本書(shū)是全球輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域備受推崇的免疫血液學(xué)方法大全,至今已經(jīng)更新到第4版,一直在輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域廣泛使用。全書(shū)分15章,內(nèi)容包括同種和自身抗體的檢測(cè)、高頻率抗體檢測(cè)、孕婦產(chǎn)前抗體檢測(cè)、抗體特異性鑒定、酶處理紅細(xì)胞、試劑紅細(xì)胞、吸附放散技術(shù),藥物誘導(dǎo)性溶血,以及細(xì)胞分離技術(shù)和ABO疑難血型鑒定等技術(shù)。對(duì)每項(xiàng)技術(shù)都有操作程序、結(jié)果判斷、試劑配制、注意事項(xiàng)、避免假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果的技術(shù)要點(diǎn)等描述,涵蓋幾乎全部免疫血液學(xué)方法。
1900 年ABO 血型的發(fā)現(xiàn),不僅使輸血成為一種安全的醫(yī)療救治手段,而且誕生了專(zhuān)門(mén)研究人類(lèi)血型的免疫血液學(xué)這門(mén)學(xué)科。血型匹配是安全輸血的第一要素,所以說(shuō)只要有輸血就有血型問(wèn)題。ABO 和所有其他血型都是使用免疫血液學(xué)方法所鑒定,至今已經(jīng)發(fā)現(xiàn)45個(gè)血型系統(tǒng),380 多個(gè)血型抗原。雖然在20 世紀(jì)末,隨著整個(gè)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域進(jìn)入基因組時(shí)代,允許在分子水平上預(yù)測(cè)血型的基因型,但是血型的定義和鑒定,仍然以免疫血液學(xué)方法作為金標(biāo)準(zhǔn)。
2021 年,美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)將AABB 全稱(chēng)更改為Association for the Advancement of Blood& Biotherapies(血液與生物治療促進(jìn)會(huì)),以履行更廣泛的使命。2021 年末,國(guó)際亞太血型與基因組學(xué)協(xié)會(huì)開(kāi)始以叢書(shū)形式翻譯出版AABB 出版物,以便國(guó)內(nèi)讀者借鑒國(guó)際輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)。在AABB 出版委員會(huì)的全力支持下,叢書(shū)的第一部《免疫血液學(xué)分子檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)》已于2023 年初由人民衛(wèi)生出版社出版發(fā)行。本書(shū)為叢書(shū)的第二部,中文譯本書(shū)名定為《免疫血液學(xué)方法(第4 版)》,原版書(shū)名為Judds Methods in Immunohematology(4thEdition)。
十年磨一劍,Judds Methods in Immunohematology 這把劍磨了35 年。從1988 年的第1版問(wèn)世以來(lái),已經(jīng)改版4 次。1994 年出第2 版;2008 年,第3 版;2022 年為第4 版。篇幅從最初的288 頁(yè)增長(zhǎng)到500 頁(yè),然后到667 頁(yè),再到如今的719 頁(yè)(英文原版頁(yè)數(shù))。
《免疫血液學(xué)方法(第4 版)》有15 章,其內(nèi)容包括同種和自身抗體的檢測(cè)、高頻率抗體檢測(cè)、孕婦產(chǎn)前抗體檢測(cè)、抗體特異性鑒定、酶處理紅細(xì)胞、試劑紅細(xì)胞、吸附放散技術(shù),藥物誘導(dǎo)性溶血,以及細(xì)胞分離技術(shù)和ABO 疑難血型鑒定等技術(shù)。對(duì)每項(xiàng)技術(shù)都有操作程序、結(jié)果判斷、試劑配制、注意事項(xiàng)、避免假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果的技術(shù)要點(diǎn)等描述,涵蓋幾乎全部免疫血液學(xué)方法。內(nèi)容也隨著免疫血液學(xué)的發(fā)展得以更新,不僅全面系統(tǒng),而且還愈加翔實(shí)豐富。原著作者對(duì)技術(shù)背景的描述,涉及免疫診斷基本原理的方方面面,娓娓道來(lái),讓讀者在免疫血液學(xué)的世界里遨游,沉浸其中,忘記了周?chē)囊磺小?br />翻譯出版這部專(zhuān)著,對(duì)于中國(guó)輸血領(lǐng)域讀者也許有特殊的意義。中國(guó)的免疫血液學(xué)研究起步較晚,尚無(wú)免疫血液學(xué)方法學(xué)專(zhuān)著。雖然近年來(lái)中國(guó)學(xué)者在ABO 和Rh 等血型基因位點(diǎn)上檢測(cè)出數(shù)以百計(jì)的新等位基因,但是在目前被正式命名的紅細(xì)胞血型抗原中,沒(méi)有一個(gè)血型是在中國(guó)人群中發(fā)現(xiàn)的。率先發(fā)現(xiàn)中國(guó)人血型已經(jīng)成為中國(guó)學(xué)者面對(duì)的一個(gè)挑戰(zhàn),此刻出版這本國(guó)際知名的免疫血液學(xué)方法學(xué)方面的專(zhuān)著,對(duì)于發(fā)現(xiàn)中國(guó)人血型、填補(bǔ)國(guó)家空白將有所助益。
原著介紹免疫血液學(xué)方法非常全面,采用獨(dú)特的描述方式,便于讀者理解和實(shí)驗(yàn)室操作。在翻譯中,我們力求本地化,使譯文符合國(guó)人的語(yǔ)言習(xí)慣。鑒于時(shí)間倉(cāng)促,知識(shí)和能力有限,本譯稿難免有疏漏之處,還望廣大讀者批評(píng)指正。
寶劍鋒從磨礪出,譯者本著求真務(wù)實(shí)的精神,從靜謐的午夜,到東方的一縷晨曦,精雕細(xì)琢,孜孜不倦。終于在金秋十月,譯稿完成。就讓我們共同啟封,一起領(lǐng)略免疫血液學(xué)的風(fēng)采!
高宏軍 趙桐茂
2023 年10 月18 日
任江蘇省諾貝爾獎(jiǎng)得主蒂姆亨特研究院研究員,負(fù)責(zé)血型基因檢測(cè)新型試劑、芯片檢測(cè)技術(shù)和大數(shù)據(jù)分析、人類(lèi)血型數(shù)據(jù)庫(kù)的建設(shè)工作。衛(wèi)健委血型基因檢測(cè)聯(lián)合參比(江陰)實(shí)驗(yàn)室主任。亞太血型與基因組學(xué)協(xié)會(huì)(IAABG) 委員。國(guó)際輸血協(xié)會(huì)(ISBT)會(huì)員和大會(huì)代表。美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)(AABB)會(huì)員。
第1 章 常規(guī)試管法 / 1
1-A. ABO 定型和RhD 分型 / 2
1-B. 意外抗體檢測(cè):LISS 添加劑程序 / 6
1-C. LISS 抗球蛋白交叉配血 / 9
1-D. 弱D 檢測(cè)程序 / 12
1-E. 立即離心交叉配血 / 16
1-F. 血清學(xué)反應(yīng)分級(jí)和評(píng)分 / 19
1-G. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)能力測(cè)試:IAT 判讀和分級(jí)程序 / 21
第2 章 抗體檢測(cè) / 26
2-A. 白蛋白添加/ 分層檢測(cè) / 27
2-B. 白蛋白抗球蛋白檢測(cè) / 29
2-C. 酶IAT 檢測(cè) / 32
2-D. LIP IAT 檢測(cè) / 36
2-E. LISS 洗滌IAT 檢測(cè) / 40
2-F. LISS 無(wú)花果蛋白酶IAT 檢測(cè) / 43
2-G. 聚乙二醇IAT 檢測(cè) / 47
2-H. 直接凝集法檢測(cè)冷反應(yīng)性抗體 / 50
2-I. 生理鹽水IAT 檢測(cè) / 53
第3 章 酶技術(shù) / 56
3-A. 用菠蘿蛋白酶一步法檢測(cè)抗體 / 58
3-B. 用- 胰凝乳蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 60
3-C. 用無(wú)花果蛋白酶一步法檢測(cè)抗體 / 63
3-D. 用無(wú)花果蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 65
3-E. 用神經(jīng)氨酸酶處理紅細(xì)胞(T- 活化) / 68
3-F. 用木瓜蛋白酶一步法檢測(cè)抗體 / 70
3-G. 用木瓜蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 72
3-H. 用鏈霉蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 75
3-I. 用胰蛋白酶(粗酶)處理紅細(xì)胞 / 78
3-J. 用胰蛋白酶(純化酶)處理紅細(xì)胞 / 81
3-K. 用ZZAP 處理紅細(xì)胞 / 84
第4 章 放散技術(shù) / 86
4-A. 放散前洗滌 / 87
4-B. 使用氯仿放散抗體 / 89
4-C. 用氯仿/ 三氯乙烯放散抗體 / 92
4-D. 用檸檬酸放散抗體 / 95
4-E. 用冷甘氨酸放散抗體 / 98
4-F. 從基質(zhì)中放散抗體 / 101
4-G. 用醚放散抗體 / 104
4-H. 凍融法放散抗體(Lui 法) / 107
4-I. 凍融法放散抗體(Wiener 法) / 109
4-J. 熱放散抗體 / 112
4-K. 用二氯甲烷放散抗體 / 114
4-L. 用微波放散抗體 / 117
4-M. 放散來(lái)自胎盤(pán)組織的抗體 / 119
4-N. 使用超聲放散抗體 / 121
4-O. 用二甲苯/D- 檸檬烯放散抗體 / 123
4-P. 使用EDTA- 甘氨酸-HCl 從細(xì)胞上解離IgG / 126
4-Q. 使用二磷酸氯喹從細(xì)胞中解離IgG / 128
第5 章 細(xì)胞分離方法 / 131
5-A. 通過(guò)直接離心收集自身紅細(xì)胞 / 132
5-B. 使用鄰苯二甲酸酯收集自身紅細(xì)胞 / 134
5-C. 使用Percoll 程序進(jìn)行細(xì)胞分離 / 137
5-D. 在血紅蛋白S 或鐮狀細(xì)胞病中收集自身紅細(xì)胞 / 140
5-E. 用抗體分離混合細(xì)胞群體 / 142
5-F. 單個(gè)核細(xì)胞分離程序 / 145
第6 章 檢測(cè)抗體的其他血清學(xué)方法 / 147
6-A. 凝膠:制備緩沖凝膠柱 / 149
6-B. 凝膠:制備抗-IgG 柱 / 152
6-C. 凝膠:使用緩沖凝膠柱檢測(cè)抗體 / 155
6-D. 凝膠:使用抗-IgG 柱檢測(cè)抗體 / 157
6-E. 凝膠:調(diào)整預(yù)填充的中性緩沖柱,用于小鼠IgG 抗體 / 159
6-F. 凝膠:調(diào)整預(yù)填充的抗-IgG 柱,用于改良的PEG-IAT / 162
6-G. 微孔板:ABO 定型和RhD 分型程序 / 165
6-H. 微孔板:使用LISS 程序檢測(cè)抗體 / 169
6-I. 微孔板:LIP 技術(shù)程序 / 172
6-J. 毛細(xì)管:鹽水凝集程序 / 174
6-K. 毛細(xì)管:白蛋白單層程序 / 176
6-L. 毛細(xì)管:白蛋白雙層程序 / 178
6-M. 毛細(xì)管:木瓜蛋白酶一步法程序 / 180
6-N. 毛細(xì)管:無(wú)花果蛋白酶一步法程序 / 182
6-O. 毛細(xì)管:預(yù)包被紅細(xì)胞上的IAT 程序 / 184
6-P. 毛細(xì)管:預(yù)包被IAT 程序 / 186
第7 章 試劑紅細(xì)胞(非酶處理)/ 194
7-A. 制備C3b/C4b 包被的紅細(xì)胞 / 196
7-B. 用食糖制備C3b/C4b 包被的紅細(xì)胞 / 198
7-C. 制備IgM/C3b 包被的紅細(xì)胞/ 200
7-D. 制備C3b 包被的紅細(xì)胞:Fruitstone 法 / 203
7-E. 制備C4b 包被的紅細(xì)胞/ 205
7-F. 制備IgA 和IgM 包被的紅細(xì)胞 / 207
7-G. 制備IgG 包被的紅細(xì)胞 / 210
7-H. 處理紅細(xì)胞:AET 程序 / 212
7-I. 處理紅細(xì)胞:0.2M DTT 程序 / 214
7-J. 滅活S 抗原:次氯酸鈉處理 / 216
7-K. 冰凍紅細(xì)胞:甘油保存和回收 / 218
7-L. 冰凍紅細(xì)胞:液氮保存和回收 / 220
第8 章 抗體鑒定 / 223
8-A. 單個(gè)或多個(gè)抗體的鑒定 / 224
8-B. 管理有冷凝集素的樣品和患者 / 231
8-C. 譜細(xì)胞結(jié)果評(píng)估:排除 / 234
8-D. 精選細(xì)胞過(guò)程 / 236
8-E. 選擇抗原陰性的血液輸血 / 238
8-F. 確定概率水平 / 241
8-G. 酸化血清 / 244
8-H. 使用吸附放散聯(lián)合程序 / 245
8-I. 檢測(cè)胰蛋白酶抗性NVG 受體 / 248
8-J. 在抑制程序中使用可溶性血型物質(zhì) / 250
8-K. 用DIDS 抑制緡錢(qián)狀凝集 / 252
8-L. 鑒定抗-Nform / 254
8-M. 通過(guò)兩階段EDTA-IAT 檢測(cè)補(bǔ)體固定抗體 / 256
第9 章 高頻率抗原的抗體 / 260
9-A. 用混合血漿或血清抑制抗體 / 266
9-B. 鑒定抗-Ch/Rg:快速程序 / 268
9-C. 識(shí)別HLA 決定簇的抗體 / 270
9-D. 使用同種異體C4 吸附抗-Ch/Rg / 272
9-E. 使用2mol/L 尿素篩選/ 確認(rèn)Jk(ab)紅細(xì)胞 / 275
第10 章 產(chǎn)前和圍產(chǎn)期檢測(cè) / 277
10-A. 妊娠期檢查 / 282
10-B. Rh 免疫球蛋白給藥 / 284
10-C. 分娩時(shí)胎兒和新生兒溶血病的評(píng)估 / 287
10-D. 產(chǎn)前抗體滴定程序 / 289
10-E. 通過(guò)吸附放散試驗(yàn)區(qū)分抗-G 和抗-C 抗-D / 292
10-F. 在母親RhD 陰性樣品中篩查胎兒RhD 陽(yáng)性紅細(xì)胞 / 295
10-G. 用酶聯(lián)抗球蛋白試驗(yàn)定量抗-D / 298
10-H. 大量胎母輸血的篩查(改良的Kleihauer-Betke 酸放散試驗(yàn)) / 302
10-I. 用酶聯(lián)抗球蛋白試驗(yàn)量化胎母輸血 / 305
10-J. 分光光度法分析羊水 / 309
10-K. 處理被華通膠污染的臍帶血 / 312
第11 章 研究含有自身抗體的樣品 / 314
11-A. 免疫性溶血和/ 或DAT 陽(yáng)性病例的調(diào)查 / 318
11-B. 抗球蛋白試驗(yàn):抗-IgG 和抗-C3 直接試驗(yàn)(試管法) / 322
11-C. 抗球蛋白試驗(yàn):抗-IgM 和抗-IgA 直接試驗(yàn)(試管法) / 325
11-D. 抗球蛋白試驗(yàn):抗-IgM 和抗-IgA 直接檢測(cè)(柱凝集試驗(yàn)) / 327
11-E. 抗球蛋白試驗(yàn):使用聚凝胺的直接試驗(yàn) / 329
11-F. 抗球蛋白試驗(yàn):酶聯(lián)DAT / 332
11-G. 分散自身凝集 / 335
11-H. 檢測(cè)冷反應(yīng)性自身抗體的熱振幅 / 337
11-I. 冷反應(yīng)性自身抗體滴定法診斷試驗(yàn)(過(guò)夜法)/ 339
11-J. 通過(guò)滴定法檢測(cè)冷反應(yīng)性自身抗體 / 341
11-K. 通過(guò)滴定確定冷反應(yīng)性自身抗體的特異性 / 343
11-L. 用自身紅細(xì)胞吸附冷反應(yīng)性自身抗體 / 345
11-M. 用異源(兔)紅細(xì)胞吸附冷自身抗體 / 347
11-N. 用Donath-Landsteiner 試驗(yàn)檢測(cè)PCH / 349
11-O. 通過(guò)滴定法測(cè)定溫反應(yīng)性自身抗體的RH 相關(guān)特異性 / 352
11-P. 用酶處理的自身紅細(xì)胞吸附溫反應(yīng)性自身抗體 / 354
11-Q. 用ZZAP 處理的自身紅細(xì)胞吸附自身抗體 / 357
11-R. 用ZZAP 處理的自身紅細(xì)胞吸附自身抗體(微量法) / 360
11-S. 用同種異體紅細(xì)胞吸附溫反應(yīng)性自身抗體 / 363
11-T. 評(píng)估同種異體吸附血清結(jié)果:畫(huà)線排除 / 366
11-U. 預(yù)熱的間接抗球蛋白試驗(yàn) / 370
第12 章 研究藥物誘導(dǎo)溶血 / 373
12-A. 將藥物溶解在溶液中 / 381
12-B. 準(zhǔn)備尿液以檢測(cè)代謝物依賴(lài)性抗體 / 385
12-C. 檢測(cè)與藥物處理紅細(xì)胞反應(yīng)的藥物依賴(lài)性抗體 / 387
12-D. 檢測(cè)半合成青霉素的抗體 / 391
12-E. 檢測(cè)頭孢噻吩依賴(lài)性抗體 / 394
12-F. 檢測(cè)存在藥物時(shí)發(fā)生反應(yīng)的藥物依賴(lài)性抗體 / 396
12-G. 檢測(cè)存在藥物時(shí)發(fā)生反應(yīng)的代謝物依賴(lài)性抗體 / 400
第13 章 研究ABO 定型問(wèn)題 / 404
13-A. 混合視野反應(yīng)研究 / 412
13-B. ABO 定型反應(yīng)不一致的研究 / 414
13-C. 評(píng)估ABO 定型不一致 / 416
13-D. 使用蛋白酶處理紅細(xì)胞進(jìn)行ABO 定型的解析 / 418
13-E. 通過(guò)吸附和熱放散確認(rèn)弱A 或弱B 抗原表達(dá) / 420
13-F. 通過(guò)吸附和凍融放散法(Lui 法)確認(rèn)弱A 或弱B 抗原表達(dá) / 423
13-G. 檢測(cè)次要紅細(xì)胞群和ABO 混合物 / 426
13-H. 確定ABH 分泌型狀態(tài) / 428
13-I. 測(cè)定H 抗原的表達(dá) / 430
13-J. 分離A∶O 混合物 / 432
13-K. 通過(guò)O 型紅細(xì)胞的轉(zhuǎn)化檢測(cè)A 和B 轉(zhuǎn)移酶 / 434
13-L. 預(yù)熱的ABO 反定型 / 436
13-M. 選擇含有高效價(jià)抗-A 和/ 或抗-B 的血漿 / 438
第14 章 研究紅細(xì)胞多凝集 / 440
14-A. 用AB 血清和臍帶血血清檢測(cè)多凝集 / 442
14-B. 制備外源凝集素粗提物 / 444
14-C. 制備鼠尾草凝集素粗提物 / 447
14-D. 制備純化的外源凝集素溶液 / 450
14-E. 用聚凝胺聚集紅細(xì)胞 / 452
14-F. 乙酰化紅細(xì)胞 / 454
14-G. 抑制獲得性B 的反應(yīng)性 / 457
14-H. 用酸化抗-B 檢測(cè)紅細(xì)胞 / 459
第15 章 其他方法 / 461
15-A. 檢測(cè)PNH:酸溶血試驗(yàn)(哈姆試驗(yàn)) / 462
15-B. 檢測(cè)HEMPAS:改良的酸溶血試驗(yàn)(哈姆試驗(yàn)) / 465
15-C. 將IgG 抗體轉(zhuǎn)化為直接凝集素 / 467
15-D. 使用51Cr 標(biāo)記的紅細(xì)胞評(píng)估紅細(xì)胞存活率 / 469
15-E. 使用0.01M DTT 區(qū)分IgM 和IgG 抗體 / 472
15-F. 使用2-ME 區(qū)分IgM 和IgG 抗體 / 475
15-G. 使用酶聯(lián)抗球蛋白試驗(yàn)做劑量研究 / 478
15-H. 使用單核細(xì)胞單層試驗(yàn)預(yù)測(cè)臨床意義 / 481
15-I. 篩查PNH:蔗糖溶血試驗(yàn) / 484
15-J. 將血漿轉(zhuǎn)化為血清 / 486
15-K. 從外周血中分離基因組DNA / 488
15-L. 使用熱啟動(dòng)Taq PCR 擴(kuò)增基因組DNA / 490
15-M. 制備瓊脂糖凝膠和電泳分析PCR 產(chǎn)物 / 493
附錄/ 495
附錄A. 試劑制備和儲(chǔ)存/ 496
附錄B. 試劑制備存檔表 / 515
國(guó)際亞太血型與基因組學(xué)協(xié)會(huì)簡(jiǎn)介/ 516
縮寫(xiě)詞/ 517
索引/ 521
讀者反饋/ 534
圖8-A-1. 調(diào)查意外抗體時(shí)的注意事項(xiàng) / 226
圖8-A-2. 調(diào)查自身對(duì)照陽(yáng)性血液樣品時(shí)的注意事項(xiàng) / 227
圖8-C-1. 在每個(gè)單獨(dú)的譜細(xì)胞上劃掉的抗原 / 235
圖8-C-2. 在抗原譜表的頂部劃掉的抗原 / 235
圖9-1. 高頻率抗原抗體的研究(敏感性見(jiàn)表9-2) / 265
圖10-B-1. Rh 免疫球蛋白給藥流程圖 / 286
圖13-1. 調(diào)查ABO 定型不一致流程圖 / 411
表1-D-1. 抗-D 直接和間接試驗(yàn)的解釋建議 / 15
表1-F-1. 血清學(xué)反應(yīng)分級(jí) / 20
表8-A-1. 某些紅細(xì)胞抗原同種抗體的血清學(xué)特征 / 228
表8-E-1. 選擇抗原陰性的血液輸血:常見(jiàn)抗體的一些實(shí)例 / 240
表8-F-1. 概率值 / 243
表8-J-1. 血型物質(zhì)的抗體抑制作用/ 251
表9-1. 木瓜蛋白酶/ 無(wú)花果蛋白酶和硫醇試劑對(duì)高頻率紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)的影響 / 262
表9-2. 酶和化學(xué)品對(duì)抗體與高頻率紅細(xì)胞抗原反應(yīng)的影響 / 263
表11-1. 冷反應(yīng)性自身抗體的特異性:與未處理的O、I 紅細(xì)胞的反應(yīng)比較 / 317
表12-1. 報(bào)告引起免疫性溶血和DAT 陽(yáng)性的藥物 / 376
表13-1. ABO 定型不一致的原因 / 409
表13-2. 一些異;虿粚こ5腁BO 定型結(jié)果 / 410
表14-1. 多凝集性紅細(xì)胞與外源凝集素的反應(yīng) / 441
表15-A-1. 酸溶血試驗(yàn)程序 / 464
表15-E-1. 用2-ME 或DTT 研究確定免疫球蛋白抗體類(lèi)別的解讀 / 474
附錄6-1. Sephadex 凝膠珠:背景信息 / 189
附錄6-2. 凝膠柱中的凝集反應(yīng) / 190
圖、表和章附錄
附錄6-3. 微孔板試驗(yàn):一般注意事項(xiàng) / 191
附錄6-4. 毛細(xì)管方法:一般注意事項(xiàng) / 193
附錄8-1. 評(píng)估抗體鑒定譜細(xì)胞初始結(jié)果 / 258
附錄8-2. 鑒定/ 確認(rèn)抗體特異性的方法 / 259