總序
論叢前言
前言
章 緒論
1.1 RNA指導的DNA甲基化
1.2 siRNA的產(chǎn)生
1.3 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶
1.3.1 MET1
1.3.2 CMT3
1.3.3 重新甲基化酶DRM及不對稱甲基化
1.3.4 DNA甲基化復合體
第2章 材料與方法
2.1 實驗材料
2.2 方法
2.2.1 植物總DNA的提。–TAB法)
2.2.2 植物總RNA提。≧Neasy Plant Mini Kit, QIAGEN)
2.2.3 cDNA合成(SuperScript.ⅢFirst-Strand Synthesis System, Invitrogen)
2.2.4 感受態(tài)的制備與轉(zhuǎn)化
2.2.5 DNA的回收(離心柱型普通瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒QIAGEN)
2.2.6 RNA分析
2.2.7 DNA甲基化分析
2.2.8 6xHis-tagged蛋白質(zhì)純化(Ni - NTA Fast Start Kit,QIAGEN)
2.2.9 位點突變(QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit, Stratagene)
2.2.10 凝膠阻滯分析(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)
2.2.11 免疫共沉淀
2.2.12 免疫熒光法和顯微鏡
2.2.13 植物染色體蛋白的免疫染色
2.2.14 染色質(zhì)免疫沉淀
第3章 結(jié)果與分析
3.1 通過篩選rosl的抑制子,確定了RDM1是轉(zhuǎn)錄基因沉默途徑中的一個新成員
3.1.1 ROSl:植物中去甲基化酶的發(fā)現(xiàn)
……
第4章 RDM3和RDM4
第5章 結(jié)論與討論