第一章 緒論
第一節(jié)　高效液相色譜方法簡介 2
一、液相色譜技術(shù)的初現(xiàn)—茨維特的經(jīng)典實(shí)驗(yàn) 2
二、高效液相色譜方法的顯現(xiàn) 3
三、高效液相色譜方法的發(fā)展現(xiàn)狀 6
第二節(jié)　高效液相色譜方法的特點(diǎn) 13
一、與經(jīng)典液相（柱）色譜法比較 13
二、與氣相色譜法比較 14
三、高效液相色譜法的特點(diǎn) 15
第三節(jié)　高效液相色譜方法的分類 15
一、按溶質(zhì)在兩相分離過程的物理化學(xué)原理分類 15
二、按溶質(zhì)在色譜柱洗脫的動力學(xué)過程分類 17
第四節(jié)　高效液相色譜法的應(yīng)用范圍和局限性 19
一、應(yīng)用范圍 19
二、方法的局限性 19
參考文獻(xiàn) 20

第二章　高效液相色譜儀簡介
第一節(jié)　流動相及儲液罐 23
一、儲液罐 23
二、流動相脫氣 24
第二節(jié)　高壓輸液泵及梯度洗脫裝置 26
一、高壓輸液泵 26
二、輸液系統(tǒng)的輔助設(shè)備 39
三、梯度洗脫裝置 41
第三節(jié)　進(jìn)樣裝置 44
一、停流進(jìn)樣裝置 44
二、六通閥進(jìn)樣裝置 45
三、自動進(jìn)樣器 47
第四節(jié)　色譜柱 48
一、柱材料及規(guī)格 48
二、柱填料和柱壽命 49
三、保護(hù)柱 50
四、柱連接方式 51
五、柱溫控制 51
第五節(jié)　檢測器 52
一、檢測器的分類和響應(yīng)特性 52
二、紫外吸收檢測器 54
三、折光指數(shù)檢測器 60
四、電導(dǎo)檢測器 62
五、熒光檢測器 63
六、蒸發(fā)光散射檢測器 64
七、帶電荷氣溶膠檢測器 68
八、多角度光散射檢測器 70
九、質(zhì)譜檢測器 72
第六節(jié)　色譜數(shù)據(jù)處理裝置 81
一、手持控制器 81
二、化學(xué)工作站 81
第七節(jié)　高效液相色譜儀器的發(fā)展趨勢 82
一、從1969年到1992年 82
二、從1992年到2002年 83
三、從2002年到2012年 83
四、2012年到現(xiàn)在 84
參考文獻(xiàn) 88

第三章　液固色譜法和液液色譜法
第一節(jié)　分離原理 90
一、吸附系數(shù) 90
二、分配系數(shù) 91
第二節(jié)　固定相 92
一、液固色譜固定相 92
二、液液色譜固定相 106
第三節(jié)　流動相 107
一、表征溶劑特性的重要參數(shù) 109
二、液固和液液色譜的流動相 116
第四節(jié)　二元溶劑體系中液固和液液色譜的保留規(guī)律 117
一、溶質(zhì)保留值的基本方程式 117
二、液固色譜的保留值方程式 118
三、液液色譜的保留值方程式 118
參考文獻(xiàn) 119

第四章　正相和反相鍵合相色譜法
第一節(jié)　分離原理 120
一、正相鍵合相色譜法的分離原理 121
二、反相鍵合相色譜法的分離原理 121
第二節(jié)　固定相 123
一、鍵合固定相的制備及分類 123
二、鍵合固定相的性質(zhì) 129
三、使用鍵合固定相應(yīng)注意的問題 131
第三節(jié)　流動相 133
一、溶劑的選擇性分組 133
二、在鍵合相色譜分析中選擇流動相的一般原則 134
三、改善色譜分離選擇性的方法 138
四、多元混合溶劑的多重選擇性 140
五、由溶劑選擇性三角形描述混合溶劑組成的特性 143
六、溶質(zhì)保留值隨溶劑極性變化的一般保留規(guī)律 143
七、用線性溶劑化自由能關(guān)系（LSER）來表征反相液相色譜中溶質(zhì)的保留值方程式 144
第四節(jié)　新型高效化學(xué)鍵合固定相 146
一、新型單齒鍵合固定相 146
二、新型雙齒鍵合固定相 148
三、雜化有機(jī)/無機(jī)粒子材料 149
四、氟化烷基和苯基固定相 152
五、反相/離子交換混合模式固定相 154
第五節(jié)　化學(xué)鍵合固定相分類方法簡介 157
一、Tanaka分類方法 158
二、Tanaka分類表征方法 160
三、擴(kuò)展Tanaka分類方法 161
第六節(jié)　離子對色譜法 166
一、分離原理 166
二、固定相、流動相和對（反）離子 167
三、影響離子對色譜分離選擇性的因素 168
參考文獻(xiàn) 171

第五章　親水作用鍵合相色譜法
第一節(jié)　親水作用液相色譜的分離機(jī)理 176
一、分子極性 176
二、分離機(jī)理 176
第二節(jié)　固定相 178
一、固定相的分類 178
二、固定相保留特性及選擇性的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 188
第三節(jié)　流動相 197
一、流動相的組成 197
二、流動相對保留值和選擇性的影響 197
三、流動相各種影響因素的圖示方法 205
第四節(jié)　靜電排斥親水作用液相色譜 207
參考文獻(xiàn) 209

第六章　疏水作用鍵合相色譜法
第一節(jié)　疏水作用液相色譜的分離原理 211
一、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 212
二、疏水作用機(jī)理 212
三、兩親作用色譜 213
第二節(jié)　固定相 214
一、固定相載體 214
二、疏水配位體 215
第三節(jié)　流動相 215
一、流動相的組成 215
二、影響HIC分離選擇性的因素 216
第四節(jié)　疏水作用色譜的應(yīng)用 217
一、疏水作用色譜的操作過程 217
二、蛋白質(zhì)混合物的分離 218
參考文獻(xiàn) 219

第七章　梯度洗脫
第一節(jié)　基本原理 221
一、等度洗脫 221
二、梯度洗脫 222
第二節(jié)　影響梯度洗脫的各種因素 224
一、梯度洗脫時間（tG）對分離的影響 224
二、梯度陡度（T）對保留值的影響 224
三、強(qiáng)洗脫溶劑組分B濃度變化范圍（Δφ）的影響 225
四、柱溫變化對保留值的影響 227
五、梯度洗脫程序曲線形狀的影響 228
六、流動相流速（F）對梯度洗脫的影響 229
七、色譜柱死體積（Vm）對梯度洗脫時間（tG）的影響 231
八、色譜系統(tǒng)的滯留體積（VD）對梯度洗脫時間（tG）的影響 231
第三節(jié)　優(yōu)化梯度洗脫的方法 232
一、建立梯度洗脫方法的一般步驟 232
二、梯度洗脫中的實(shí)驗(yàn)條件 234
第四節(jié)　梯度洗脫的圖示方法 237
一、二元溶劑梯度洗脫 237
二、三元溶劑梯度洗脫 238
三、四元溶劑梯度洗脫 240
四、用極坐標(biāo)和球面坐標(biāo)描述梯度洗脫 241
參考文獻(xiàn) 243

第八章　高效液相色譜法的基本理論
第一節(jié)　表征液相色譜柱填充性能的重要參數(shù) 245
一、總孔率 246
二、柱壓力降 246
三、柱滲透率 247
第二節(jié)　高效液相色譜的速率理論 247
一、影響色譜峰形擴(kuò)展的各種因素 248
二、范第姆特方程式的表達(dá)及圖示 251
第三節(jié)　諾克斯方程式 252
一、描述色譜柱性能的折合參數(shù) 252
二、諾克斯方程式 253
三、諾克斯方程式在表面多孔粒子（SPP）填充色譜柱中的應(yīng)用 255
第四節(jié)　色譜柱的操作參數(shù)、“無限直徑” 效應(yīng)和柱外效應(yīng) 257
一、三個柱操作參數(shù)的表達(dá)式 257
二、“無限直徑”效應(yīng) 257
三、柱外效應(yīng) 259
第五節(jié)　分離阻抗和動力學(xué)圖 261
一、分離阻抗 261
二、動力學(xué)圖 262
第六節(jié)　超高效液相色譜 269
一、超高效液相色譜的理論基礎(chǔ) 269
二、實(shí)現(xiàn)超高效液相色譜的必要條件 271
三、超高效液相色譜的特點(diǎn)、現(xiàn)狀及在快速和超快速液相色譜分析中的應(yīng)用 277
四、HPLC和UHPLC之間的方法轉(zhuǎn)換 284
第七節(jié)　高效液相色譜分離條件的優(yōu)化 291
一、色譜參數(shù)的分類 291
二、色譜參數(shù)的相關(guān)性 291
三、色譜分離條件優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)的選擇 292
四、色譜分離條件的優(yōu)化方法 293
五、等度洗脫和梯度洗脫的優(yōu)化圖示方法 293
六、優(yōu)化HPLC分離條件的計(jì)算機(jī)輔助方法 296
參考文獻(xiàn) 297

第九章　微柱液相色譜法
第一節(jié)　方法簡介 299
一、微型柱的分類 300
二、微柱液相色譜法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn) 301
第二節(jié)　基本理論 302
一、柱外效應(yīng) 302
二、管壁效應(yīng) 305
三、稀釋效應(yīng) 307
四、分離阻抗 308
第三節(jié)　儀器裝置 308
一、輸液泵系統(tǒng) 309
二、進(jìn)樣系統(tǒng) 310
三、柱系統(tǒng) 314
四、檢測器系統(tǒng) 315
五、連接管和接頭 318
第四節(jié)　微柱的制備 319
一、評價(jià)微柱性能的重要參數(shù) 320
二、影響微柱分離效率的相關(guān)參數(shù) 321
三、微柱的制備方法 322
第五節(jié)　微柱液相色譜的新技術(shù) 326
一、納米液相色譜技術(shù) 327
二、填充毛細(xì)管柱超高壓液相色譜技術(shù) 335
參考文獻(xiàn) 343

第十章　二維高效液相色譜法
第一節(jié)　描述分離體系效能的參數(shù) 345
一、峰容量 345
二、信息量 347
第二節(jié)　二維高效液相色譜的技術(shù)功能 348
一、切割功能 349
二、反沖洗脫功能 350
三、痕量組分的富集功能 350
第三節(jié)　二維高效液相色譜的流路系統(tǒng) 350
一、多通路切換閥 351
二、流路系統(tǒng) 351
第四節(jié)　二維高效液相色譜在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的應(yīng)用 357
第五節(jié)　二維高效液相色譜在食品分析中的應(yīng)用 368
一、離線全二維高效液相色譜分析藍(lán)莓中的色素 369
二、在線全二維高效液相色譜分析脂肪酸三甘油酯 370
三、在線全二維高效液相色譜分析紅辣胡椒中的類胡蘿卜素和類胡蘿卜素酯 371
四、在線全二維高效液相色譜分析天然抗氧化劑中的有效成分 371
參考文獻(xiàn) 372

第十一章　高效液相色譜新技術(shù)進(jìn)展
第一節(jié)　整體色譜柱 374
一、聚合物整體柱 375
二、硅膠整體柱 378
第二節(jié)　綠色流動相 383
一、超熱水流動相 384
二、其他綠色流動相 387
第三節(jié)　剪切驅(qū)動色譜 387
一、儀器構(gòu)成及操作方法 388
二、固定相、流動相和分析實(shí)例 390
第四節(jié)　超高效合相色譜 391
一、超高效合相色譜方法原理簡介 391
二、超高效合相色譜儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 394
三、超高效合相色譜儀的性能特點(diǎn) 398
參考文獻(xiàn) 402

第十二章　建立高效液相色譜分析方法的一般步驟和實(shí)驗(yàn)技術(shù)
第一節(jié)　樣品的性質(zhì)及柱分離模式的選擇 405
一、樣品的溶解度 405
二、樣品的分子量范圍 406
三、樣品的分子結(jié)構(gòu)和分析特性 406
第二節(jié)　分離操作條件的選擇 412
一、容量因子和死時間的測量 412
二、色譜柱操作參數(shù)的選擇 413
三、樣品組分保留值和容量因子的選擇 414
四、相鄰組分的選擇性系數(shù)和分離度的選擇 414
第三節(jié)　高效液相色譜法的實(shí)驗(yàn)技術(shù) 416
一、溶劑的純化技術(shù) 416
二、色譜柱的裝填技術(shù) 416
三、色譜柱的平衡、保護(hù)與清洗、再生技術(shù) 420
四、梯度洗脫技術(shù) 425
五、色譜柱前和柱后的衍生化技術(shù) 426
六、樣品的預(yù)處理技術(shù) 428
參考文獻(xiàn) 437

符號表 439