)物的精制

  二、發(fā)酵產(chǎn)物的成品加工

  實(shí)驗(yàn)4.10  鏈霉素的分離純化

  實(shí)驗(yàn)4.11  離子交換法制備γ?舶被?丁酸

  實(shí)驗(yàn)4.12  發(fā)酵法制備維生素B

第五章  典型發(fā)酵產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)

  實(shí)驗(yàn)5.1  堿性果膠酶的發(fā)酵生產(chǎn)

  實(shí)驗(yàn)5.2  異亮氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)

  實(shí)驗(yàn)5.3  檸檬酸的發(fā)酵生產(chǎn)

  實(shí)驗(yàn)5.4  透明質(zhì)酸的發(fā)酵生產(chǎn)

  實(shí)驗(yàn)5.5  啤酒的發(fā)酵生產(chǎn)

  實(shí)驗(yàn)5.6  氨基葡萄糖重組大腸桿菌的構(gòu)建及條件優(yōu)化

參考文獻(xiàn)