《醫(yī)學免疫學實驗指導》是醫(yī)學免疫學和免疫學技術等課程的實驗課指導用書。本書按照實驗的系統(tǒng)性,從實驗原理、材料、方法、結果、及注意事項等方面進行闡述。全書共收集了18個免疫學相關試驗,其中抗原抗體的制備、凝集反應、沉淀反應、補體參與的試驗及酶聯(lián)免疫吸附試驗,是主要闡述多克隆抗體的制備及抗原抗體反應檢測的經典實驗;抗體形成細胞的檢測、吞噬細胞的吞噬作用、免疫細胞分離技術及淋巴細胞轉化試驗,主要闡述免疫細胞功能的檢測;T細胞功能的體內測定法和豚鼠過敏試驗主要闡述體內評估免疫功能檢測的技術等。
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目錄
實驗一 抗原抗體的制備 1
一、抗原的制備 1
二、抗體的制備 3
思考題 7
實驗二 凝集反應 8
一、試管凝集反應 8
二、玻片凝集反應——ABO血型鑒定 9
三、乳膠凝集試驗 10
四、金黃色葡萄球菌協(xié)同凝集試驗 10
思考題 11
實驗三 沉淀反應 12
一、環(huán)狀沉淀試驗 12
二、瓊脂擴散試驗 13
三、對流免疫電泳 15
四、火箭免疫電泳 16
五、免疫電泳 17
思考題 19
實驗四 補體參與的試驗 20
一、溶血素效價的測定 20
二、總補體溶血活性測定(CH50測定) 21
三、補體結合試驗 22
四、補體介導的微量淋巴細胞毒試驗 25
思考題 26
實驗五 酶聯(lián)免疫吸附試驗 27
一、ELISA間接法 27
二、ELISA雙抗體夾心法 28
三、斑點-ELISA(dot-ELISA) 29
四、酶標記抗生物素蛋白-生物素系統(tǒng)ELISA 29
思考題 30
實驗六 抗體形成細胞的檢測 31
一、瓊脂溶血空斑技術 31
二、免疫玫瑰花試驗法 33
三、定量溶血試驗 34
思考題 34
實驗七 吞噬細胞的吞噬作用 35
一、巨噬細胞的吞噬作用(體外法) 35
二、中性粒細胞的吞噬作用(體內法) 36
三、硝基藍四氮唑還原試驗 37
思考題 38
實驗八 溶菌酶的溶菌作用 39
思考題 40
實驗九 免疫細胞分離技術 41
一、外周血單個核細胞分離 41
二、T、B細胞的分離純化 42
三、吞噬細胞的分離 45
思考題 45
實驗十 淋巴細胞的檢測 46
一、免疫酶染法(APAAP法) 46
二、T細胞亞群免疫組化(SAP法) 47
思考題 49
實驗十一 T、B細胞膜受體的檢測 50
一、T細胞E受體的檢測——E花環(huán)試驗 50
二、B細胞FcγR的檢測——Ea花環(huán) 51
三、C3bR檢測EAC花結 52
四、B細胞SmIgM的檢測 52
思考題 53
實驗十二 淋巴細胞轉化試驗 54
一、形態(tài)學方法 54
二、3H-TdR摻入法 55
思考題 56
實驗十三 T細胞功能的體內測定法 57
一、結核菌素試驗 57
二、PHA皮膚試驗 58
三、接觸性超敏反應 58
思考題 59
實驗十四 豚鼠過敏試驗 60
思考題 60
實驗十五 細胞因子的檢測 61
一、ELISA直接法 61
二、雙抗體夾心法 61
思考題 61
實驗十六 人外周血CTL的細胞毒試驗——形態(tài)學檢查法 62
思考題 63
實驗十七 抗體依賴細胞介導的細胞毒作用 64
思考題 65
實驗十八 人血清IgG的提取及鑒定 66
一、離子交換層析法提取人血清IgG 66
二、血清IgG整定 67
思考題 69
附錄 70
一、溶液的配制 70
二、RPMI-1640培養(yǎng)液的配制 72
三、染色液的配制 72
四、常見蛋白質和部分溶液的光吸收值 73
五、Ig重量單位和國際單位的換算 74
實驗記錄 75