《液相色譜實(shí)戰(zhàn)寶典》采用了基礎(chǔ)知識(shí)結(jié)合實(shí)際應(yīng)用的編寫(xiě)方式,闡述了液相色譜基本原理、儀器結(jié)構(gòu)、試驗(yàn)方法、實(shí)際應(yīng)用以及各種常見(jiàn)問(wèn)題與解答。全書(shū)共六章,包括緒論、液相色譜儀結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介及故障排除、色譜工作站、液相色譜樣品前處理、液相色譜法方法開(kāi)發(fā)和液相色譜法的應(yīng)用。全書(shū)收集了250多個(gè)常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題,作出了較為詳細(xì)的解答;同時(shí)也提供了很多應(yīng)用實(shí)例。
《液相色譜實(shí)戰(zhàn)寶典》可供從事液相色譜分析工作的初、中級(jí)技術(shù)人員學(xué)習(xí)和參考,也可作為儀器分析領(lǐng)域的培訓(xùn)材料。
色譜是一個(gè)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的學(xué)科分支,色譜技術(shù)本身已經(jīng)發(fā)展得相當(dāng)成熟,建立完整的色譜分析方法,并將經(jīng)驗(yàn)傳授給實(shí)驗(yàn)室人員尤為重要。《液相色譜實(shí)戰(zhàn)寶典》較全面的介紹了色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)與分類(lèi)、結(jié)構(gòu)與故障排除、色譜工作站、樣品前處理、液相色譜法方法開(kāi)發(fā)及在食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域分離分析中的應(yīng)用。實(shí)例豐富、涉及廣,對(duì)廣大色譜工作者尤其是初接觸色譜分離工作者有很好的指導(dǎo)作用和參考價(jià)值。
現(xiàn)代色譜,尤其是液相色譜,在分析領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛;原則上只要是能制成溶液的試樣,都可以采用液相色譜來(lái)進(jìn)行分析。為了讓分析從業(yè)人員更加深入地了解液相色譜,從實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)中尋得幫助,應(yīng)儀器信息網(wǎng)要求,筆者編寫(xiě)了《液相色譜實(shí)戰(zhàn)寶典》。
作為一本側(cè)重于應(yīng)用的工具書(shū),本書(shū)是采用基礎(chǔ)知識(shí)結(jié)合實(shí)際應(yīng)用的結(jié)構(gòu)方式來(lái)編寫(xiě)的;A(chǔ)知識(shí)部分旨在系統(tǒng)性地從原理、結(jié)構(gòu)到方法開(kāi)發(fā)原則等方面全面梳理液相色譜的相關(guān)知識(shí),重點(diǎn)提供部分有價(jià)值的參考內(nèi)容。實(shí)際應(yīng)用部分選擇了部分有代表性的問(wèn)題來(lái)進(jìn)行解答,側(cè)重于液相色譜相關(guān)問(wèn)題的具體解決方法。
本書(shū)收集的應(yīng)用問(wèn)題大部分來(lái)自儀器信息網(wǎng)網(wǎng)站社區(qū)。全書(shū)由端禮欽,李亞輝主編,端禮欽負(fù)責(zé)全書(shū)統(tǒng)稿工作,李亞輝負(fù)責(zé)協(xié)助統(tǒng)稿、資料整理等工作,具體分工為:端禮欽編寫(xiě)章;張磊編寫(xiě)第二章至三節(jié),第六章節(jié);王韋崗編寫(xiě)第二章第四節(jié)、第五節(jié)和第六章第二節(jié)、第六節(jié);張鵬編寫(xiě)第三章和第六章第四節(jié)、第五節(jié);龍錦林編寫(xiě)第四章,參與編寫(xiě)第六章第三節(jié);李亞輝參與編寫(xiě)第五章;戶江濤編寫(xiě)第五章,參與編寫(xiě)第六章第三節(jié);唐海霞參與編寫(xiě)第四章;楊春芳參與編寫(xiě)第六章。中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所邱洪燈研究員對(duì)全書(shū)進(jìn)行了系統(tǒng)的審核,徐州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心王靜為全書(shū)的審核和校對(duì)做了大量的工作,江蘇省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)測(cè)試中心郝國(guó)輝為本書(shū)繪制了部分插圖,中國(guó)藥科大學(xué)李思淳為本書(shū)收集了部分問(wèn)題素材,安捷倫科技(中國(guó))有限公司大中華區(qū)液相產(chǎn)品系統(tǒng)資深工程師盧佳為本書(shū)涉及安捷倫的內(nèi)容做了審核工作,謹(jǐn)在此致以深切的謝意。
限于編者的水平,書(shū)中疏漏之處在所難免,敬請(qǐng)讀者批評(píng)指正。
編者
2021年5月
儀器信息網(wǎng)自1999年開(kāi)通以來(lái),一直以信息化帶動(dòng)中國(guó)科學(xué)儀器行業(yè)的健康快速發(fā)展為宗旨,以互動(dòng)、創(chuàng)新、整合為服務(wù)理念,致力于為科學(xué)儀器行業(yè)提供專(zhuān)業(yè)化的信息服務(wù)和網(wǎng)絡(luò)應(yīng)用技術(shù)服務(wù)。網(wǎng)站擁有一支專(zhuān)業(yè)綜合性技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)。此外,網(wǎng)站還有數(shù)百位實(shí)驗(yàn)室一線兼職人員,數(shù)十位行業(yè)專(zhuān)家顧問(wèn)隊(duì)伍。通過(guò)二十年的辛勤耕耘和大量的基礎(chǔ)工作,儀器信息網(wǎng)已經(jīng)發(fā)展成為中國(guó)科學(xué)儀器行業(yè)重要的媒體之一。
章 緒論 1
節(jié) 色譜法的發(fā)展歷程 1
第二節(jié) 液相色譜法分類(lèi) 2
一、吸附色譜法 3
二、分配色譜法 4
三、離子交換色譜法 7
四、離子色譜法 8
五、離子對(duì)色譜法 9
六、排阻色譜法 11
七、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 12
1.固定相或流動(dòng)相的極性對(duì)溶質(zhì)的保留行為有何影響? 12
2.化學(xué)鍵合相色譜是什么?有哪些突出的優(yōu)點(diǎn)? 13
3.化學(xué)抑制型離子色譜和非抑制型離子色譜的區(qū)別是什么? 13
4.離子交換色譜法、離子色譜法、離子對(duì)色譜法的區(qū)別是什么? 14
5.各類(lèi)液相色譜適宜分離的物質(zhì)是什么? 14
6.影響排阻色譜分離效果的因素有哪些? 15
7.為什么利血平在排阻色譜校正曲線上相對(duì)應(yīng)的分子量要小很多? 15
8.怎樣選擇一種合適的分析方法來(lái)分離已知目標(biāo)化合物? 16
9.超臨界流體色譜法有哪些優(yōu)缺點(diǎn)? 16
10.為什么不用同一種物質(zhì)來(lái)調(diào)節(jié)pH值? 17
11.無(wú)機(jī)鹽對(duì)樣品中無(wú)機(jī)物的保留行為有什么影響? 18
12.怎樣選擇離子對(duì)試劑? 18
13.反相離子對(duì)色譜與陰離子交換色譜有什么異同點(diǎn)? 19
14.半制備液相色譜和制備液相色譜有什么區(qū)別? 19
15.流動(dòng)相與樣品溶劑不互溶是否可以進(jìn)樣? 19
16.親和色譜有哪些用途? 20
第三節(jié) 相關(guān)術(shù)語(yǔ)和概念 20
一、色譜流出曲線相關(guān)名詞 20
二、分配系數(shù) 22
三、容量因子 23
四、選擇因子 23
五、分離度 23
六、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 24
1.梯度洗脫的原理是什么? 24
2.影響出峰時(shí)間的因素有哪些? 24
3.怎樣將目標(biāo)化合物的保留時(shí)間提前? 25
4.什么是容量因子?如何計(jì)算容量因子? 25
5.怎樣通過(guò)改變流動(dòng)相比例來(lái)延長(zhǎng)保留時(shí)間? 25
6.為什么保留時(shí)間總在變化? 25
7.什么是液相色譜的基線? 26
8.分離度(R)應(yīng)大于1.5是指什么? 26
9.檢出限和定量限有什么區(qū)別? 26
10.如何獲得檢出限? 27
第四節(jié) 動(dòng)力學(xué)過(guò)程 28
一、塔板理論 28
二、速率理論 29
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 32
1.液相色譜中影響峰擴(kuò)散的因素有哪些? 32
2.怎樣提高液相色譜的分離度? 33
3.怎樣提高液相色譜柱的柱效? 34
4.色譜柱直徑對(duì)峰擴(kuò)散有哪些影響? 34
第五節(jié) 應(yīng)用與前景 34
一、重點(diǎn)領(lǐng)域應(yīng)用情況 34
二、多維色譜技術(shù) 35
三、整體色譜柱技術(shù) 35
四、衍生化技術(shù) 36
五、聯(lián)用技術(shù) 36
六、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 38
1.多維液相色譜的優(yōu)勢(shì)有哪些? 38
2.液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用在定性方面有哪些優(yōu)勢(shì)? 39
3.液相色譜與光譜聯(lián)用技術(shù)在形態(tài)分析上有哪些優(yōu)勢(shì)? 39
4.液相色譜微型化的意義在哪里? 40
5.液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)能完全替代液相色譜嗎? 40
第二章 液相色譜儀結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介及故障排除 41
節(jié) 儲(chǔ)液器和溶劑過(guò)濾器 41
一、儲(chǔ)液器 41
二、溶劑過(guò)濾器 42
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 43
1.為什么流動(dòng)相使用前要過(guò)濾? 43
2.液相系統(tǒng)中不銹鋼管路應(yīng)避免使用哪些溶劑? 43
3.怎樣防止和處理溶劑過(guò)濾器堵塞? 43
4.怎樣解決切換溶劑后系統(tǒng)壓力和基線不穩(wěn)的問(wèn)題? 44
5.如果溶劑跑空,氣泡會(huì)不會(huì)進(jìn)到柱子里? 44
6.怎樣維護(hù)液相色譜溶劑過(guò)濾器? 44
7.如何解決溶劑過(guò)濾器處氣泡排不干凈的問(wèn)題? 44
8.不銹鋼材質(zhì)與玻璃材質(zhì)的溶劑過(guò)濾器有什么區(qū)別? 45
9.怎樣防止流動(dòng)相中長(zhǎng)藻? 45
第二節(jié) 輸液泵 45
一、基本要求與分類(lèi) 45
二、往復(fù)式恒流柱塞泵結(jié)構(gòu)與工作原理 47
三、常見(jiàn)的泵模塊構(gòu)造 47
四、維護(hù)、故障分析及排除方法 49
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 58
1.為什么流動(dòng)相使用前要脫氣? 58
2.如何判斷和排除單向閥故障? 59
3.如何解決Waters 2695液相色譜儀出現(xiàn)的solv delivery h/w fault故障? 60
4.為什么系統(tǒng)壓力會(huì)隨著測(cè)樣時(shí)間增加而變大? 60
5.為什么儀器接上色譜柱與不接色譜柱壓力基本不變? 61
6.什么原因?qū)е卤A魰r(shí)間和峰面積的重復(fù)性不好? 61
7.如何清洗單向閥? 62
第三節(jié) 進(jìn)樣系統(tǒng) 62
一、基本構(gòu)造 62
二、進(jìn)樣方式分類(lèi) 64
三、注意事項(xiàng) 68
四、故障分析及排除方法 69
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 70
1.如何更換Ultimate 3000液相色譜注射器? 70
2.Ultimate 3000液相色譜進(jìn)樣針與定量環(huán)如何更換? 70
3.為什么機(jī)械手臂抓住小瓶子進(jìn)完樣品后放不下來(lái)? 71
4.如何使自動(dòng)進(jìn)樣器彎曲的進(jìn)樣針恢復(fù)原狀? 71
5.為什么手動(dòng)進(jìn)樣只能選擇定量環(huán)的滿環(huán)進(jìn)樣或者半環(huán)進(jìn)樣? 71
6.液相手動(dòng)進(jìn)樣的六通閥與自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣閥是否一樣? 72
7.為什么自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣后樣品盤(pán)中時(shí)常會(huì)有液體? 72
8.怎樣解決由進(jìn)樣器污染導(dǎo)致的鬼峰問(wèn)題? 72
9.安捷倫自動(dòng)進(jìn)樣器如何更換進(jìn)樣針? 73
10.安捷倫自動(dòng)進(jìn)樣器如何更換進(jìn)樣針座? 76
第四節(jié) 色譜柱 76
一、柱結(jié)構(gòu) 76
二、柱填料 79
三、填料填充技術(shù) 82
四、常見(jiàn)色譜柱及其應(yīng)用范圍 83
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 83
1.液相色譜柱的分離原理有哪些? 83
2.如何啟用、保管和維護(hù)液相色譜柱? 85
3.如何測(cè)試液相色譜柱的柱效? 85
4.液相色譜柱保護(hù)柱有何作用? 86
5.怎樣解決色譜柱導(dǎo)致的系統(tǒng)壓力過(guò)高的問(wèn)題? 87
6.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后如何清洗液相色譜柱? 87
7.正相色譜柱與反相色譜柱在填料上有什么區(qū)別? 87
8.如何正確使用液相色譜柱? 88
9.如何正確安裝液相色譜柱? 89
10.液相色譜柱的金屬接頭與PEEK接頭有什么區(qū)別? 90
11.不同品牌色譜柱管線接頭是否通用? 90
12.如何計(jì)算色譜柱柱體積? 91
13.液相色譜柱溫與組分分離度有什么關(guān)系? 92
第五節(jié) 液相色譜檢測(cè)器 92
一、檢測(cè)器分類(lèi) 92
二、性能指標(biāo) 94
三、常見(jiàn)檢測(cè)器 96
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 104
1.如何解決示差折光檢測(cè)器基線容易漂移的問(wèn)題? 104
2.怎樣沖洗已經(jīng)堵塞的檢測(cè)器? 105
3.二極管陣列檢測(cè)器、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器和紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器有什么區(qū)別? 105
4.檢測(cè)器光閘不能復(fù)位故障如何排除? 106
5.基線噪聲和檢測(cè)器噪聲的區(qū)別是什么? 107
6.如何維護(hù)紫外檢測(cè)器流通池? 108
7.液相色譜檢測(cè)器串聯(lián)使用時(shí)有哪些注意事項(xiàng)? 108
8.如何解決基線噪聲大、基線漂移的問(wèn)題? 109
9.什么原因?qū)е伦鰳訒r(shí)總是在同一時(shí)間出現(xiàn)倒峰? 109
10.蒸發(fā)光散射檢測(cè)器熱清洗如何操作? 109
11.二極管陣列檢測(cè)器基線不穩(wěn)的原因有哪些? 110
12.檢測(cè)器出殘留峰如何處理? 110
第三章 色譜工作站 111
節(jié) 安裝與配置 111
一、安裝要求 112
二、安裝前設(shè)置 113
三、工作站軟件安裝 114
四、配置儀器 114
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 115
1.怎樣解決安捷倫LC 1260液相色譜工作站許可證錯(cuò)誤無(wú)法登錄的問(wèn)題? 115
2.如何處理液相色譜工作站無(wú)法通信,停留在駐留模式的問(wèn)題? 115
3.如何解決液相色譜工作站顯示存在同名儀器的問(wèn)題? 116
4.怎樣解決工作站磁盤(pán)存滿導(dǎo)致內(nèi)存不足,儀器不能正常使用的問(wèn)題? 116
5.重新安裝工作站軟件有哪些注意事項(xiàng)? 116
6.工作站可否安裝殺毒軟件? 117
7.工作站數(shù)據(jù)多久備份一次為宜? 118
8.怎樣更換老舊工作站安裝平臺(tái)? 118
9.如何用一臺(tái)計(jì)算機(jī)控制多個(gè)工作站? 118
10.如何遠(yuǎn)程控制工作站? 118
第二節(jié) 常用參數(shù)的含義與設(shè)定 119
一、數(shù)據(jù)采集 119
二、數(shù)據(jù)處理 122
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 123
1.如何設(shè)置半峰寬、斜率、漂移、小峰面積等積分參數(shù)? 123
2.液相色譜工作站如何設(shè)置梯度洗脫程序? 124
3.如何使用柱溫箱進(jìn)行控溫? 124
4.如何正確設(shè)定參比波長(zhǎng)? 125
5.為何采集數(shù)據(jù)時(shí)的數(shù)據(jù)信號(hào)與后處理時(shí)的數(shù)據(jù)信號(hào)有差異? 125
6.什么是閾值?怎樣設(shè)定閾值? 125
7.怎樣查看和計(jì)算信噪比? 125
8.信噪比計(jì)算中USP、JP、EP等分別代表什么? 125
第三節(jié) 定性與定量 126
一、定性分析 126
二、定量分析 127
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 128
1.內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法各有哪些優(yōu)缺點(diǎn)? 128
2.面積歸一法定量需要進(jìn)樣量一致嗎? 129
3.如何建立標(biāo)準(zhǔn)加入法的校正曲線? 129
4.如何對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行定性分析? 129
5.如何選擇是用峰高定量還是峰面積定量? 130
6.為什么在相同的條件下分析結(jié)果卻不一樣? 130
7.各種曲線擬合方式有哪些區(qū)別? 131
8.工作站中內(nèi)標(biāo)物需要怎樣設(shè)置? 131
9.單點(diǎn)校正法的適用范圍有哪些? 131
10.標(biāo)準(zhǔn)曲線的點(diǎn)及線性范圍怎樣設(shè)置? 132
第四章 液相色譜樣品前處理 133
節(jié) 液固萃取 134
一、直接萃取 134
二、超聲萃取 135
三、影響萃取的因素 136
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 138
1.超聲萃取有哪些優(yōu)點(diǎn)? 138
2.農(nóng)藥檢測(cè)用的乙醚該如何除去過(guò)氧化物? 139
3.常見(jiàn)的固體提取方式有哪些? 139
4.振蕩和超聲哪個(gè)萃取效率更高? 140
5.EPA3550 關(guān)于超聲萃取的方法中為什么要用無(wú)水硫酸鈉? 141
6.超聲萃取具體怎樣操作? 141
7.超聲萃取后怎樣進(jìn)行土壤顆粒物和萃取液的分離? 142
8.索氏提取是否可以用其他提取方式替代? 142
9.水蒸氣蒸餾和共水蒸餾有什么區(qū)別? 142
10.水蒸氣蒸餾有哪些適用范圍? 143
第二節(jié) 液液萃取 143
一、液液萃取的原理 143
二、萃取分配常數(shù) 144
三、萃取率 144
四、萃取溶劑的性質(zhì)與選擇 145
五、萃取液乳化 148
六、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 148
1.液液萃取時(shí)乳化產(chǎn)生的原因及解決方法有哪些? 148
2.液液萃取體系中的兩相比例對(duì)萃取效果有哪些影響? 149
3.如何選擇液液萃取的萃取溶劑? 150
4.農(nóng)殘前處理過(guò)程中加入氯化鈉能使有機(jī)相和水相完全分離嗎? 150
5.影響液液萃取過(guò)程的因素有哪些? 151
6.什么是萃取劑?什么是稀釋劑? 151
7.液液萃取過(guò)程有哪些特點(diǎn)? 151
8.液液萃取與固相萃取有什么區(qū)別? 151
9.常見(jiàn)的液液萃取方式有哪些? 152
第三節(jié) 固相萃取 152
一、吸附填料與化合物間的作用原理 152
二、吸附填料的類(lèi)別 153
三、固相萃取吸附模式 156
四、固相萃取的影響因素 158
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 160
1.使用 SPE柱時(shí)引起小柱堵塞的原因及其解決辦法有哪些? 160
2.SPE柱的特點(diǎn)及使用要求有哪些? 160
3.如何避免固相萃取使用過(guò)程中產(chǎn)生溝渠效應(yīng)? 161
4.封端C18固相萃取柱與未封端C18固相萃取柱有哪些區(qū)別? 162
5.如何正確選擇合適的氧化鋁固相萃取柱? 162
6.可以用WAX固相萃取小柱替代MAX固相萃取小柱嗎? 163
7.固相萃取時(shí)淋洗液為何需要抽干? 163
8.導(dǎo)致固相萃取回收率低的原因有哪些? 164
9.如何正確選擇固相萃取柱規(guī)格型號(hào)? 164
10.樣品預(yù)處理的方式、作用和目的是什么? 165
第四節(jié) QuEChERS方法 165
一、萃取體系分類(lèi) 166
二、溶劑提取 166
三、提取液凈化 167
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 168
1.QuEChERS方法在時(shí)間、人工、成本上有哪些優(yōu)勢(shì)? 168
2.QuEChERS中PSA和C18的凈化機(jī)理是什么? 168
3.提取溶劑酸化乙腈和純乙腈有什么區(qū)別? 169
4.QuEChERS方法中緩沖鹽體系的pH值范圍和作用是什么? 170
5.如何選擇QuEChERS方法中的凈化填料? 170
6.QuEChERS方法中凈化提取液的體積如何選擇? 171
7.如何解決無(wú)水硫酸鈉大量放熱的問(wèn)題? 172
8.為什么QuEChERS方法在畜產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留檢測(cè)中使用不多? 172
9.QuEChERS方法中加入石墨化炭黑的作用是什么? 172
10.QuEChERS方法已經(jīng)寫(xiě)入哪些標(biāo)準(zhǔn)方法? 173
第五節(jié) 快速溶劑萃取 173
一、快速溶劑萃取原理 173
二、快速溶劑萃取的優(yōu)勢(shì)及特點(diǎn) 174
三、快速溶劑萃取的模式與步驟 175
四、快速溶劑萃取的影響因素 176
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 177
1.快速溶劑萃取技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用有哪些? 177
2.快速溶劑萃取技術(shù)可應(yīng)用于哪些領(lǐng)域? 178
3.硅藻土的加入量對(duì)測(cè)定結(jié)果有無(wú)影響? 178
4.如何優(yōu)化甲胺磷的萃取條件? 178
5.快速溶劑萃取在哪些國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中有應(yīng)用? 179
6.如何解決提取液體積不一致的問(wèn)題? 179
7.快速溶劑萃取法濾膜的材質(zhì)如何選擇? 179
8.快速溶劑萃取儀使用后需要進(jìn)行哪些例行維護(hù)? 180
第五章 液相色譜法方法開(kāi)發(fā) 181
節(jié) 流動(dòng)相 181
一、流動(dòng)相性質(zhì)的要求 181
二、流動(dòng)相常用溶劑 183
三、流動(dòng)相的選擇與優(yōu)化 184
四、等度洗脫和梯度洗脫 188
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 190
1.方法開(kāi)發(fā)中甲醇和乙腈作為流動(dòng)相有何區(qū)別? 190
2.四氫呋喃和三乙胺在防止色譜峰拖尾方面有什么區(qū)別? 191
3.高壓梯度洗脫與低壓梯度洗脫有什么區(qū)別? 191
4.流動(dòng)相加緩沖液和調(diào)節(jié)pH值的原則有哪些? 192
5.如何正確選擇流動(dòng)相改性劑? 193
6.液相色譜在使用緩沖鹽時(shí)的注意事項(xiàng)有哪些? 194
7.液相色譜梯度洗脫時(shí)的注意事項(xiàng)有哪些? 194
8.飽和食鹽水是否可以直接進(jìn)液相色譜儀? 195
9.水相和有機(jī)相都加酸的目的是什么? 196
10.用玻璃瓶裝流動(dòng)相的原因有哪些? 196
11.某通道或某泵長(zhǎng)期都是一種流動(dòng)相,是否需要更換? 196
12.如何避免液相色譜分析中的溶劑效應(yīng)? 197
13.雙泵運(yùn)行乙腈和水流動(dòng)相,產(chǎn)生基線波動(dòng)的原因有哪些? 198
14.流動(dòng)相中加入緩沖鹽能改善基線漂移嗎? 198
第二節(jié) 色譜柱 199
一、色譜柱的填料 199
二、色譜柱的分類(lèi)和應(yīng)用范圍 200
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 204
1.色譜柱長(zhǎng)短對(duì)分析有什么影響? 204
2.更換色譜柱時(shí)的注意事項(xiàng)有哪些? 205
3.方法開(kāi)發(fā)時(shí)需要使用保護(hù)柱嗎? 205
4.有機(jī)相對(duì)反相色譜柱保留時(shí)間影響的機(jī)理有哪些? 206
5.反相色譜系統(tǒng)切換成正相色譜系統(tǒng)有哪些需要注意的問(wèn)題? 207
6.C18柱為什么不適合用純水作流動(dòng)相? 208
7.柱溫對(duì)分離度有哪些影響? 208
8.液相色譜柱封端與不封端對(duì)檢測(cè)結(jié)果有哪些影響? 209
9.色譜柱粒徑及孔徑對(duì)保留時(shí)間有哪些影響? 210
10.BEH Amide柱適用范圍和注意事項(xiàng)有哪些? 210
11.T3色譜柱和C18色譜柱有哪些區(qū)別? 212
12.導(dǎo)致色譜峰保留時(shí)間漂移、柱壓波動(dòng)變大的原因有哪些? 212
13.氨基柱使用注意事項(xiàng)有哪些? 213
14.HILIC模式有哪些適用范圍? 213
15.如何確定色譜柱的流速? 216
第三節(jié) 檢測(cè)器 217
一、檢測(cè)器選用原則 217
二、各類(lèi)檢測(cè)器適用范圍 217
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 222
1.如何選擇液相色譜的檢測(cè)器? 222
2.如何正確選擇目標(biāo)化合物紫外吸收波長(zhǎng)? 222
3.不同溶劑對(duì)目標(biāo)化合物的紫外吸收波長(zhǎng)有什么影響? 223
4.熒光激發(fā)波長(zhǎng)與熒光發(fā)射波長(zhǎng)有什么關(guān)系? 224
5.紫外檢測(cè)器與蒸發(fā)光散射檢測(cè)器哪個(gè)靈敏度更高? 225
6.示差折光檢測(cè)器能不能使用梯度洗脫? 225
7.示差折光檢測(cè)器的應(yīng)用范圍和注意事項(xiàng)有哪些? 225
8.蒸發(fā)光散射檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)有哪些? 226
9.電導(dǎo)檢測(cè)器和安培檢測(cè)器的區(qū)別在哪里? 227
10.為什么在不同的檢測(cè)器上色譜峰的分離度不同? 227
11.為什么檢測(cè)器采集不到信號(hào)? 228
12.檢測(cè)器出鬼峰如何處理? 228
第六章 液相色譜法的應(yīng)用 229
節(jié) 液相色譜在生物制品分析中的應(yīng)用 229
一、液相色譜在氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)分析中的應(yīng)用 230
二、液相色譜在核堿、核苷、核苷酸和核酸分析中的應(yīng)用 234
三、液相色譜在生物胺分析中的應(yīng)用 238
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 239
1.液相色譜分析多肽藥物時(shí)儀器條件如何確定? 239
2.如何使用液相色譜測(cè)定多肽中某種肽含量? 239
3.做核酸純化分離時(shí)對(duì)液相色譜有什么要求? 240
4.普通C18柱能否用來(lái)分離蛋白質(zhì)? 241
5.如何建立液相色譜法分析生物胺的色譜條件? 241
6.生物胺樣品衍生產(chǎn)物用乙腈復(fù)溶后的沉淀是否影響測(cè)定結(jié)果? 242
7.氨基酸衍生產(chǎn)物可以放置多久? 242
8.如何采用液相色譜測(cè)定氨基酸? 242
第二節(jié) 液相色譜在醫(yī)學(xué)分析中的應(yīng)用 243
一、液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用 243
二、液相色譜在臨床醫(yī)學(xué)分析中的應(yīng)用 245
三、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 247
1.BB、BV等分離模式在新藥申報(bào)時(shí)該如何設(shè)定和選擇? 247
2.如何設(shè)置橙皮苷液相色譜檢測(cè)方法的檢測(cè)時(shí)間? 248
3.如何進(jìn)行湯劑樣品的前處理? 248
4.如何選擇紫外分光光度法與高效液相色譜法? 249
5.為何薄層色譜法與液相色譜法檢測(cè)藥材提取液結(jié)果不一致? 249
6.《中國(guó)藥典》中規(guī)定的理論塔板數(shù)參數(shù)在實(shí)際分析中重要嗎? 250
7.液相色譜定性鑒別的分離度要求是多少? 250
8.甘草苷的液相色譜檢測(cè)方法可以用甲醇作流動(dòng)相嗎? 250
9.分析三七含量時(shí)分離度達(dá)不到《中國(guó)藥典》要求該如何解決? 251
10.怎樣做系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)? 251
第三節(jié) 液相色譜在食品分析中的應(yīng)用 252
一、液相色譜在食品營(yíng)養(yǎng)成分分析中的應(yīng)用 252
二、液相色譜在食品添加劑成分分析中的應(yīng)用 254
三、液相色譜在食品有毒有害物質(zhì)殘留分析中的應(yīng)用 257
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 262
1.液相色譜分析糖類(lèi)需要注意的問(wèn)題有哪些? 262
2.如何選擇氨基酸分析時(shí)可以使用的衍生化試劑? 263
3.液相色譜可以檢測(cè)維生素的種類(lèi)有哪些? 264
4.如何解決高效液相色譜檢測(cè)有機(jī)酸分離度不好的問(wèn)題? 265
5.如何選擇食品中丙酸液相色譜分析方法的流動(dòng)相? 266
6.防腐劑檢測(cè)時(shí)前處理需要注意哪些問(wèn)題? 267
7.為什么分析食品中苯甲酸和山梨酸時(shí)保留時(shí)間會(huì)延遲? 267
8.液相色譜分析食品中脫氫乙酸為何不出峰? 268
9.如何提升食品中富馬酸二甲酯液相色譜檢測(cè)方法的檢出限? 269
10.液相色譜分析脂溶性食品中抗氧化劑時(shí)需要注意哪些問(wèn)題? 269
11.液相色譜測(cè)定合成色素不出峰的原因有哪些? 270
12.液相色譜測(cè)定氨基甲酸酯的注意事項(xiàng)有哪些? 271
13.磺酰脲類(lèi)農(nóng)藥液相色譜法分析條件是什么? 272
14.液相色譜法中流動(dòng)相配比對(duì)峰高和峰面積有哪些影響? 273
15.如何提高液相色譜法檢測(cè)磺胺類(lèi)物質(zhì)的回收率? 273
16.為什么選擇Na2EDTA-Mcllvaine緩沖液作為提取劑? 274
17.為什么測(cè)定沙星類(lèi)物質(zhì)時(shí)樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品保留時(shí)間不一致? 274
18.免疫親和柱-高效液相色譜法測(cè)定真菌毒素有哪些注意事項(xiàng)? 275
第四節(jié) 液相色譜在環(huán)境分析中的應(yīng)用 276
一、液相色譜在水環(huán)境分析中的應(yīng)用 276
二、液相色譜在大氣環(huán)境分析中的應(yīng)用 279
三、液相色譜在土壤環(huán)境分析中的應(yīng)用 283
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 286
1.測(cè)定多環(huán)芳烴時(shí)出峰數(shù)量、順序與標(biāo)準(zhǔn)不同的原因有哪些? 286
2.環(huán)境空氣中酚類(lèi)化合物測(cè)定時(shí)出峰不完全的原因有哪些? 286
3.如何按照HJ 4782009標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行試劑空白實(shí)驗(yàn)? 287
4.液相色譜法檢測(cè)水中苯并芘不出峰是什么原因? 288
5.如何提高環(huán)境空氣中醛酮類(lèi)化合物的分離度? 289
6.是否可以用液相色譜來(lái)檢測(cè)表面活性劑十二烷基苯磺酸鈉? 289
7.如何使用液相色譜法檢測(cè)水中鄰苯二甲酸二甲酯? 290
8.液相色譜法檢測(cè)環(huán)酰菌胺流動(dòng)相能否不采用緩沖鹽體系? 290
9.為什么水中阿特拉津的實(shí)際檢出限不滿足標(biāo)準(zhǔn)要求? 291
第五節(jié) 液相色譜在化工分析中的應(yīng)用 291
一、液相色譜在石油化工分析中的應(yīng)用 292
二、液相色譜在基礎(chǔ)化工分析中的應(yīng)用 293
三、液相色譜在化工染料分析中的應(yīng)用 294
四、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 295
1.如何測(cè)定母液中對(duì)甲苯磺酸及其產(chǎn)物的占比? 295
2.如何采用液相色譜法分析樣品中甲苯二異氰酸酯? 296
3.測(cè)定中間餾分芳烴含量時(shí)的注意事項(xiàng)有哪些? 298
4.有機(jī)胺類(lèi)化合物如何采用液相色譜進(jìn)行檢測(cè)? 300
5.堿性化合物分離時(shí)前沿峰如何解決? 300
6.如何對(duì)含有三苯基膦和三苯基氧膦的樣品進(jìn)行定性檢測(cè)? 300
7.如何建立硼酸酯結(jié)構(gòu)化合物的液相色譜檢測(cè)條件? 301
第六節(jié) 液相色譜在其他領(lǐng)域中的應(yīng)用 301
一、液相色譜在違禁藥物檢查分析中的應(yīng)用 302
二、液相色譜在毒品檢驗(yàn)分析中的應(yīng)用 302
三、液相色譜在煙草化學(xué)分析中的應(yīng)用 303
四、液相色譜在化妝品分析中的應(yīng)用 305
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解答 309
1.如何選擇應(yīng)用于紡織品檢測(cè)的高效液相色譜儀? 309
2.如何用高效液相色譜儀檢測(cè)紡織品中的甲醛、偶氮? 310
3.如何優(yōu)化化妝品中性激素的液相色譜測(cè)定方法? 310
4.液相色譜法檢測(cè)氫醌時(shí)目標(biāo)峰旁邊為何有分叉峰? 310
5.如何優(yōu)化化妝品中氫醌和苯酚檢測(cè)的前處理方法? 311
6.測(cè)定飼料中丙二醛時(shí)丙二醛后面為什么有雜峰? 311
7.為什么同一樣品使用不同進(jìn)樣瓶進(jìn)樣結(jié)果不一樣? 312
8.為什么測(cè)定飼料中維生素K3時(shí)重復(fù)性不好? 313
參考文獻(xiàn) 314