目錄
第一章基因載體概論 1
第一節(jié)基因工程與基因載體 1
第二節(jié)基因載體分類 2
一、按照功能分類 2
二、按照來源分類 4
三、按照是否整合分類 5
四、按照目的分類 6
第三節(jié)基因載體結(jié)構(gòu) 6
一、質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu) 6
二、噬菌體載體結(jié)構(gòu) 11
三、噬菌粒載體結(jié)構(gòu) 13
四、黏粒載體結(jié)構(gòu) 15
五、人工染色體載體結(jié)構(gòu) 15
六、病毒載體結(jié)構(gòu) 16
第四節(jié)基因表達(dá)系統(tǒng) 17
總結(jié)與展望 17
參考文獻(xiàn) 18
第二章原核表達(dá)載體 20
第一節(jié)原核表達(dá)系統(tǒng)概述 20
一、原核表達(dá)系統(tǒng)歷史 20
二、原核表達(dá)系統(tǒng)組成 21
三、原核表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 22
第二節(jié)原核表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 23
一、原核表達(dá)載體分類 23
二、原核表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 24
三、常用原核表達(dá)載體 31
第三節(jié)原核表達(dá)載體優(yōu)化 35
一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 35
二、其他優(yōu)化策略 37
總結(jié)與展望 40
參考文獻(xiàn) 40
第三章酵母表達(dá)載體 43
第一節(jié)酵母表達(dá)系統(tǒng)概述 43
一、酵母表達(dá)系統(tǒng)歷史 43
二、酵母表達(dá)系統(tǒng)組成 44
三、酵母表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 49
第二節(jié)酵母表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 52
一、酵母表達(dá)載體分類 52
二、酵母表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 57
三、常用酵母表達(dá)載體 65
第三節(jié)酵母表達(dá)載體優(yōu)化 68
一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 68
二、其他優(yōu)化策略 71
總結(jié)與展望 73
參考文獻(xiàn) 73
第四章昆蟲表達(dá)載體 79
第一節(jié)昆蟲表達(dá)系統(tǒng)概述 79
一、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)歷史 79
二、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)組成 80
三、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 83
第二節(jié)昆蟲表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 87
一、昆蟲表達(dá)載體分類 87
二、昆蟲表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 91
三、常用昆蟲表達(dá)載體 92
第三節(jié)昆蟲表達(dá)載體優(yōu)化 94
一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 94
二、其他優(yōu)化策略 106
總結(jié)與展望 107
參考文獻(xiàn) 107
第五章哺乳動(dòng)物表達(dá)載體 111
第一節(jié)哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)概述 111
一、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)歷史 111
二、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)組成 113
三、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 117
第二節(jié)哺乳動(dòng)物表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 118
一、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體分類 118
二、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 119
三、常用哺乳動(dòng)物表達(dá)載體 124
第三節(jié)哺乳動(dòng)物質(zhì)粒載體優(yōu)化 131
一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 131
二、其他優(yōu)化策略 142
總結(jié)與展望 149
參考文獻(xiàn) 150
第六章病毒表達(dá)載體 154
第一節(jié)基因治療表達(dá)系統(tǒng)概述 154
一、基因治療歷史 154
二、基因治療表達(dá)系統(tǒng)組成 155
第二節(jié)腺病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 157
一、腺病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 157
二、腺病毒表達(dá)載體優(yōu)化 160
三、腺病毒表達(dá)載體應(yīng)用 161
第三節(jié)腺相關(guān)病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 162
一、腺相關(guān)病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 163
二、腺相關(guān)病毒表達(dá)載體優(yōu)化 164
三、腺相關(guān)病毒表達(dá)載體應(yīng)用 165
第四節(jié)逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 166
一、逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 167
二、逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體優(yōu)化 168
三、逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體應(yīng)用 169
第五節(jié)慢病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 170
一、慢病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 170
二、慢病毒表達(dá)載體優(yōu)化 172
三、慢病毒表達(dá)載體應(yīng)用 172
總結(jié)與展望 173
參考文獻(xiàn) 174
第七章植物表達(dá)載體 177
第一節(jié)植物表達(dá)系統(tǒng)概述 177
一、植物表達(dá)系統(tǒng)歷史 177
二、植物表達(dá)系統(tǒng)組成 179
三、植物表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 180
第二節(jié)植物表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 183
一、植物表達(dá)載體分類 183
二、植物表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 187
三、常用植物表達(dá)載體 196
第三節(jié)植物表達(dá)載體的優(yōu)化 201
一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 201
二、其他優(yōu)化策略 212
總結(jié)與展望 215
參考文獻(xiàn) 215
第八章人工染色體載體 220
第一節(jié)人工染色體載體概述 220
一、人工染色體載體歷史 220
二、人工染色體載體應(yīng)用 221
第二節(jié)人工染色體載體結(jié)構(gòu)與功能 226
一、人工染色體載體分類 226
二、人工染色體載體結(jié)構(gòu) 226
三、常用人工染色體載體 232
第三節(jié)人工染色體載體優(yōu)化 237
一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 237
二、其他優(yōu)化策略 238
總結(jié)與展望 239
參考文獻(xiàn) 239
第九章基因編輯載體 242
第一節(jié)基因編輯系統(tǒng)概述 242
一、基因編輯系統(tǒng)歷史 242
二、基因編輯系統(tǒng)組成 244
三、基因編輯系統(tǒng)應(yīng)用 246
第二節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能 250
一、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)分類 251
二、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)結(jié)構(gòu) 251
三、常用 CRISPR/Cas9基因編輯載體 255
第三節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)優(yōu)化 256
一、合理設(shè)計(jì) sgRNA分子 257
二、設(shè)計(jì) Cas9突變體及其類似物 259
三、調(diào)節(jié) sgRNA-Cas9復(fù)合物濃度 263
四、選擇合適遞送系統(tǒng) 264
五、調(diào)控細(xì)胞修復(fù)通路 266
總結(jié)與展望 267
參考文獻(xiàn) 267
第十章基因表達(dá)載體操作實(shí)例 271
第一節(jié)原核表達(dá)載體操作實(shí)例 271
一、材料 271
二、方法 272
三、注意事項(xiàng) 280
第二節(jié)昆蟲表達(dá)載體操作實(shí)例 280
一、材料 280
二、方法 281
三、注意事項(xiàng) 284
第三節(jié)植物表達(dá)載體操作實(shí)例 285
一、材料 285
二、方法 285
三、注意事項(xiàng) 288
第四節(jié)哺乳動(dòng)物表達(dá)載體操作實(shí)例 288
一、材料 288
二、方法 289
三、注意事項(xiàng) 291
第五節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯操作實(shí)例 292
一、材料 292
二、方法 293
三、注意事項(xiàng) 298
總結(jié)與展望 298
參考文獻(xiàn) 299
中英文對(duì)照表 300