目錄
《博士后文庫(kù)》序言
前言
1 緒論 1
1.1 白樺的研究概況 1
1.2 植物內(nèi)源激素的研究進(jìn)展 2
1.2.1 內(nèi)源激素種類 2
1.2.2 內(nèi)源激素提取分離方法的研究進(jìn)展 4
1.2.3 內(nèi)源激素檢測(cè)方法的研究進(jìn)展 6
1.3 植物內(nèi)源激素生物合成途徑的研究進(jìn)展 8
1.3.1 赤霉素生物合成途徑的研究進(jìn)展 8
1.3.2 脫落酸生物合成途徑的研究進(jìn)展 8
1.3.3 吲哚乙酸生物合成途徑的研究進(jìn)展 .11
1.4 植物內(nèi)源激素生物合成關(guān)鍵酶及其基因 12
1.4.1 赤霉素生物合成關(guān)鍵酶及其基因 12
1.4.2 脫落酸生物合成關(guān)鍵酶及其基因 16
1.5 生長(zhǎng)素早期響應(yīng)基因GH3 17
1.6 自然條件生長(zhǎng)白樺的激素研究概況 18
1.7 本研究的目的與意義 20
2 內(nèi)源激素提取方法研究 21
2.1 材料與方法 21
2.1.1 材料 21
2.1.2 方法 23
2.2 結(jié)果與分析 25
2.2.1 提取溶劑的選擇 25
2.2.2 提取溶劑濃度的選擇 25
2.2.3 淋洗液的選擇 26
2.2.4 洗脫液的選擇 27
2.2.5 酸化洗脫液的選擇 27
2.3 討論 28
2.4 本章小結(jié) 29
3 激素HPLC-PAD 檢測(cè)方法建立 30
3.1 材料與方法 30
3.1.1 材料 30
3.1.2 HPLC-PAD 檢測(cè)方法 32
3.1.3 HPLC-PAD 檢測(cè)方法學(xué)驗(yàn)證 34
3.1.4 數(shù)據(jù)處理方法 34
3.2 結(jié)果與分析 34
3.2.1 四種激素的紫外特征吸收 34
3.2.2 HPLC-PAD 方法建立 37
3.3 討論 45
3.4 本章小結(jié) 45
4 激素含量LC-MS/MS 檢測(cè)方法建立 47
4.1 材料與方法 47
4.1.1 材料 47
4.1.2 LC-MS/MS 檢測(cè)方法 49
4.1.3 LC-MS/MS 檢測(cè)方法學(xué)驗(yàn)證 51
4.1.4 數(shù)據(jù)處理方法 52
4.2 結(jié)果與分析 52
4.2.1 LC-MS/MS 檢測(cè)方法建立 52
4.2.2 檢測(cè)激素含量的LC-MS/MS 方法學(xué)驗(yàn)證 60
4.2.3 樣品中各種激素含量的計(jì)算方法 62
4.3 討論 63
4.4 本章小結(jié) 64
5 白樺內(nèi)源赤霉素含量及合成關(guān)鍵基因的表達(dá)分析 65
5.1 材料與方法 65
5.1.1 材料 65
5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法 68
5.1.3 內(nèi)源GA3 和GA4 含量的時(shí)序變化分析 72
5.1.4 基因的克隆與分析 77
5.2 討論 80
5.2.1 內(nèi)源GA3 和GA4 含量變化分析 80
5.2.2 內(nèi)源GA 生物合成關(guān)鍵基因時(shí)序表達(dá)分析 81
5.3 本章小結(jié) 82
6 白樺內(nèi)源脫落酸含量及合成關(guān)鍵基因的表達(dá)分析 83
6.1 材料與方法 83
6.1.1 材料 83
6.1.2 實(shí)驗(yàn)方法 86
6.2 結(jié)果與分析 89
6.2.1 內(nèi)源ABA 含量的時(shí)序變化分析 89
6.2.2 基因的克隆及表達(dá)分析 90
6.2.3 ABA 含量與調(diào)控ABA 合成關(guān)鍵基因表達(dá)量相關(guān)性分析 93
6.3 討論 93
6.3.1 內(nèi)源ABA 含量變化分析 93
6.3.2 內(nèi)源ABA 生物合成關(guān)鍵基因時(shí)序表達(dá)分析 94
6.4 本章小結(jié) 95
7 白樺內(nèi)源吲哚乙酸含量和BpGH3基因家族的表達(dá)分析 97
7.1 材料與方法 97
7.1.1 材料 97
7.1.2 實(shí)驗(yàn)方法 100
7.2 結(jié)果與分析 103
7.2.1 內(nèi)源IAA 含量的時(shí)序變化分析 103
7.2.2 基因的克隆與分析 104
7.2.3 生長(zhǎng)素響應(yīng)基因BpGH3 家族的表達(dá)與IAA 含量相關(guān)性分析 105
7.3 討論 107
7.3.1 內(nèi)源IAA 水平時(shí)序變化分析 107
7.3.2 生長(zhǎng)素響應(yīng)基因BpGH3 的克隆與分析 108
7.4 本章小結(jié) 109 8 結(jié)論 110
參考文獻(xiàn) 113
編后記 121