《化學生物學實驗(第二版)》共8章,第1、2章介紹了化學生物學實驗基本知識和基本操作。第3~8章是實驗部分,共編寫了37個實驗,包括生化分離分析實驗、生物材料制備實驗、化學中基因工程實驗、化學中蛋白質(zhì)工程實驗、化學中細胞工程實驗和探索性實驗。書后的附錄介紹了化學生物學實驗特殊試劑的配制和*新生物信息數(shù)據(jù)庫等資料。為了適應(yīng)信息化教學的需求,《化學生物學實驗(第二版)》配套了部分實驗儀器的使用、代表性實驗操作及相關(guān)內(nèi)容等數(shù)字化資源,讀者可掃描《化學生物學實驗(第二版)》二維碼觀看。
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目錄
第二版序
第二版前言
**版前言
第1章 化學生物學實驗基本知識 1
1.1實驗室規(guī)則及須知 1
1.2實驗室安全及防護知識 1
1.2.1生物源的危害和防護 1
1.2.2放射性和紫外線輻射的危害和防護 2
1.2.3生物樣品的存放 2
1.2.4生物類實驗廢棄物的處理 2
1.2.5其他的實驗室安全及防護知識、實驗室廢棄物處理 3
第2章 化學生物學實驗基本操作 5
2.1常用儀器的洗滌 5
2.1.1玻璃器皿的洗滌 5
2.1.2其他材質(zhì)器皿的洗滌 5
2.2常用消毒滅菌方法 6
2.2.1物理消毒滅菌方法 6
2.2.2化學消毒滅菌方法 6
2.3化學生物學樣品的處理和純化 7
2.3.1材料的選取和前處理 7
2.3.2細胞的破碎 7
2.3.3蛋白質(zhì)的提取和純化 8
2.3.4核酸的提取和純化 8
2.3.5樣品的濃縮和干燥 9
2.4離心技術(shù) 9
2.4.1離心技術(shù)的原理 9
2.4.2離心機的類型和轉(zhuǎn)頭的分類 10
2.4.3常用離心方法 11
2.4.4高速冷凍離心機 12
2.5常用色譜分離技術(shù) 13
2.5.1凝膠色譜 13
2.5.2離子交換色譜 14
2.5.3反相色譜 14
2.6電泳技術(shù) 14
2.6.1基本原理 14
2.6.2瓊脂糖凝膠電泳 15
2.6.3聚丙烯酰胺凝膠電泳 15
2.6.4毛細管電泳 16
2.6.5凝膠成像技術(shù) 16
2.7 PCR技術(shù) 16
2.7.1 PCR技術(shù)簡介 16
2.7.2 PCR技術(shù)的基本原理和過程 17
2.7.3 PCR的五個元素 17
2.7.4 PCR儀及其使用 18
2.8細胞培養(yǎng)技術(shù) 19
2.8.1體外培養(yǎng)細胞的分類 19
2.8.2培養(yǎng)細胞的生長和增殖過程 20
2.8.3原代細胞的培養(yǎng) 21
2.9其他儀器的使用 21
2.9.1移液槍 21
2.9.2氣相色譜儀 22
2.9.3液相色譜儀 24
2.9.4紅外光譜儀 24
2.9.5熒光分光光度計 25
2.9.6二氧化碳培養(yǎng)箱 26
2.9.7倒置相差顯微鏡 27
2.9.8酶標儀 29
2.9.9活體熒光成像系統(tǒng) 29
2.9.10激光粒度儀 30
2.9.11流式細胞儀 31
第 3章 生化分離分析實驗 32
實驗 1疏水作用色譜分離純化 .-淀粉酶 32
實驗 2親和色譜樹脂的制備及溶菌酶的提取純化 37
實驗 3青霉素;该资铣(shù)和反應(yīng)活性的測定 42
實驗 4靜電自組裝構(gòu)筑 HRP多層膜電極檢測酚類物質(zhì)研究 46
實驗 5 FRET法及熒光猝滅法測定蛋白酶的活性 49
第 4章 生物材料制備實驗 55
實驗 6生物礦物和生物礦化——碳酸鈣多形的控制與制備 55
實驗 7無定形碳酸鈣的制備和轉(zhuǎn)化 58
實驗 8聚乙烯亞胺-DNA復(fù)合物粒徑和表面電荷的測定 61
實驗 9復(fù)凝聚法制備阿霉素微囊及其質(zhì)量評價 63
實驗 10鹽酸左氧氟沙星不同晶型的制備及其表征 66
第 5章 化學中基因工程實驗 70
實驗 11大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備與質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)化 70
實驗 12瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA片段 73
實驗 13 PCR基因擴增獲取毛囊 DNA及其分離 75
實驗 14植物基因組 DNA的提取與擴增 77
實驗 15 PCR-RFLP法檢測單核苷酸多態(tài)性 81
實驗 16基于連接反應(yīng)的滾環(huán)擴增技術(shù)檢測單核苷酸多態(tài)性 86
實驗 17枯草桿菌脂肪酶 A的基因克隆 89
第 6章 化學中蛋白質(zhì)工程實驗 96
實驗 18 2′-脫氧尿苷衍生物的酶促合成的選擇性調(diào)控 96
實驗 19酶催化邁克爾加成反應(yīng) 98
實驗 20 Novozym 435催化的 1-位芳基取代的末端炔丙醇動力學拆分反應(yīng) 100
實驗 21金屬卟啉模擬的生物氧化過程 102
實驗 22操控式分子動力學模擬:以泛素蛋白的 3D結(jié)構(gòu)研究為例 106
實驗 23新冠病毒受體結(jié)合域 (RBD)與受體蛋白 ACE2相互作用的分子模擬 121
實驗 24 Docking:以新冠病毒刺突蛋白受體結(jié)合域 (RBD)與橙皮苷分子對接為例 130
第7章 化學中細胞工程實驗 140
實驗 25 MTT法測定聚乙烯亞胺的細胞毒性 140
實驗 26抗腫瘤藥物 5-氟尿嘧啶對腫瘤細胞的抑制及細胞形態(tài)觀察 142
實驗 27基于熒光分子探針的細胞內(nèi)活性氧水平測定 144
實驗 28抗腫瘤藥物 5-氟尿嘧啶對腫瘤細胞遷移的影響 146
實驗 29聚乙烯亞胺 -DNA復(fù)合物體外細胞轉(zhuǎn)染實驗 148
實驗 30聚乙烯亞胺攜帶基因在細胞中的熒光染色實驗 150
實驗 31聚乙烯亞胺作為基因載體材料攜帶 TRAIL基因?qū)毎蛲龅挠绊?153
實驗 32聚乙烯亞胺 -阿霉素復(fù)合物的細胞攝取實驗 156
實驗 33聚乙烯亞胺 -阿霉素實體瘤原位注射成像實驗 158
實驗 34流式細胞技術(shù)檢測細胞增殖實驗 159
第 8章 探索性實驗 162
實驗 35環(huán)糊精-聚乙烯亞胺聚合物的合成及攜帶基因藥物的性質(zhì)實驗 162
實驗 36 脂肪酶 CALB的理性設(shè)計及其對仲醇立體選擇性的調(diào)控 165
實驗 37大豆食品中轉(zhuǎn)基因成分的分析 171
參考文獻 175
附錄 178附錄 1常用化學生物學緩沖溶液的配制 178
附錄 2常用特殊化學生物學試劑的配制 179
附錄 3生物信息數(shù)據(jù)庫 180