本書共收編26個(gè)實(shí)驗(yàn),廣泛選取了生化實(shí)驗(yàn)中較為成熟的糖類、脂類、氨基酸和蛋白質(zhì)類、核酸類、酶類、維生素類等實(shí)驗(yàn),包括層析法、分光光度法、電泳法、離心分離法等。因此,《高等院校生命科學(xué)類十二五規(guī)劃教材:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》可以作為一本實(shí)用的生化實(shí)驗(yàn)手冊(cè)使用。此外,在附錄中列出了我們覺(jué)得必須提供的實(shí)驗(yàn)室常識(shí)和常用數(shù)據(jù)。《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》的實(shí)驗(yàn)方法嚴(yán)謹(jǐn)可靠,可操作性強(qiáng),可適用于農(nóng)、林、漁、牧、醫(yī)等學(xué)科的本、專科生,還可作為生命科學(xué)研究生及研究人員的實(shí)驗(yàn)參考資料。
第一部分 實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)
一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
二、實(shí)驗(yàn)室基本操作
三、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告
四、實(shí)驗(yàn)誤差與數(shù)據(jù)處理
五、植物樣品的采取、處理與保存
六、緩沖溶液
第二部分 實(shí)驗(yàn)
第一章 糖
實(shí)驗(yàn)一 植物組織中糖含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二 還原糖含量的測(cè)定(3,5一二硝基水楊酸比色法)
實(shí)驗(yàn)三 糖的定量測(cè)定(蒽酮法)
第二章 氨基酸和蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)四 氨基酸的紙層析
前言
第一部分 實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)
一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
二、實(shí)驗(yàn)室基本操作
三、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告
四、實(shí)驗(yàn)誤差與數(shù)據(jù)處理
五、植物樣品的采取、處理與保存
六、緩沖溶液
第二部分 實(shí)驗(yàn)
第一章 糖
實(shí)驗(yàn)一 植物組織中糖含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二 還原糖含量的測(cè)定(3,5一二硝基水楊酸比色法)
實(shí)驗(yàn)三 糖的定量測(cè)定(蒽酮法)
第二章 氨基酸和蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)四 氨基酸的紙層析
實(shí)驗(yàn)五 脯氨酸含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)六 蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)七 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)八 蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點(diǎn)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)九 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
Ⅰ 雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
Ⅱ 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
Ⅲ 紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
Ⅳ Folin一酚試劑法(Lowry法)測(cè)定蛋白質(zhì)含量
實(shí)驗(yàn)十 細(xì)胞色素C的制備和測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十一 SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS—PAGE)測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量
實(shí)驗(yàn)十二 凝膠層析法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量
第三章 酶和維生素
實(shí)驗(yàn)十三 酶的特異性
實(shí)驗(yàn)十四 溫度、pH值對(duì)淀粉酶活性的影響
Ⅰ 溫度對(duì)淀粉酶活性的影響
Ⅱ pH值對(duì)淀粉酶活性的影響
實(shí)驗(yàn)十五 過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十六 過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十七 聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳測(cè)定過(guò)氧化物同工酶
實(shí)驗(yàn)十八 植物組織中硝酸還原酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十九 淀粉酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十 酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響——堿性磷酸酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十一 底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響——米氏常數(shù)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十二 溶菌酶的提取和系列性質(zhì)測(cè)定
Ⅰ 溶菌酶的提取
Ⅱ 蛋白質(zhì)濃度、酶活力測(cè)定一
Ⅲ 酶促動(dòng)力學(xué)(Km,測(cè)定、脲的抑制)
Ⅳ 酶的最適pH值
Ⅴ 酶的最適溫度
Ⅵ 分子篩層析測(cè)酶相對(duì)分子質(zhì)量
Ⅶ SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定酶相對(duì)分子質(zhì)量及其純度鑒定
實(shí)驗(yàn)二十三 維生素c含量的測(cè)定
第四章 核酸
實(shí)驗(yàn)二十四 DNA的制備
Ⅰ DNA的制備及其含量測(cè)定(濃鹽分離法)
Ⅱ 植物組織中核酸的提取及定量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十五 DNA的含量測(cè)定
Ⅰ 紫外吸收法測(cè)定DNA含量
Ⅱ 定磷法測(cè)定DNA含量
Ⅲ 二苯胺顯色法測(cè)定DNA含量
實(shí)驗(yàn)二十六 離子交換柱層析分離核苷酸
第三部分 附錄
一、離心技術(shù)
二、分光光度計(jì)說(shuō)明與原理
三、常用蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量(Mt)標(biāo)準(zhǔn)參照物
四、常用緩沖溶液的配制方法
五、實(shí)驗(yàn)室中常用酸堿的密度和濃度
六、硫酸銨飽和度的常用表
前言
第一部分 實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)
一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
二、實(shí)驗(yàn)室基本操作
三、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告
四、實(shí)驗(yàn)誤差與數(shù)據(jù)處理
五、植物樣品的采取、處理與保存
六、緩沖溶液
第二部分 實(shí)驗(yàn)
第一章 糖
實(shí)驗(yàn)一 植物組織中糖含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二 還原糖含量的測(cè)定(3,5一二硝基水楊酸比色法)
實(shí)驗(yàn)三 糖的定量測(cè)定(蒽酮法)
第二章 氨基酸和蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)四 氨基酸的紙層析
前言
第一部分 實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)
一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
二、實(shí)驗(yàn)室基本操作
三、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告
四、實(shí)驗(yàn)誤差與數(shù)據(jù)處理
五、植物樣品的采取、處理與保存
六、緩沖溶液
第二部分 實(shí)驗(yàn)
第一章 糖
實(shí)驗(yàn)一 植物組織中糖含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二 還原糖含量的測(cè)定(3,5一二硝基水楊酸比色法)
實(shí)驗(yàn)三 糖的定量測(cè)定(蒽酮法)
第二章 氨基酸和蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)四 氨基酸的紙層析
實(shí)驗(yàn)五 脯氨酸含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)六 蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)七 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)八 蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點(diǎn)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)九 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
Ⅰ 雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
Ⅱ 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
Ⅲ 紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
Ⅳ Folin一酚試劑法(Lowry法)測(cè)定蛋白質(zhì)含量
實(shí)驗(yàn)十 細(xì)胞色素C的制備和測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十一 SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS—PAGE)測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量
實(shí)驗(yàn)十二 凝膠層析法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量
第三章 酶和維生素
實(shí)驗(yàn)十三 酶的特異性
實(shí)驗(yàn)十四 溫度、pH值對(duì)淀粉酶活性的影響
Ⅰ 溫度對(duì)淀粉酶活性的影響
Ⅱ pH值對(duì)淀粉酶活性的影響
實(shí)驗(yàn)十五 過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十六 過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十七 聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳測(cè)定過(guò)氧化物同工酶
實(shí)驗(yàn)十八 植物組織中硝酸還原酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十九 淀粉酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十 酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響——堿性磷酸酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十一 底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響——米氏常數(shù)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十二 溶菌酶的提取和系列性質(zhì)測(cè)定
Ⅰ 溶菌酶的提取
Ⅱ 蛋白質(zhì)濃度、酶活力測(cè)定一
Ⅲ 酶促動(dòng)力學(xué)(Km,測(cè)定、脲的抑制)
Ⅳ 酶的最適pH值
Ⅴ 酶的最適溫度
Ⅵ 分子篩層析測(cè)酶相對(duì)分子質(zhì)量
Ⅶ SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定酶相對(duì)分子質(zhì)量及其純度鑒定
實(shí)驗(yàn)二十三 維生素c含量的測(cè)定
第四章 核酸
實(shí)驗(yàn)二十四 DNA的制備
Ⅰ DNA的制備及其含量測(cè)定(濃鹽分離法)
Ⅱ 植物組織中核酸的提取及定量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二十五 DNA的含量測(cè)定
Ⅰ 紫外吸收法測(cè)定DNA含量
Ⅱ 定磷法測(cè)定DNA含量
Ⅲ 二苯胺顯色法測(cè)定DNA含量
實(shí)驗(yàn)二十六 離子交換柱層析分離核苷酸
第三部分 附錄
一、離心技術(shù)
二、分光光度計(jì)說(shuō)明與原理
三、常用蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量(Mt)標(biāo)準(zhǔn)參照物
四、常用緩沖溶液的配制方法
五、實(shí)驗(yàn)室中常用酸堿的密度和濃度
六、硫酸銨飽和度的常用表